Bộ dụng cụ kiểm tra hàm lượng axit phytic Phương pháp vi lượng

Hướng dẫn sử dụng bộ dụng cụ kiểm tra hàm lượng axit phytic

Phương pháp vi lượng

Số hàng:Bc5845

quy cách100T/48S

Thành phần sản phẩm: Vui lòng kiểm tra cẩn thận khối lượng thuốc thử và khối lượng trong chai trước khi sử dụng, nếu có thắc mắc, vui lòng liên hệ với nhân viên Solebao kịp thời.

Công thức của giải pháp:

1, Thuốc thử II: trước khi sử dụng thêm thuốc thử 4mL I, hòa tan hoàn toàn; Bảo quản với thuốc thử bất tận -20 ℃.4Chu, tránh đông lạnh nhiều lần;

2, Thuốc thử III: trước khi sử dụng thêm 2.36mL nước cất hòa tan hoàn toàn, sau đó đưa đầu súng vào bề mặt chất lỏng từ từ thêm vào0,64 mLAxit sulfuric đậm đặc, pha trộn đầy đủ; 2-8 ℃ có thể được bảo quản4tuần;

3, Thuốc thử IV: trước khi sử dụng thêm 15mL nước cất hòa tan đầy đủ, sau đó đầu súng được đưa vào dưới bề mặt chất lỏng từ từ thêm vào15 μLAxit sulfuric đậm đặc, pha trộn đầy đủ; 2-8 ℃ có thể được bảo quản4tuần;

B5-03=giá trị thông số Ki, (cài 3)6 mL，40T)Tỉ lệ trộn đều, sau khi phối trí dùng hết trong ngày;

Sản phẩm tiêu chuẩn: trước khi sử dụng thêm thuốc thử 1.08mL sau khi hòa tan hoàn toàn, được xây dựng thành sản phẩm tiêu chuẩn axit phytic 10μmol/mL, bảo quản 2-8oC trong 4 tuần;

Sản phẩm tiêu chuẩn 250nmol/mL: 50 μL 10 μmol/mL tiêu chuẩn axit phytic và 450 μL nước cất trộn thành 1 μmol/mL tiêu chuẩn (tức là 1000nmol/mL); Thêm 250 μL 1000nmol/mL tiêu chuẩn và750μL nước cất hỗn hợp được xây dựng thành 250nmol/mL axit phytic tiêu chuẩn để xác định ống tiêu chuẩn bảng hoạt động dưới đây, bây giờ được sử dụng.

Mô tả sản phẩm:

Axit phytic (phytic acid), còn được gọi là inositol hexaphosphate, cyclohexanol hexaphosphate, thường được tìm thấy trong các tế bào nhân chuẩn, đóng một vai trò quan trọng trong nhiều hoạt động của tế bào như: duy trì cân bằng phốt pho vô cơ, tham gia vào truyền tín hiệu hormone thực vật, tham gia như một đồng yếu tố của enzymeDNASửa chữa,Sản phẩm RNABiên tập viên vàmRNAĐầu ra. Axit phytic cung cấp nguồn phốt pho chính trong quá trình nảy mầm và tăng trưởng của cây và được tìm thấy rộng rãi trong thực phẩm thực vật như ngũ cốc, đậu, trái cây, rau và trái cây sấy khô.

Trong điều kiện môi trường nhất định, phytase có thể phân hủy natri phytate (inositol dodecodium hexaphosphate) để tạo ra phốt pho vô cơ và dẫn xuất inositol, trong điều kiện axit, phốt pho vô cơ và chất kết màu amoni molybdate phản ứng để tạo ra chất xanh molybdenum, có đỉnh hấp thụ đặc trưng ở 700nm, hàm lượng axit phytic có thể được tính bằng cách xác định hàm lượng phốt pho vô cơ.

Lưu ý: Trước khi thí nghiệm đề nghị chọn 2 - 3 mẫu có sự khác biệt lớn để làm tiền thí nghiệm.

Dụng cụ và đồ dùng cần tự chuẩn bị:

Máy quang phổ/Enzyme có thể nhìn thấy, máy ly tâm nhiệt độ thấp, nồi tắm nước/Tủ nuôi cấy nhiệt độ không đổi Cân phân tích Đĩa đo màu thủy tinh Micro/96Tấm lỗ, súng pipet có thể điều chỉnh, cối/Máy cân đối,Axit sulfuric đậm đặc（>98%，AR）Băng và nước cất.

