Hướng dẫn sử dụng bộ dụng cụ xác định hàm lượng protein bằng phương pháp urea co đôi

Phương pháp vi lượng 100T/96S

Lưu ý: Lựa chọn trước khi xác định chính thức 2-3 Một mẫu có sự khác biệt lớn được dự đoán để đảm bảo nồng độ protein trong 1 ~ 10mg / ml phạm viBên trong.

Xác định ý nghĩa:

Hàm lượng protein hòa tan trong mẫu thường được sử dụng để tính toán hoạt động của enzyme. Ngoài ra, hàm lượng protein hòa tan cũng được sử dụng để phân tích chất lượng như thực phẩm.

Nguyên tắc xác định:

Trong dung dịch kiềm mạnh, urea co đôi và CuSO4 Sự hình thành phức hợp màu tím; Độ sâu của màu sắc phức tạp màu tím tỷ lệ thuận với nồng độ protein vàTrọng lượng phân tử protein và thành phần axit amin không liên quan, vì vậy nó có thể được sử dụng để xác định hàm lượng protein. Phạm vi của phương pháp này là 1 ~ 10mg Protein, thích hợp cho các mẫu có nồng độ protein cao, đặc biệt là vật liệu động vật.

Bộ dụng cụ xác định hàm lượng protein bằng phương pháp urea co đôi - Thường trực trong kho

Thành phần:

Sản phẩm tiêu chuẩn: Chất lỏng 1 ml × 1 chai,5 mg / ml, 4 ° CĐể dành.

Tự chuẩn bị dụng cụ và vật tư：

Máy ly tâm, máy quang phổ nhìn thấy/Máy đánh dấu enzyme, đĩa so sánh thạch anh vi lượng/96 Tấm lỗ, pipet và nước cất.

Các thông số của sản phẩm cụ thể tùy thuộc vào các thông số nhận được hướng dẫn sử dụng sản phẩm

Chiết xuất protein hòa tan trong mẫu:

1, mẫu chất lỏng:Làm rõ các mẫu chất lỏng không màu có thể được xác định trực tiếp.

2, Tổ chức mẫu:chất lượng (g): Thể tích chiết xuất (ml)vì 1：5~10 Hàm lượng (Đề nghị đặt hẹn 0.1g Tổ chức, tham gia 1 mlThiết bị vớt váng dầu mỡ cho xử lý nước thải -PetroXtractor - Well Oil Skimmer (））

Băng tắm đều đặn,8000g, 4 ℃Ly tâm 10min， Lấy ra thanh lý, tức là đợi đo dịch. (Các mẫu động vật thường được pha loãng)）

3 Vi khuẩn, nấm: theo số lượng tế bào.104 điểm)Nguyên văn: Não tử khuyết căn cân ((ml)vì Tỷ lệ 500-1000 (đề nghị 5 triệu tế bàotham gia 1 ml Thiết bị vớt váng dầu mỡ cho xử lý nước thải -PetroXtractor - Well Oil Skimmer (công suất 300w, siêu âm 3 giây, khoảng cách 7 giây, tổng thời gian 3 phút);sau đó 8000g，

4℃Ly tâm. 10 phútLấy thanh đặt trên băng đợi kiểm tra.

Hoạt động đo lường:

1. Máy quang phổ/Máy đo Enzyme Preheat 30 phútĐiều chỉnh bước sóng đến 540 NmNước cất được điều chỉnh bằng 0.

2. Ống trống:取 0,5 ml EP ống, tham gia 40μl nước cất,200μl Thuốc thử 1: Để nhiệt độ phòng sau khi trộn đều 15 phút， 取 200μl Với dấu vếtĐĩa so màu thủy tinh/96 tấm lỗ,Số lượng: 540nm So màu, nhớ là......A Ống trắng.

3. Ống tiêu chuẩn:取 0,5 ml EP ống, tham gia 40μl chất lỏng tiêu chuẩn,200μl Thuốc thử 1: Để nhiệt độ phòng sau khi trộn đều 15 phút， 取 200μl Đối với đĩa thủy tinh nhỏ/96 tấm lỗ, 540 nmSo màu, nhớ là...... Một ống tiêu chuẩn.

4. Ống đo:取 0,5 ml EP ống, tham gia 40μl Để kiểm tra dịch.200μl Thuốc thử 1: Để nhiệt độ phòng sau khi trộn đều 15 phút， 取 200μl Với dấu vếtĐĩa so màu thủy tinh/96 tấm lỗ,Số lượng: 540nm So màu, nhớ là......A Ống đo.

Lưu ý: Ống trống và ống tiêu chuẩn chỉ cần được đo một lần.

Công thức tính nồng độ protein trong mẫu:

C Kiểm tra (Mg / ml=C Tiêu chuẩn ống× (A) Ống đo -A Trống ống÷ (A) Tiêu chuẩn ống -A Trống ống)

= 5 × A Ống đo -A Trống ống÷ (A) Tiêu chuẩn ống -A Trống ống)

Lưu ý:

1. Nồng độ protein mẫu phải 1 ~ 10mg / mlTrong phạm vi, thấp hơn 1 mg / mlKhông thể sử dụng phương pháp này, cao hơn 10 mg/ml cần pha loãng tương ứng. Do đó đoSử dụng trước 1～2Làm thí nghiệm trước để đảm bảo nồng độ protein trong Trong khoảng 1-10mg/ml.

2. Mẫu được thử nghiệm chiết xuất protein có sẵn nước muối sinh lý, hơi nước đôi hoặc không có protein PBS Giải cứu. Luật này chịu ảnh hưởng của amoni sulfat,Tris Nhiễu đệm, nângCác chất này nên được miễn phí trong việc lấy chất lỏng; Nếu không, hãy dùng nó.Bộ dụng cụ đo hàm lượng protein BCA.

Bộ dụng cụ xác định hàm lượng protein bằng phương pháp urea co đôi - Thường trực trong kho