- Thông tin E-mail
- Điện thoại
-
Địa chỉ
Phòng 703, Tòa nhà 2, Tòa nhà Xindong, Ngõ 388 Xinfu, Quận Minhang, Thượng Hải
Công ty TNHH công nghiệp Fusheng Thượng Hải
Phòng 703, Tòa nhà 2, Tòa nhà Xindong, Ngõ 388 Xinfu, Quận Minhang, Thượng Hải
Thuộc tính hàng hóa:
Tên sản phẩm |
quy cách |
Mã hàng |
RNAfixer Nitơ lỏng miễn phí RNA mẫu lưu trữ |
100ml |
A-Hc2011 |
Điều kiện bảo quản:
Nhiệt độ phòng (18-25 ℃) được bảo quản hơn 1 năm, nếu sử dụng kết tủa hoặc kết tủa, có thể tắm nước 37 ℃.Sử dụng sau khi tái hòa tan nhiệt, không ảnh hưởng đến chất lượng sản phẩm sau khi tái hòa tan.
Giới thiệu sản phẩm:
RNAfixer là một chất lỏng bảo quản mô không độc hại có thể nhanh chóng xâm nhập vào tế bào của các tế bào mô tươi.Ở trạng thái không đóng băng, RNA trong tế bào được ổn định và bảo vệ tại chỗ. Việc nhúng các mảnh mô vào RNAfixer ngay lập tức không ảnh hưởng đến chất lượng và số lượng RNA được chiết xuất trong tương lai. RNAfixer loại bỏ các mẫu RNA cần được xử lý ngay lập tứcHoặc phải bảo quản nitơ lỏng không tiện. Sau khi nhúng RNAfixer, RNA trong các tế bào mô tươi có thể tồn tại hoàn hảo.Bảo quản một ngày ở 37 ℃, một tuần ở 25 ℃, một tháng ở 4 ℃, bảo quản lâu dài ở -20 ℃ hoặc -80 ℃.
Các mẫu virus RNA, chẳng hạn như HCV và HIV, có thể được bảo quản ở 37 ° C trong một tháng.Thích hợp cho mô động vật (tim, gan, thận, cơ bắp, tinh hoàn, não, lá lách, v.v.), tế bào nuôi cấy, virus RNA, trái câyRuồi, vi khuẩn, bạch cầu, một số mô thực vật, v.v.
Tính năng sản phẩm:
Hoạt động dễ dàng: tổ chức thành kích thước thích hợp, ngâm trong RNAfixer để RNA của nó không bị suy thoái.
2. Không cần nitơ lỏng: làm cho việc bảo quản mẫu không cần nitơ lỏng, đá khô hoặc tủ lạnh -80 ℃, đặc biệt thích hợp cho các mẫu lâm sàng và thực địaThu thập nhanh chóng và quy mô lớn.
3. Vận chuyển thuận tiện: Các mẫu được xử lý có thể được giữ ở 25 ℃ trong một tuần, làm cho việc gửi mẫu và vận chuyển trở nên dễ dàng và không tốn kém, thuận lợiHợp tác và trao đổi học thuật.
4. đông và tan chảy nhiều lần: các mẫu được xử lý RNAfixer có thể đông và tan chảy nhiều lần, trong đó các mẫu có thể được xử lý khác nhaumà không ảnh hưởng đến chất lượng của RNA cuối cùng được chiết xuất.
Khả năng so sánh: RNAfixer có thể làm giảm sai số trong xử lý mẫu quy mô lớn, tăng khả năng so sánh giữa các thí nghiệm và đặc biệt hữu ích trong việc phân tích phổ biểu hiện gen quy mô lớn.
Hướng dẫn sử dụng:
RNAfixer chỉ được sử dụng cho các mô tươi và không được đóng băng các mô trước khi ngâm vào RNAfixer. Chỉ cần nhanh chóng làm mớiMô tươi phát triển, rộng, cao bất kỳ bên nào có độ dày<0,5 cm được ngâm trong RNAfixer.Độ sâu không quá 0,5 cm, RNAfixer có thể thâm nhập nhanh chóng, kích thước của hai bên không quan trọng). Sẽ tươi nhómVải được ngâm trong 5 lần thể tích RNAfixer và được lưu trữ ở nhiệt độ thích hợp theo chỉ dẫn.
RNAfixer mô động vật không phá hủy hoặc hòa tan cấu trúc mô, do đó, nó được ngâm trong RNAfixer để thâm nhập.Các mô cân bằng có thể được lấy ra khỏi RNAfixer, sau đó cắt thành các miếng nhỏ hơn và đưa trở lại RNAfixer.Tiếp tục sử dụng lần sau. Các cơ quan nhỏ như gan chuột, thận và lá lách không cần cắt và có thể được lưu trữ hoàn toàn trong RNAfixer.