Quy trình thực hiện:

Một,Xử lý mẫu(Có thể điều chỉnh kích thước mẫu cần kiểm tra thích hợp, tỷ lệ cụ thể có thể tham khảo tài liệu)

1. Mẫu thực vật tươi: theo khối lượng (g): chiết xuất một khối lượng(mL)vì1：5~10REFERENCES [Tên bảng tham chiếu] (0.1gTham gia1 mL1) Thêm chất lỏng chiết xuất 1, sau khi cân bằng đầy đủ, nhiệt độ bình thường bị chấn động2 giờSau đó......4℃，10000gLy tâm10 phút， 取0,8 mLCho thêm chất lỏng vào từ từ.0,15 mLChiết xuất dịch thứ hai, chậm rãi thổi trộn đều đến khi không có bong bóng khí sinh ra,4 ℃ 10000gLy tâm10 phútSau đó lấy thanh toán chờ kiểm tra.

2. Mẫu thực vật bột khô: theo khối lượng (g): chiết xuất một khối lượng(mL)vì1：5~20REFERENCES [Tên bảng tham chiếu] (0.05gTham gia1 mL1) Thêm chất lỏng chiết xuất 1, sau khi cân bằng đầy đủ, nhiệt độ bình thường bị chấn động2 giờSau đó......4℃，10000gLy tâm10 phút， 取0,8 mLCho thêm chất lỏng vào từ từ.0,15 mLChiết xuất dịch thứ hai, chậm rãi thổi trộn đều đến khi không có bong bóng khí sinh ra,4 ℃ 10000gLy tâm10 phútSau đó lấy thanh toán chờ kiểm tra.

3. Mẫu chất lỏng: lấy 100 μL chất lỏng và thêm vào1 mLChiết xuất 1. Nhiệt độ bình thường.2 giờSau đó......4℃，10000gLy tâm10 phút， 取0,8 mLCho thêm chất lỏng vào từ từ.0,15 mLChiết xuất dịch thứ hai, chậm rãi thổi trộn đều đến khi không có bong bóng khí sinh ra,4 ℃ 10000gLy tâm10 phútSau đó lấy thanh toán chờ kiểm tra.

Ghi chú:Chiết xuất IICần thêm vào từ từ, sau khi thêm vào sẽ tạo ra rất nhiều bong bóng, đề nghị sử dụng2mL EP ống hoạt động.

II. Các bước xác định

1. Máy quang phổ có thể nhìn thấy/Máy đo Enzyme Preheat30 phútTrên đây, điều chỉnh bước sóng tới700nmCó thể thấy được quang phổ kế chưng cất nước điều chỉnh 0.

2. Bảng hoạt động: (thêm các thuốc thử sau vào ống 1,5mLEP)

III. Tính toán hàm lượng axit phytic

1. Tính theo nồng độ protein mẫu

mạc đường ruột muqueuses digestives (nmol / mg prot)=ΔA thử nghiệm×CTrang chủ÷ΔTiêu chuẩn A×VMẫu÷(V)Mẫu×Cpr) = 250×ΔA thử nghiệm÷ΔTiêu chuẩn A÷Cpr

2. Theo chất lượng mẫu

mạc đường ruột muqueuses digestives (nmol/g chất lượng)=ΔA thử nghiệm×CTrang chủ÷ΔTiêu chuẩn A× (V)Thượng Thanh+ VChiết xuất II÷ (W × V)Thượng Thanh÷VChiết xuất một)

=296.875×ΔA thử nghiệm÷ΔTiêu chuẩn A÷W

3. Theo thể tích chất lỏng

mạc đường ruột muqueuses digestives (nmol / mL)=ΔA thử nghiệm×CTrang chủ÷ΔTiêu chuẩn A× (V)Thượng Thanh+ VChiết xuất II÷ [V]Chất lỏng×VThượng Thanh÷(V)Chiết xuất một+ VChất lỏng)]

