Glucose oxidase (GOD) Test Box Phương pháp vi lượng

Bộ xét nghiệm Glucose Oxase (GOD)
Phương pháp vi lượng
Số hàng:Bc0695
quy cách100T/96S

Nội dung sản phẩm:
Chiết xuất:Chất lỏng 100mL × 1 chai, 4 ℃ bảo quản;
Thuốc thử một:Chất lỏng 15mL × 1 chai, 4 ℃ bảo quản;
Thuốc thử 2:Chất lỏng 3mL × 1 chai, 4 ℃ bảo quản;
Thuốc thử 3:Chất lỏng 1mL × 1 cái, -20 ℃ bảo quản, sau khi tan chảy có thể được đóng gói riêng để bảo quản.

Mô tả sản phẩm:
GOD (EC 1.1.3.4) được tìm thấy rộng rãi ở động vật và thực vật, xúc tác quá trình oxy hóa glucose để tạo ra axit glucose và tạo ra H 2 O 2, một trong những con đường trao đổi chất tạo ra oxy phản ứng trong các sinh vật sống.
GOD xúc tác sản xuất glucose H 2 O 2, oxy được tạo ra bởi peroxidase xúc tác sự phân hủy H 2 O 2 trong sự hiện diện của hiếu khí, do đó oxy hóa anilin láng giềng để tạo ra các chất màu, màu sắc nông và hoạt động của glucose oxidase thành tuyến tính.

Cần có thiết bị và dụng cụ riêng
Máy đo quang phổ/Enzyme có thể nhìn thấy, nồi tắm nước, máy ly tâm để bàn, pipet có thể điều chỉnh, đĩa đo màu vi lượng/tấm 96 lỗ, cối, đá và nước cất