Khuyến cáo sử dụng RNAstore cho các mẫu mô khác nhau:
Nhiều mô thực vật được ngâm trực tiếp vào RNAfixer, một số có hàng rào thẩm thấu tự nhiên như hạt muối.Lớp bảo vệ, trước tiên cần phá hủy lớp sáp, tạo điều kiện cho RNAfixer xâm nhập.
3. Sau khi thổi các tế bào tế bào nuôi cấy mô, ly tâm thu thập các tế bào, loại bỏ và rửa chúng một lần bằng bộ đệm PBS của bồn tắm nước đáLoại bỏ nền văn hóa còn sót lại. Các tế bào được treo trong một lượng nhỏ bộ đệm PBS. Thêm 5 đến 10 lần kích thước RNAfixerTất cả.
4. Bạch cầu để bảo quản các tế bào máu trắng trong toàn bộ máu, cần phải tách bạch cầu từ các tế bào máu đỏ và huyết thanh và theo nhómSau khi được xử lý như các tế bào nuôi cấy, các tế bào bạch cầu có thể được bảo tồn hiệu quả trong RNAfixer. Đừng đổ toàn bộ máu, huyết tươnghoặc RNA trong huyết thanh được giữ trong RNAfixer vì chúng có hàm lượng protein quá cao, sau khi trộn với RNAfixerDễ hình thành sự lắng đọng không tan.
5. Vi khuẩn
Vi khuẩn không thể phát triển trong RNAfixer, nhưng RNAfixer không tiêu diệt vi khuẩn, E. coli được bảo quản ở nhiệt độ 4 ℃.Một RNA đầy đủ vẫn có thể được đề xuất trong một tháng.
Lưu trữ mẫu trong RNAfixer:
1. Lưu trữ ở -80 ℃Mẫu được bảo quản lâu dài. Đặt mẫu RNA fixer ở 4oC qua đêm, sau đó vớt mẫu ra.Chất lỏng RNAfixer sạch được loại bỏ và đặt ở -80 ° C. Đối với các tế bào nuôi cấy mô, không cần phải loại bỏRNAfixer, Đông lạnh trực tiếp ở -80 ° C và không phá vỡ các tế bào. Mẫu có thể tan chảy ở nhiệt độ phòng khi sử dụng vàNó cũng có thể được đông lạnh một lần nữa mà không ảnh hưởng đến tính toàn vẹn và sản xuất RNA.
2. Lưu trữ ở -20 ℃Các mẫu RNAfixer được đặt ở 4 độ C qua đêm và sau đó được chuyển đến -20 độ C. Ở -20 ℃ mẫu không bị đóng băngĐóng băng, nhưng một số tinh thể có thể hình thành, điều này không ảnh hưởng đến việc chiết xuất RNA trong tương lai. Mẫu có thể được sử dụng trong phòngNhiệt độ tan chảy và cũng có thể được đông lạnh một lần nữa mà không ảnh hưởng đến tính toàn vẹn và sản xuất RNA.
3. Lưu trữ ở 4 ℃Mẫu có thể được lưu trữ ở 4 ℃ trong một tháng.
4. Lưu trữ ở 25oCRNA được lưu trữ trong mẫu 25 ℃ vẫn còn nguyên vẹn trong một tuần và RNA của mẫu được lưu trữ trong hai tuần bị suy thoái nhẹ.Hầu như không thể được sử dụng cho phân tích phương bắc, nhưng chất lượng đủ để sử dụng cho nhiệm vụ bảo vệ hạt nhân hoặc RT-PCR.
5. Lưu trữ ở 37 ℃RNA được lưu trữ trong mẫu 37 ℃ vẫn còn nguyên vẹn trong 24 giờ và phân hủy một phần trong 3 ngày.Trích xuất RNA từ các mẫu RNAfixer:Lấy mẫu ra khỏi RNAfixer, có thể được đổ trực tiếp vào hồ bơi và xả bằng nước máy mà không cầnĐiều trị đặc biệt.
1. Tổ chức
Lấy mẫu từ RNAfixer bằng nhíp sạch, sau khi hút một chút RNAfixer còn lại bằng giấy thấm,RNA có thể được chiết xuất theo quy trình tiêu chuẩn của quá trình xử lý cân bằng bằng nitơ lỏng, giống như mô tươi.
2. tế bào
Có hai lựa chọn cho các tế bào được lưu trữ trong RNAfixer. Loại bỏ RNA sau khi loại bỏ RNAfixerMột là chiết xuất trực tiếp từ hỗn hợp tế bào và RNAfixer.
