Bộ chiết xuất nhanh DNA/RNA của bộ gen virus

Có thể đàm phánCập nhật vào05/06

Mô hình

Thiên nhiên của nhà sản xuất: Nhà sản xuất

Danh mục sản phẩm

Nơi xuất xứ

Tư vấn trực tuyến

Tổng quan

Bộ dụng cụ chiết xuất nhanh DNA/RNA Bộ gen virus Công ty đang bán: Lợn (Lai Vu) Tế bào gốc mỡ bụng (Vĩnh sinh) Nhiễm sắc thể 20 Mở khung đọc 165 Đóng cửa Adenovirus Polypeptide Bộ xét nghiệm PCR phổ quát Chuột Calcitonin (CT) ELISA Kit 3 Phosphate Glycerol kinase (PGK) Bộ xét nghiệm đo màu hoạt động enzyme

Chi tiết sản phẩm

Thuộc tính hàng hóa:

Tên sản phẩm	quy cách	Mã hàng
Bộ gen virusBộ chiết xuất nhanh DNA/RNA	50 lần	A-Hc2009

PCRCác bước cơ bản và lưu ý?

I. Nguyên tắc thí nghiệm

PCRMở rộng chọn lọc nhân tạo in vitroDNAMột phương pháp tương tự như trong một sinh vậtDNASao chép. Trong các sinh vậtDNASao chép cần khuôn mẫu, dẫn vật,DNAenzym tổng hợp,DNAEnzyme giải độc,dNTP; ngoài cơ thểPCRPhản ứng cũng cần thành phần tương tự, có khuôn mẫu, dẫn vật,Bộ đệm PCR、TaqEnzyme,dNTP. Trong đó mồi là một trình tự cụ thể được thiết kế thủ công để đạt được sự khuếch đại của một vị trí cụ thể;Bộ đệm PCRCung cấp một môi trường đệm cho các phản ứng; Quá trình phản ứng cũng giống như trong sinh vật,DNAChuỗi đôi mở ra, mồi kết hợp với mẫu, mở rộng để tạo thành chuỗi mới. Các quá trình này phụ thuộc vào các sinh vậtDNACác chuỗi giải mã được thực hiện bên ngoài cơ thể bằng cách kiểm soát nhiệt độ phản ứng. Như thường dùng94℃Chuyển đổi giới tínhStencilsDNAMở chuỗi đôi, mồi kết hợp với mẫu ở nhiệt độ ủ, và cuối cùng trong72℃Hoàn thành phần mở rộng và lặp đi lặp lại quá trình này để đạt được một phân đoạn cụ thểDNALượng lớn khuếch đại. Đến khi chu kỳ thứ ba bắt đầu, mục tiêu mới được tạo ra.DNACác phần giống nhauDNAphân tử, tái chế hơn nữa để tạo ra mục tiêuDNAChỉ số khu vực tăng gấp đôi.

Sau khi mở rộng,Do tích lũy sản phẩm,Làm cho phản ứng ban đầu khuếch đại theo cấp số nhân trở thành một đường cong phẳng,Sản phẩm không còn tăng rõ rệt với số chu kỳ,Đây được gọi là hiệu ứng platform. Giai đoạn nền tảng(Cao nguyên)Nó sẽ làm cho nồng độ thấp không đặc hiệu sản phẩm ban đầu do phối hợp sai tiếp tục khuếch đại với số lượng lớn, đạt tới mức cao hơn. Do đó, số lượng chu kỳ nên được điều chỉnh thích hợp để kết thúc phản ứng trước thời kỳ nền tảng và giảm các sản phẩm không đặc hiệu. Thời gian đến Platform(Cao nguyên)Số chu kỳ cần thiết phụ thuộc vào bản sao của mẫu trong mẫu.

II. Thành phần chính

1.Mẫu có thể ở nhiều dạng, chủ yếu bao gồm bộ genDNA, hạt nhựaDNABộ gen mang virusDNA、PCRsản phẩm,cDNAĐợi, nhưng không thể vì......Sản phẩm RNA. Đối với các loại mẫu khác nhau, sự khác biệt chính là thời gian tiền biến tính và số lượng mẫu. thường đối với các gen lớn.DNAThời gian thay đổi trước10 phútĐủ rồi, plasmid.DNA2minBộ gen mang virusDNATiền biến tính2 phút、PCRSản phẩm Pre-biến tính2 phútĐược rồi.