=3265.625×ΔA thử nghiệm÷ΔTiêu chuẩn A

Tiêu chuẩn C: Nồng độ ống tiêu chuẩn, 250nmol/mL； Mẫu V: Thêm khối lượng mẫu,0,12 mLV. Thanh lọc: khối lượng chất lỏng được làm sạch khi chiết xuất,0,8 mL；VExtract II: thêm thể tích của Extract II,0,15 mL；VChiết xuất một: một thể tích chiết xuất được thêm vào,1 mLCpr: nồng độ protein mẫu,Mg / mL; V lỏng: khối lượng mẫu chất lỏng,0,1 mLW: Chất lượng mẫu,g。

Lưu ý:

1, Nếu∆A. Xét nghiệm nhỏ hơn0.010Hoặc xác định giá trị hấp thụ ánh sáng của ống gần với ống trống, bạn có thể tăng kích thước mẫu trước khi xác định; nếu∆A. Xác định lớn hơn1Đề nghị pha loãng mẫu bằng nước cất thích hợp rồi mới tiến hành đo lường. Lưu ý sửa đổi đồng bộ công thức tính toán.

2. Nếu mẫu vật xuất hiện vẩn đục sau khi thêm vào dịch làm việc, đề nghị pha loãng nước cất trên mẫu một cách thích hợp rồi mới xác định. Lưu ý sửa đổi đồng bộ công thức tính toán.

3. Chất chiết xuất 1 chứa chất kết tủa protein, vì vậy chất lỏng thượng thanh không thể dùng để xác định nồng độ protein. Để xác định hàm lượng protein, cần lấy mẫu khác.

Ví dụ thực nghiệm:

Lấy mẫu hành tây 0,1044g, thực hiện theo các bước chiết xuất và xác định96Đo lường tấm lỗ:ΔA thử nghiệm= AXác định- AĐối chiếu=0.411-0.375=0.036，ΔTiêu chuẩn A= Atiêu chuẩn- AKhoảng trắng=0.811-0.096=0.715Tính theo chất lượng mẫu:

mạc đường ruột muqueuses digestives (nmol/g chất lượng)=296.875×ΔA thử nghiệm÷ΔTiêu chuẩn A÷W = 143,18nmol/g khối lượng.

2. Cân 0,05g bột mì, làm theo các bước chiết xuất và các bước xác định, với96Đo lường tấm lỗ:ΔA thử nghiệm= AXác định- AĐối chiếu=0.331-0.188=0.143，ΔTiêu chuẩn A= Atiêu chuẩn- AKhoảng trắng=0.811-0.096=0.715Tính theo chất lượng mẫu:

mạc đường ruột muqueuses digestives (nmol/g chất lượng)=296.875×ΔA thử nghiệm÷ΔTiêu chuẩn A÷W = 1187,5nmol/g khối lượng.

Tài liệu tham khảo:

[1] Senna R, Simonin V, Silva-Neto MAC, et al. Sự cảm ứng của hoạt động axit phosphatase trong quá trình nảy mầm của hạt ngô (Zea mays). [J]. Sinh lý và sinh hóa thực vật, 2006, 44(7-9):467-473.

[2] Iqbal T H, Lewis K O, Cooper B T. Hoạt động phytase trong ruột nhẹ của con người và chuột [J]. Gut, 1994, 35(9):1233-1236.

[3] Azeke MA, Egielewa SJ, Ihimire E. Tác động của nảy mầm đối với hoạt động phytase, phytate và tổng hàm lượng phốt pho của gạo (Oryza sativa), ngô (Zea mays), bùn (Panicum miliaceum), sorghum (Sorghum bicolor) và lúa mì (Triticum aestivum) [J]. Tạp chí Khoa học và Công nghệ Thực phẩm, 2011.

Dòng sản phẩm liên quan:

B5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)BAX) Bộ kiểm tra hoạt động

Bộ xét nghiệm hoạt tính BC2540/BC2545 Cellulase (CL)

BC0360/BC0365 β-1, Hạt chia organic (β-1,3-GA) Bộ kiểm tra hoạt động

BC3140/BC3145 Bộ xét nghiệm hoạt động phytase

Bộ dụng cụ kiểm tra hàm lượng axit phytic Phương pháp vi lượng Bộ dụng cụ kiểm tra hàm lượng axit phytic Phương pháp vi lượng