Bộ dụng cụ kiểm tra hoạt động của chất ức chế butylcholesty * esterase

Hướng dẫn sử dụng bộ dụng cụ kiểm tra hoạt động của chất ức chế butylcholesty * esterase

Quang phổ có thể nhìn thấy

Số hàng:Bc5980

Thông số kỹ thuật:50T/48S

Thành phần sản phẩm: Vui lòng kiểm tra cẩn thận khối lượng thuốc thử và khối lượng trong chai trước khi sử dụng, nếu có thắc mắc, vui lòng liên hệ với nhân viên Solebao kịp thời.

Công thức của giải pháp:

1. Thuốc thử I: Lấy 1 thuốc thử trước khi sử dụng I, thêm vào1,8 mLNước cất, hòa tan hoàn toàn, không sử dụng hết thuốc thử-20℃Có thể được lưu sau khi phân phối4Chu, tránh đông lạnh và tan chảy lặp đi lặp lại (thuốc thử là thuốc thử đông khô, có thể có sự khác biệt lớn hoặc thậm chí rất ít trong số lượng thuốc thử quan sát bằng mắt thường giữa các chai khác nhau, hiện tượng này không ảnh hưởng đến việc sử dụng, chất lượng thực tế là như nhau).

2. Thuốc thử IV: trước khi sử dụng thêm thuốc thử 17mL II, hòa tan đầy đủ, thuốc thử không hết-20℃Có thể lưu lại4Chu, tránh đông lạnh nhiều lần.

3. Thuốc thử V: dung dịch 10 mmol/L livantigmine. Trước khi sử dụng, lấy 15 μL 10 mmol/L dung dịch levantigmine, thêm 985μLNước cất, được xây dựng để0.15Dung dịch mmol/L livanestigmine, hiện đang được sử dụng (thuốc thử này được sử dụng trong các thí nghiệm ống dương tính, tùy chọn).

Mô tả sản phẩm:

Thành phần butyrylcholinesteraseBchE，EC3.1.1.8), còn được gọi là cholestyrase huyết tương, pseudocholestyrase, là một enzyme thủy phân axit tơ tằm đi vào máu sau khi được tổng hợp bởi gan và được tìm thấy trong hầu hết các mô động vật. thuốc nhét hậu môn suppositoires (Chết) So sánh,BchENó có thể thủy phân hiệu quả các este mật lớn hơn, chẳng hạn như butylbili và benzoylbili *, và nó cũng có thể loại bỏ tác dụng độc hại của các chất độc thần kinh như thuốc trừ sâu organophosphate và thuốc trừ sâu carbamate. Có nghiên cứu cho thấy,BchECó thể được sử dụng như một mục tiêu quan trọng trong điều trị bệnh Alzheimer,BchECác chất ức chế được sử dụng để cải thiện các triệu chứng như suy giảm trí nhớ và rối loạn chức năng nhận thức ở những người mắc bệnh Alzheimer.

BchE xúc tác butyryl mật * thủy phân để tạo mật *, mật * hoạt động với axit dishionitrobenzoic (DTNB) để tạo mật5-Name-Hạt chia organic (TNB），BchEThuốc ức chế bằng cách ức chếBchEHoạt động, giảm thủy phân butyryl mật *.TNBở412nmỞ đó có đỉnh hấp thụ, có thể xác định được.412nmThay đổi độ hấp thụ tại chỗ, tính toán hoạt động ức chế BchE.

Lưu ý: Trước khi thí nghiệm đề nghị chọn 2 - 3 mẫu có sự khác biệt lớn để làm tiền thí nghiệm.

Dụng cụ và đồ dùng cần tự chuẩn bị:

Máy quang phổ có thể nhìn thấy, cân bằng, lò nướng, máy nghiền/cối/Máy cân đối,30-50Màn hình mắt, máy làm sạch siêu âm, máy ly tâm, nồi tắm nước/Hộp nuôi dưỡng nhiệt độ ổn định,1 mLĐĩa so màu thủy tinh, súng pipet có thể điều chỉnh, nước đá và nước cất.

Các bước thao tác: các bước thao tác cụ thể xin vui lòng xem tệp "Thông tin sản phẩm

Lưu ý:

1. Để đảm bảo độ chính xác và ổn định của kết quả thí nghiệm, vui lòng kiểm soát chặt chẽ thời gian phản ứng và thời gian hoạt động.

