Tế bào sắc tốB5（Cytochrome B5）Xác định nội dung Kit Kể chuyện

Phương pháp vi lượng 100T/96S

Cần lấy trước khi xét nghiệm chính thức 2-3 Một mẫu có sự khác biệt lớn để dự đoán.Xác định ý nghĩa:

Tế bào sắc tốP450 Enzyme là một nhóm các đồng enzyme chủ yếu được tìm thấy trong gan và có vai trò quan trọng trong quá trình chuyển hóa các chất ngoại sinh, đặc biệt là thuốc vàSự trao đổi chất của chất độc. Tế bào sắc tố P450 và cytochromeB5 làP450 Hai protein hemoglobin của dòng enzyme, thay đổi tỷ lệ với P450 Cuộc sống trao đổi chấtTình dục có liên quan mật thiết.

Nguyên tắc xác định:

Cytochrome loại oxy hóa B5 2) Về tình hình ở nước ta ( Số lượng 424nm Ở đó có đỉnh hấp thụ tối đa, thông qua đo lường Số lượng 424nm và 490nm Sự khác biệt về giá trị hấp thụ có thể được tính toánraTế bào sắc tốB5Hàm lượng.

Bộ dụng cụ đo hàm lượng cytochrome b5 Dòng P450

Thành phần:

Thuốc thử 1: Bột×2 chai,4℃Để dành. Trước khi sử dụng. 100ml Nước cất, hòa tan hoàn toàn.

Công thức chất lỏng làm việc:

Chuẩn bị trước khi sử dụng, đeo găng tay dùng một lần, cẩn thận mở nắp ba chai thuốc thử, cộng với thuốc thử hai 20 ml hòa tan hoàn toàn,4℃Bảo vệ khỏi ánh sáng 1 Hàng tuần.

Các thông số của sản phẩm cụ thể tùy thuộc vào các thông số nhận được hướng dẫn sử dụng sản phẩm

Tự chuẩn bị dụng cụ và vật tư:

Máy ly tâm thông thường,Máy ly tâm tốc độ,Súng pipet có thể điều chỉnh,Máy quang phổ UV,,/Máy đo Enzyme, đĩa đo màu thủy tinh vi lượng/96 Tấm lỗ, và hấpNước cất.

Cytochrome trong mẫu B5 Khai thác：

1、Loại bỏ nhân, các chất đại phân tử như ty thể:Cân khoảng 0.5g Tổ chức, tham gia 1 ml Thuốc thử một, nghiền kỹ trên băng,10 000g 4℃lyTrái tim 30 phútLấy thanh dịch, chuyển vào trong ống ly tâm siêu tốc.

2、Vi thể thô:100 000g，4℃Ly tâm 60 phútVứt bỏ thanh dịch.

3、Trừ các tạp chất như huyết sắc tố:Bước tới 2 Sự lắng đọng. 1 ml Thuốc thử một, sau khi đậy chặt thì tan hết chấn động,100 000g Ly tâm 30 phútBỏ đi.Dịch thượng thanh.

4、Để kiểm tra dịch:Bước tới 3 Thêm thuốc thử vào lượng mưa. 0,5 mlSau khi đậy chặt thì chấn động hòa tan đầy đủ, tức là đợi đo dịch, nên đợi đo dịch cần cùng ngày đo định.

Tế bào sắc tố B5 Hoạt động đo nội dung:

1. Máy quang phổ/Máy đo Enzyme Preheat 30 phút。

2. Chất lỏng làm việc đặt 25℃Làm nóng trước khi tắm nước 30 phút。

3. Ống trống:取 1 ml Đĩa thủy tinh, thêm vào. 10 μl nước cất,200μl Chất lỏng làm việc, để ở nhiệt độ phòng 2 phút，Số lượng 424nm và 490nm Hútgiá trị ánh sáng,Số lượng 424nm Ghi lại giá trị hút sáng.A Trống ống 1，490nm Ghi lại giá trị hút sáng.A Trống ống 2。△A Trống ống=A Trống ống 1-A Trống rỗngTrắng Ống 2

4. Ống đo:取 1 ml Đĩa thủy tinh, thêm vào. 10 μl Để kiểm tra dịch.200μl Chất lỏng làm việc, để ở nhiệt độ phòng 2 phút，Số lượng 424nm và 490nm Hútgiá trị ánh sáng,Số lượng 424nm Ghi lại giá trị hút sáng.A Xác định ống 1，490nm Ghi lại giá trị hút sáng.A Xác định ống 2。

△A Xác định ống=A Xác định ống 1-A Xác định ống 2。

Chú ý: Chỉ cần làm một ống trống.

Cytochrome mẫu B5 Công thức tính nội dung:

a.Công thức tính toán được thực hiện bằng cách sử dụng một đĩa đo màu thạch anh vi lượng như sau:

（1）Tính theo nồng độ protein

Tế bào sắc tốB5 Nội dung(nmol / mg) Prot) = (△A Xác định ống-△A Trống ống÷ (ε × d) × V Chống Tổng÷（Cpr × V Mẫu）

=122.8×(△A Xác định ống-△A Trống ống÷Cpr

（2）Tính theo chất lượng mẫu

Tế bào sắc tốB5 Hàm lượng (Nmol / g Trọng lượng (= (△A Xác định ống-△A Trống ống÷ (ε × d) × V Chống Tổng×（V Mẫu tổng÷V Mẫu）÷W

=61.4×(△A Xác định ống-△A Trống ống÷W

εNguyên mẫu CytochromeB5 Hệ số tiêu quang nano,171×10^-6 L / nmol / cm；dKích hoạt bàn phím ảo (Cm），1 cm； V Anti-Total: Tổng thể tích của hệ thống phản ứng,210 μl = 2,1 × 10^-4 L；Cprmạc đường ruột muqueuses digestives (Mg / ml) Cần xác định khác;VMẫu: Thêm thể tích dịch được đo vào hệ thống phản ứng,10 μl = 0,01 ml；VMẫu tổng: tổng thể tích dịch đợi đo,0,5 ml；Wchất lượng (g）。

b.Sử dụng 96 Công thức tính toán để xác định tấm lỗ như sau

（1）Tính theo nồng độ protein

Tế bào sắc tốB5 Nội dung(nmol / mg) Prot) = (△A Xác định ống-△A Trống ống÷ (ε × d) × V Chống Tổng÷（Cpr × V Mẫu）

=245.6×(△A Xác định ống-△A Trống ống÷Cpr

（2）Tính theo chất lượng mẫu

Tế bào sắc tốB5 Hàm lượng (Nmol / g Trọng lượng (= (△A Xác định ống-△A Trống ống÷ (ε × d) × V Chống Tổng×（V Mẫu tổng÷V Mẫu）÷W

=122.8×(△A Xác định ống-△A Trống ống÷W

εNguyên mẫu CytochromeB5 Hệ số tiêu quang nano,171×10^-6 L / nmol / cm；d：96 Chiều dày mối hàn góc (Cm），0,5 cm； V Anti-Total: Tổng thể tích của hệ thống phản ứng,210 μl = 2,1 × 10^-4 L；Cprmạc đường ruột muqueuses digestives (Mg / ml) Cần xác định khác;VMẫu: Thêm thể tích dịch được đo vào hệ thống phản ứng,10 μl = 0,01 ml；VMẫu tổng: tổng thể tích dịch đợi đo,0,5 ml；Wchất lượng (g）。

Bộ dụng cụ đo hàm lượng cytochrome b5 Dòng P450