Chú ýcDNAĐối với chuỗi đơnDNANhưng vẫn có thể làm được.PCRKhuôn mẫu, chẳng qua ở vòng tuần hoàn thứ nhất chỉ có một cái dẫn vật kết hợp, hợp thành một cái chuỗi khác. Bắt đầu từ vòng thứ hai, cả hai mồi đều được kết hợp với một vị trí cụ thể, do đó đạt được sự kết hợp với một quy ướcPCRNối đường ray. Với tư cách là một chuỗiSản phẩm RNANhưng không thể tiến hành.PCRTăng trưởng, nguyên nhân là do thực hiện.PCRPhản ứng làDNAPolymerase chỉ có thể được xác định đặc biệtDNAXích.

2.Đối với số lượng mẫu, thông thường25uLHệ thốngDNAChất lượng là50100ngĐối với genomeDNADo cấu trúc phức tạp hơn, nồng độ chiết xuất cũng thường lớn hơn, để ngăn chặn nồng độ quá lớnPCRẢnh hưởng đến việc khai thácDNAPha loãng gradient. Nếu không nồng độ quá cao có thể gây ra sự khuếch đại không đặc hiệu. Đối với các hạt vàPCRSản phẩm không cần pha loãng vì cấu trúc đơn giản của nó và nồng độ chiết xuất nói chung thấp.

PCRNhững vấn đề cần lưu ý trong thí nghiệm?

không cóCTgiá trị

Đã có kết quả kiểm tra chưa?CtTrường hợp giá trị,Kiểm tra xem có vấn đề gì sau đây không:

1Số tuần hoàn không đủ(thường không vượt quá45vòng lặp,Không chỉ cải thiện background,Định lượng cũng không.);

2、PCRLỗi thiết lập chương trình,Các bước phát hiện tín hiệu huỳnh quang là sai. thông thườngSGLuật áp dụng72℃Thu thập khi mở rộng,TaqManLuật thường thu thập tín hiệu vào cuối ủ hoặc khi mở rộng,Thu thập huỳnh quang khác có được chọn không?;

3Dẫn vật hoặc thăm dò thoái hóa. Có sẵnTrangĐiện di phát hiện nếu mồi và đầu dò bị suy thoái;

4Số lượng mẫu có thể bị suy giảm hoặc không đủ mẫu trên(Không nhiều hơn500ng,Theo hướng dẫn của bộ dụng cụ là ok),Các mẫu có nồng độ không xác định nên bắt đầu từ nồng độ cao nhất trong loạt mẫu pha loãng.;Nếu sự suy thoái mẫu xảy ra,Cần xem xét sự ra đời của tạp chất trong quá trình chuẩn bị mẫu và tình trạng đóng băng lặp đi lặp lại,Đề nghị lưu trữ mẫu mẫu với số lượng nhỏ,Tránh đóng băng nhiều lần;

5Đầu dò dẫn vật có thích hợp không?(Đặc biệt là các chất kích thích bên trong.,Để đảm bảo bộ gen được mở rộngDNA;Lên và xuống mồiTmGiá trị hơn4℃Điều này cũng ảnh hưởng đến việc mở rộng)。

CTGiá trị quá muộn

Trong định lượng tương đốiCtGiá trị thường được kiểm soát trong1525Tốt hơn là ở giữa.,Nếu trong định lượng tuyệt đối,Mẫu cho số lượng bản sao thấpCtGiá trị sẽ tăng lên.,Thông thường không nên vượt quá40vòng lặp,Nếu không định lượng không chính xác.

Do đó,Đánh giáCtGiá trị xuất hiện quá muộn là không bình thường.,Nó cần được thực hiện theo thiết kế và mục đích thí nghiệm cụ thể.

1Hiệu suất mở rộng thấp. Tỷ lệ giữa mồi và đầu dò không phù hợp.,Cần tối ưu hóa;Thiết kế mồi hoặc đầu dò không hợp lý,Cần thiết kế lại;

2、PCRChương trình không phù hợp,Sử dụng phương pháp 3 bước để phản ứng,Hoặc tối ưu hóa ủ/Nhiệt độ mở rộng,Có thể làm giảm nhiệt độ ủ thích hợp;ủ/Thời gian mở rộng ngắn(Có thể được kéo dài trong điều kiện thời gian khuyến nghị10s);

3、MgCl2Nồng độ không phù hợp,Tăng nồng độ ion magiê, v. v.PCRSuy thoái hoặc không đủ số lượng mẫu của các thành phần phản ứng khác nhau;

4、PCRsản phẩm quá dài.PCRThiết kế sản phẩm vượt quá500bp;

5Trong khuôn mẫu tồn tại vật ức chế. Được thực hiện với mẫu có độ tinh khiết caoPCRPhát hiện hoặc pha loãng mẫu.