1) Chiết xuất RNA sau khi loại bỏ RNAfixerCác tế bào được lưu trữ trong RNAfixer trở nên ít mong manh hơn và có thể chịu được tốc độ ly tâm cao hơn mà không bị nứt.Giải. Chúng tôi có kinh nghiệm thu thập thành công các tế bào trong 5000g ly tâm, vì sức mạnh của mỗi tế bào là khác nhau, có thểThử nghiệm trước với các tế bào không quan trọng để đảm bảo rằng ly tâm không phá hủy các tế bào với tốc độ sử dụng. Lựa chọn khácChọn PBS pha loãng hỗn hợp RNAfixer và tế bào trước khi ly tâm để giảm mật độ của dung dịch.Để dung dịch tế bào có thể lắng xuống.
2) Không loại bỏ RNAfixer, chiết xuất RNA trực tiếp
Nó cũng có thể được trực tiếp thêm 10x khối lượng một bước để chiết xuất thuốc thử (như TRIpure, TRI Reagent) vào tế bào vàMột hỗn hợp RNAfixer, sau đó làm theo các bước bình thường.

PCRCác bước cơ bản và lưu ý?
I. Nguyên tắc thí nghiệm
PCRMở rộng chọn lọc nhân tạo in vitroDNAMột phương pháp tương tự như trong một sinh vậtDNASao chép. Trong các sinh vậtDNASao chép cần khuôn mẫu, dẫn vật,DNAenzym tổng hợp,DNAEnzyme giải độc,dNTP; ngoài cơ thểPCRPhản ứng cũng cần thành phần tương tự, có khuôn mẫu, dẫn vật,Bộ đệm PCR、TaqEnzyme,dNTP. Trong đó mồi là một trình tự cụ thể được thiết kế thủ công để đạt được sự khuếch đại của một vị trí cụ thể;Bộ đệm PCRCung cấp một môi trường đệm cho các phản ứng; Quá trình phản ứng cũng giống như trong sinh vật,DNAChuỗi đôi mở ra, mồi kết hợp với mẫu, mở rộng để tạo thành chuỗi mới. Các quá trình này phụ thuộc vào các sinh vậtDNACác chuỗi giải mã được thực hiện bên ngoài cơ thể bằng cách kiểm soát nhiệt độ phản ứng. Như thường dùng94℃Chuyển đổi giới tínhStencilsDNAMở chuỗi đôi, mồi kết hợp với mẫu ở nhiệt độ ủ, và cuối cùng trong72℃Hoàn thành phần mở rộng và lặp đi lặp lại quá trình này để đạt được một phân đoạn cụ thểDNALượng lớn khuếch đại. Đến khi chu kỳ thứ ba bắt đầu, mục tiêu mới được tạo ra.DNACác phần giống nhauDNAphân tử, tái chế hơn nữa để tạo ra mục tiêuDNAChỉ số khu vực tăng gấp đôi.
Sau khi mở rộng,Do tích lũy sản phẩm,Làm cho phản ứng ban đầu khuếch đại theo cấp số nhân trở thành một đường cong phẳng,Sản phẩm không còn tăng rõ rệt với số chu kỳ,Đây được gọi là hiệu ứng platform. Giai đoạn nền tảng(Cao nguyên)Nó sẽ làm cho nồng độ thấp không đặc hiệu sản phẩm ban đầu do phối hợp sai tiếp tục khuếch đại với số lượng lớn, đạt tới mức cao hơn. Do đó, số lượng chu kỳ nên được điều chỉnh thích hợp để kết thúc phản ứng trước thời kỳ nền tảng và giảm các sản phẩm không đặc hiệu. Thời gian đến Platform(Cao nguyên)Số chu kỳ cần thiết phụ thuộc vào bản sao của mẫu trong mẫu.


II. Thành phần chính
1.Mẫu có thể ở nhiều dạng, chủ yếu bao gồm bộ genDNA, hạt nhựaDNABộ gen mang virusDNA、PCRsản phẩm,cDNAĐợi, nhưng không thể vì......Sản phẩm RNA. Đối với các loại mẫu khác nhau, sự khác biệt chính là thời gian tiền biến tính và số lượng mẫu. thường đối với các gen lớn.DNAThời gian thay đổi trước10 phútĐủ rồi, plasmid.DNA2minBộ gen mang virusDNATiền biến tính2 phút、PCRSản phẩm Pre-biến tính2 phútĐược rồi.