Các bước hoạt động
I. Chuẩn bị xác định mẫu
1, điều trị mô: được gọi là khoảng 0,1g mô, thêm 1mL chiết xuất cho nước đá tắm san lấp mặt bằng; 8000g 4 ℃ ly tâm 10 phút, lấy sạch và đặt trên băng để đo.
2. Huyết thanh (tương): Kiểm tra trực tiếp.
II. Các bước xác định
1, Máy quang phổ hoặc máy đo enzyme làm nóng trước hơn 30 phút, điều chỉnh bước sóng 500nm, làm 0 nước cất.
2. Chế biến dung dịch làm việc của God: lấy thuốc thử 15 ml một thêm thuốc thử 3 ml hai trộn đều, điều chỉnh pH 5.1 (hiện phối hiện dùng).
3. Bảng mẫu:
Tên thuốc thử (μL) Xác định ống
Chất lỏng làm việc GOD 174
Thuốc thử 3 6
Trộn đều, 37 ℃ (động vật có vú) hoặc 25 ℃ (các loài khác) 5 phút
Mẫu 20
Chất lỏng làm việc GOD và thuốc thử ba được đặt trong bồn tắm nước 37 ℃ để giữ ấm trước khi xác định mẫu, sau đó các thuốc thử trên được thêm vào tỷ lệ dấu vết theo thứ tự
Trong đĩa màu/96 lỗ, thêm mẫu đồng thời bắt đầu tính giờ; Độ hấp thụ ban đầu A1 ở 20 giây được ghi lại ở bước sóng 500 nm và A2 ở 1 phút 20 giây. Tính ΔA=A2-A1.
B5-03=giá trị thông số Ki, (cài 3)
a. Công thức tính toán được xác định bằng đĩa tỷ lệ thạch anh vi lượng như sau:
1, Tính toán sức sống của tổ chức động vật GOD
(1) Tính theo nồng độ protein
Định nghĩa đơn vị: Mỗi mg histone xúc tác mỗi phút trong hệ thống phản ứng để tạo ra 1 μmol oxy hóa orthoanilamine được định nghĩa là một đơn vị hoạt động enzyme.
GOD (U/mg prot)=ΔA ÷ (ε× d) × V Tổng ngược ÷ (Cpr × V mẫu) ÷ T=1333 × ΔA ÷ Cpr
(2) Tính theo trọng lượng tươi của mẫu
Định nghĩa đơn vị: Mỗi g mô xúc tác mỗi phút trong hệ thống phản ứng để tạo ra 1 μmol oxy hóa lân cận anilin được định nghĩa là một đơn vị hoạt động enzyme.
GOD (U/g Trọng lượng tươi)=ΔA ÷ (ε× d) × V Tổng số ngược ÷ (W ÷ V Trích xuất × V Mẫu) ÷ T=1333 × A ÷ W
B5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)
Định nghĩa đơn vị: Mỗi mL huyết thanh (plasma) xúc tác sản xuất 1 μmol oxy hóa orthoanilamine mỗi phút trong hệ thống phản ứng được xác định là một đơn vị hoạt động enzyme.
GOD (U/mL)=ΔA ÷ d ÷ ε × V Phản tổng ÷ T ÷ V Mẫu=1333 × A
V phản tổng: tổng thể tích phản ứng, 0,2mL; mẫu V: thêm thể tích mẫu, 0,02mL; V chiết xuất, thêm thể tích chiết xuất,
1mL; cpr: nồng độ protein mẫu, mg/mL； W: mẫu tươi và nặng, g; d: đường kính ánh sáng, 1cm; ε: hệ số tuyệt chủng lân cận oxy hóa, 7,5 × 10-3 mL/μmol/cm; T: Thời gian phản ứng, 1 phút.
b. Công thức tính toán được xác định bằng tấm 96 lỗ như sau:
1, Tính toán sức sống của tổ chức động vật GOD
(1) Tính theo nồng độ protein
Định nghĩa đơn vị: Mỗi mg histone xúc tác mỗi phút trong hệ thống phản ứng để tạo ra 1 μmol oxy hóa orthoanilamine được định nghĩa là một đơn vị hoạt động enzyme.
GOD (U/mg prot)=ΔA ÷ (ε× d) × V Tổng ngược ÷ (Cpr × V mẫu) ÷ T=2222 × ΔA ÷ Cpr
(2) Tính theo trọng lượng tươi của mẫu
Định nghĩa đơn vị: Mỗi g mô xúc tác mỗi phút trong hệ thống phản ứng để tạo ra 1 μmol oxy hóa lân cận anilin được định nghĩa là một đơn vị hoạt động enzyme.
GOD (U/g Trọng lượng tươi)=ΔA ÷ (ε× d) × V Chống tổng ÷ (W ÷ V Khai thác × V Mẫu) ÷ T=2222 × A ÷ W
B5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)
Định nghĩa đơn vị: Mỗi mL huyết thanh (plasma) xúc tác sản xuất 1 μmol oxy hóa orthoanilamine mỗi phút trong hệ thống phản ứng được xác định là một đơn vị hoạt động enzyme.
GOD (U/mL)=ΔA ÷ d ÷ ε × V Phản tổng ÷ T ÷ V Mẫu=2222 × ΔA
Phản tổng V: tổng thể tích phản ứng, 0,2mL; mẫu V: thể tích mẫu thêm, 0,02mL; cpr: nồng độ protein mẫu, mg/mL；
W: mẫu tươi và nặng, g; d: đường kính ánh sáng, 0,6cm; ε: hệ số khử trùng orthoanilin oxy hóa, 7,5 × 10-3 mL/μmol/cm; T: Thời gian phản ứng, 1 phút.
1. Sức sống của Thượng Đế trong các mô cân bằng khác nhau không giống nhau, trước khi làm thí nghiệm chính thức xin làm 1 - 2 con dự thi, nếu A2 - A1>1,
Sau đó, nó chỉ ra rằng sức sống của mô là quá cao, nó phải được pha loãng với chiết xuất vào nồng độ thích hợp của chất lỏng đồng đều, làm cho A2-A1<1,
Để tăng độ nhạy phát hiện.
Nếu hiện tượng A1>A2 xảy ra trong quá trình thí nghiệm, hãy pha loãng mẫu với chiết xuất ở nồng độ thích hợp.
2. Hai người đồng thời làm thí nghiệm này, một người so màu, một người tính giờ, để đảm bảo kết quả thí nghiệm chính xác.
3, Bộ dụng cụ này chỉ áp dụng cho mô động vật và huyết thanh động vật (plasma).

Glucose oxidase (GOD) Test Box Phương pháp vi lượng Glucose oxidase (GOD) Test Box Phương pháp vi lượng