Sản phẩm công ty đang bán:

Phương pháp nhuộm Staphylococcus Pig Định lượng huỳnh quangBộ dụng cụ PCR	Giống như dihydropyrimidaseBộ dụng cụ 3ELISA DPYSL3 Đại lý kiểm tra thế hệ miễn phí	Cúm Cong Cớn silicon hết date (Bộ dụng cụ RT-PCR định lượng huỳnh quang cho phương pháp nhuộm phân loại H6
Phương pháp nhuộm da bí đaoBộ nhận dạng PCR	Globulin miễn dịch màng bề mặtDELISA Kit mIgD thế hệ thử nghiệm miễn phí	Virus viêm gan DBộ kiểm tra PCR Bán trực tiếp
Virus đậu mùa dêBộ xét nghiệm PCR	Thành phần bổ sung1q Thành phần phụ Giống protein 1ELISA Kit	Clostridium khó phân biệtBộ xét nghiệm PCR
Varicella zoster virus là loại virus herpes ở ngườiBộ xét nghiệm PCR	Protein liên kết/Bộ dụng cụ ELISA kết dính in vitro	Phương pháp nhuộm phổ quát Nesseria Định lượng huỳnh quangBộ dụng cụ PCR
Phương pháp nhuộm phổ quát Leishmania Định lượng huỳnh quangBộ dụng cụ PCR	Protein liên quan đến ống siêu phosphorylBộ dụng cụ tauELISA	Định lượng huỳnh quang Phương pháp thăm dò Burkinella OnionBộ dụng cụ PCR
Virus tuyến chóLoại 2 (Virus viêm thanh quản truyền nhiễm ở chó) Bộ dụng cụ PCR định lượng huỳnh quang bằng phương pháp thăm dò	Acrytransferase của HedgehogBộ dụng cụ ELISA	định lượng acid nucleic của virus viêm gan B vàBộ xét nghiệm PCR kết hợp biến thể YMDD
Rao không tảo xanhBộ xét nghiệm PCR	Virus herpes simplexBộ dụng cụ ELISA kháng thể loại I	Phương pháp nhuộm viêm phổi màng phổi truyền nhiễm gia súc Định lượng huỳnh quangBộ dụng cụ PCR
Ký sinh trùng LeishmaniaBộ xét nghiệm PCR	lòng trắng trứngBộ dụng cụ ATP1B4ELISA	Virus bệnh MarekCung cấp bộ kiểm tra PCR
Định lượng huỳnh quang Phương pháp thăm dò phổ quát cho virus herpes cá chépBộ dụng cụ PCR	thụ thể protein tyrosphosphataseBộ dụng cụ NELISA	E. coli gây bệnh đường tiết niệu(UPEC) Bộ dụng cụ PCR định lượng huỳnh quang Phương pháp thăm dò
Virus cúm chóBộ dụng cụ PCR định lượng huỳnh quang Loại 32 Phương pháp thăm dò	protein hoạt hóa kinetinBộ dụng cụ 1ELISA	Nam Cực răng nanh cá nguồn thành phần tình dục Phương pháp thăm dò Định lượng huỳnh quangBộ dụng cụ PCR
Name Bộ xét nghiệm axit nucleic loại A16	Yếu tố nhân của con ngườiBộ dụng cụ ức chế κB Kinase β (IKK-β) ELISA	Phương pháp thăm dò Mycobacterium bovis Định lượng huỳnh quangBộ dụng cụ PCR
VirusBộ xét nghiệm PCR phân loại H5/H9 (Phương pháp PCR huỳnh quang)	Ma trận con người Metal ProteaseBộ dụng cụ Elisa 7 (MMP-7)	Adenovirus gia cầmBộ dụng cụ PCR định lượng huỳnh quang Phương pháp thăm dò loại B
virus herpes cá chépBộ dụng cụ PCR định lượng huỳnh quang Loại 3 Phương pháp thăm dò	Loại phospholipase phụ thuộc canxi của con ngườiBộ xét nghiệm ELISA A2 (iPLA2)	Homoplastic para polvirus trên tômBộ xét nghiệm PCR
Vi khuẩn Klebsiella aerogenesisBộ xét nghiệm PCR	ngườiBộ chọn L (L-Selectin/CD62L) ELISA	Bộ gen virusBộ chiết xuất nhanh DNA/RNAĐịnh lượng huỳnh quang bằng phương pháp thăm dò Candida mịnBộ dụng cụ PCR
Virus u nhầy ở thỏBộ xét nghiệm PCR	Môi trường trắng của con người31 (IL-31) Bộ xét nghiệm elisa	BCG vi khuẩn nhánh bòBộ xét nghiệm PCR

Sản phẩm tương tự Khuyến nghị