2. Độ hấp thụ mẫu A '_{Xác định}Lớn hơn 1,5 hoặcΔA_{Xác định}Tiếp cậnΔA_{Khoảng trắng}Khi xử lý mẫu, đề nghị tăng tỷ lệ mẫu mô hoặc pha chế mẫu bột thành dung dịch nồng độ cao hơn để xác định lại. KhiΔA_{Xác định}Khi nhỏ hơn 0,01, mẫu có thể được pha loãng với chiết xuất trước khi xác định.

3. Nếu được sử dụng để so sánh mức độ ức chế BchE của các thuốc thử, chiết xuất, thuốc hoặc mô khác nhau, thuốc thử, chiết xuất, thuốc hoặc mô san lấp mặt bằng phải được xây dựng thành cùng một nồng độ để so sánh.

Ví dụ thực nghiệm:

1. Lấy mẫu vỏ bưởi 0,1005g (sấy khô) và thêm vào1 mLKhai thác chất lỏng để khai thác siêu âm, sau khi ly tâm được làm sạch, hoạt động theo các bước xác định, với1 mLTính toán so màu thủy tinh:ΔA_{Khoảng trắng}=（A’_{Trống 1}- A_{Trống 1}）-（A’_{Trống 2}- A_{Trống 2}）=（1.372-0.205）-（0.166-0.112）=1.113，ΔA_{Xác định}=（A’_{Xác định}- A_{Xác định}）-（A’_{Trống 2}- A_{Trống 2}）=（1.117-0.485）-（0.166-0.112）=0.578Tính toán tỷ lệ ức chế:

B5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)%）=（1.113-0.578）÷1.113×100%=48.068%。

2. Lấy 0,1014g mẫu vỏ hồng (sấy khô) và thêm vào1 mLKhai thác để khai thác siêu âm, lấy sạch sau khi ly tâm, pha loãng16Sau đó làm theo bước xác định, dùng1 mLTính toán so màu thủy tinh:ΔA_{Khoảng trắng}=（A’_{Trống 1}- A_{Trống 1}）-（A’_{Trống 2}- A_{Trống 2}）=（1.372-0.205）-（0.166-0.112）=1.113，ΔA_{Xác định}=（A’_{Xác định}- A_{Xác định}）-（A’_{Trống 2}- A_{Trống 2}）=（0.706-0.149）-（0.166-0.112）=0.503Tính toán tỷ lệ ức chế:

B5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)%）=（1.113-0.503）÷1.113×100%=54.807%。

3. Lấy 50 μL 0,15 mmol/L dung dịch levantine, làm theo các bước xác định, với1 mLTính toán so màu thủy tinh:ΔA_{Khoảng trắng}=（A’_{Trống 1}- A_{Trống 1}）-（A’_{Trống 2}- A_{Trống 2}）=（1.372-0.205）-（0.166-0.112）=1.113，ΔA_{Xác định}=（A’_{Xác định}- A_{Xác định}）-（A’_{Trống 2}- A_{Trống 2}）=（0.838-0.171）-（0.166-0.112）=0.613Tính toán tỷ lệ ức chế:

B5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)%）=（1.113-0.613）÷1.113×100%=44.924%。

Tài liệu tham khảo:

[1] Ellman GL, Courtney KD, Andres V Jr. et al. Một xác định màu sắc mới và nhanh chóng của hoạt động acetylcholinesterase [J]. Dược học sinh hóa, 1961, 7(2): 88-95.

[2] Noor Atatreh, Sara Al Rawashdah, Shaikha S Al Neyadi. Khám phá các chất ức chế butyrylcholinesterase mới thông qua sàng lọc ảo dựa trên cấu trúc [J]. Tạp chí ức chế enzyme và hóa học dược phẩm, 2019, 34(1): 1373-1379.

[3] Li Q, Chen Y, Xing S. et al. Thuốc ức chế Butyrylcholinesterase mạnh mẽ và chọn lọc cho cải thiện nhận thức và bảo vệ thần kinh [J]. Tạp chí Hóa học Y học, 2021, 64(10): 6856-6876.

Dòng sản phẩm liên quan:

B5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)CarE) Bộ kiểm tra hoạt động

BC2020/BC2025 Bộ xét nghiệm hoạt tính Acetyl Cholesterase (AchE)

B5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)ACP) Bộ kiểm tra hoạt động

B5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)Đảng AKP/ALP) Bộ kiểm tra hoạt động

Bộ xét nghiệm hoạt tính BC5970/BC5975 Butylcholesty * esterase (BchE)

Bộ dụng cụ kiểm tra hoạt động của chất ức chế butylcholesty * esterase