Chú ýcDNAĐối với chuỗi đơnDNANhưng vẫn có thể làm được.PCRKhuôn mẫu, chẳng qua ở vòng tuần hoàn thứ nhất chỉ có một cái dẫn vật kết hợp, hợp thành một cái chuỗi khác. Bắt đầu từ vòng thứ hai, cả hai mồi đều được kết hợp với một vị trí cụ thể, do đó đạt được sự kết hợp với một quy ướcPCRNối đường ray. Với tư cách là một chuỗiSản phẩm RNANhưng không thể tiến hành.PCRTăng trưởng, nguyên nhân là do thực hiện.PCRPhản ứng làDNAPolymerase chỉ có thể được xác định đặc biệtDNAXích.
2.Đối với số lượng mẫu, thông thường25uLHệ thốngDNAChất lượng là50100ngĐối với genomeDNADo cấu trúc phức tạp hơn, nồng độ chiết xuất cũng thường lớn hơn, để ngăn chặn nồng độ quá lớnPCRẢnh hưởng đến việc khai thácDNAPha loãng gradient. Nếu không nồng độ quá cao có thể gây ra sự khuếch đại không đặc hiệu. Đối với các hạt vàPCRSản phẩm không cần pha loãng vì cấu trúc đơn giản của nó và nồng độ chiết xuất nói chung thấp.
Sản phẩm công ty đang bán:
Phương pháp nhuộm màu Staphylococcus Định lượng huỳnh quangBộ dụng cụ PCR |
DihydroxylysexidineELISA Kit DHLNL Thuốc thử thế hệ miễn phí |
Cúm A (Bộ dụng cụ RT-PCR định lượng huỳnh quang cho phương pháp nhuộm phân loại H5 |
Phương pháp nhuộm địa duBộ nhận dạng PCR |
Keratin biểu bìELISA Kit EK Thuốc thử thế hệ miễn phí |
Virus herpes simplexBộ xét nghiệm PCR loại 1 Bán trực tiếp |
Vi khuẩn thương hànBộ xét nghiệm PCR |
Thành phần bổ sungBộ dụng cụ 1sELISA |
Nocca Nam PhiBộ xét nghiệm PCR |
NameBộ xét nghiệm PCR |
Bổ sung1 Kháng thể ức chế - Bộ dụng cụ IgGELISA |
Gnaeopsis generalis (bằng tiếng Anh).· Bộ dụng cụ PCR định lượng huỳnh quang bằng phương pháp nhuộm |
Phương pháp thăm dò ImplantBộ nhận dạng PCR |
Protein sốc nhiệt quá mẫnBộ dụng cụ 60ELISA |
Định lượng huỳnh quang bằng phương pháp thăm dò Burkholderia melioidosisBộ dụng cụ PCR |
Virus tuyến chóBộ dụng cụ PCR định lượng huỳnh quang loại 1 (virus viêm gan truyền nhiễm ở chó) |
Protein đám rốiBộ dụng cụ A2ELISA |
Kháng virus viêm gan BBộ xét nghiệm PCR |
Thành phần tình dục có nguồn gốc từ chóBộ xét nghiệm axit nucleic (Canine) |
Virus herpes simplexBộ dụng cụ kháng thể IgMELISA type II |
Định lượng huỳnh quang cho bệnh bò Ibaraki Phương pháp nhuộm virusBộ dụng cụ RT-PCR |
Phương pháp thăm dò phổ quát Leishmania Định lượng huỳnh quangBộ dụng cụ PCR |
lòng trắng trứngBộ dụng cụ ức chế C ELISA |
Virus bệnh MarekBộ xét nghiệm PCR loại 2 |
Thông dụng RickettsiaBộ dụng cụ PCR |
Protein tyrosphosphatase giống proteinBộ dụng cụ AELISA |
Microsporidium ong phổ quátBộ kiểm tra PCR Bán trực tiếp |
Phương pháp thăm dò Streptococcus canis Định lượng huỳnh quangBộ dụng cụ PCR |
protein hoạt hóa kinetinBộ dụng cụ 3ELISA |
Kháng khuẩn enterococcus vancomiBộ xét nghiệm PCR |
Virus Coxsackie Bộ xét nghiệm axit nucleic loại A2/Coxsackievirus A4 (Phương pháp PCR huỳnh quang kép) |
Yếu tố nhân của con ngườiκB (NF-κB) Bộ dụng cụ ELISA |
Định lượng huỳnh quang Phương pháp thăm dò hồng cầu cơ thể gia súcBộ dụng cụ PCR |
Virus gia cầmBộ xét nghiệm PCR phân loại H10N8 (Phương pháp PCR huỳnh quang) |
Ma trận con người Metal Protease2/Bộ xét nghiệm gelatinase A (MMP-2/GelatinaseA) elisa |
Adenovirus gia cầmBộ dụng cụ PCR định lượng huỳnh quang Phương pháp thăm dò loại C |
RNAfixer Nitơ lỏng miễn phí RNA mẫu lưu trữQuail Extraordinary tuyến trùng Probe Định lượng huỳnh quangBộ dụng cụ PCR |
Con người Calcium LinkedIn(calnexin) Bộ dụng cụ ELISA |
Penicillium flava thăm dò kim Định lượng huỳnh quangBộ dụng cụ PCR |
Klebsiella sản xuất axitBộ xét nghiệm PCR |
ngườiBộ dụng cụ MAX Dimer Protein 1 (mxd1) ELISA |
Định lượng huỳnh quang bằng phương pháp thăm dò Candida nhiệt đớiBộ dụng cụ PCR |
Gen nội sinh đậu Hà LanBộ xét nghiệm PCR |
Môi trường trắng của con ngườiBộ dụng cụ ELISA 33 (IL-33) |
Định lượng huỳnh quang Phương pháp thăm dò BCG Mycobacterium bovisBộ dụng cụ PCR |
PCRNhững vấn đề cần lưu ý trong thí nghiệm?
không cóCTgiá trị
Đã có kết quả kiểm tra chưa?CtTrường hợp giá trị,Kiểm tra xem có vấn đề gì sau đây không:
1Số tuần hoàn không đủ(thường không vượt quá45vòng lặp,Không chỉ cải thiện background,Định lượng cũng không.);
2、PCRLỗi thiết lập chương trình,Các bước phát hiện tín hiệu huỳnh quang là sai. thông thườngSGLuật áp dụng72℃Thu thập khi mở rộng,TaqManLuật thường thu thập tín hiệu vào cuối ủ hoặc khi mở rộng,Thu thập huỳnh quang khác có được chọn không?;
3Dẫn vật hoặc thăm dò thoái hóa. Có sẵnTrangĐiện di phát hiện nếu mồi và đầu dò bị suy thoái;
4Số lượng mẫu có thể bị suy giảm hoặc không đủ mẫu trên(Không nhiều hơn500ng,Theo hướng dẫn của bộ dụng cụ là ok),Các mẫu có nồng độ không xác định nên bắt đầu từ nồng độ cao nhất trong loạt mẫu pha loãng.;Nếu sự suy thoái mẫu xảy ra,Cần xem xét sự ra đời của tạp chất trong quá trình chuẩn bị mẫu và tình trạng đóng băng lặp đi lặp lại,Đề nghị lưu trữ mẫu mẫu với số lượng nhỏ,Tránh đóng băng nhiều lần;
5Đầu dò dẫn vật có thích hợp không?(Đặc biệt là các chất kích thích bên trong.,Để đảm bảo bộ gen được mở rộngDNA;Lên và xuống mồiTmGiá trị hơn4℃Điều này cũng ảnh hưởng đến việc mở rộng)。
CTGiá trị quá muộn
Trong định lượng tương đốiCtGiá trị thường được kiểm soát trong1525Tốt hơn là ở giữa.,Nếu trong định lượng tuyệt đối,Mẫu cho số lượng bản sao thấpCtGiá trị sẽ tăng lên.,Thông thường không nên vượt quá40vòng lặp,Nếu không định lượng không chính xác.
Do đó,Đánh giáCtGiá trị xuất hiện quá muộn là không bình thường.,Nó cần được thực hiện theo thiết kế và mục đích thí nghiệm cụ thể.
1Hiệu suất mở rộng thấp. Tỷ lệ giữa mồi và đầu dò không phù hợp.,Cần tối ưu hóa;Thiết kế mồi hoặc đầu dò không hợp lý,Cần thiết kế lại;
2、PCRChương trình không phù hợp,Sử dụng phương pháp 3 bước để phản ứng,Hoặc tối ưu hóa ủ/Nhiệt độ mở rộng,Có thể làm giảm nhiệt độ ủ thích hợp;ủ/Thời gian mở rộng ngắn(Có thể được kéo dài trong điều kiện thời gian khuyến nghị10s);
3、MgCl2Nồng độ không phù hợp,Tăng nồng độ ion magiê, v. v.PCRSuy thoái hoặc không đủ số lượng mẫu của các thành phần phản ứng khác nhau;
4、PCRsản phẩm quá dài.PCRThiết kế sản phẩm vượt quá500bp;
5Trong khuôn mẫu tồn tại vật ức chế. Được thực hiện với mẫu có độ tinh khiết caoPCRPhát hiện hoặc pha loãng mẫu.