Dịch vụ thí nghiệm điện di hai chiều protein

Một,Dịch vụ thí nghiệm điện di hai chiều proteinGiới thiệu về công nghệ thử nghiệm

2D-WB là một công nghệ kết hợp giữa điện di hai chiều và blot phương Tây truyền thống. Quy trình thí nghiệm chung là hỗn hợp protein kháng nguyên trước tiên được tách ra bằng điện di hai chiều, sau đó truyền protein gel lên màng hỗ trợ, sau đó kết màu bằng cách lai kháng thể. Công nghệ 2D-WB có thể phát hiện những thay đổi nhỏ trong các điểm điện như kháng nguyên hoặc trọng lượng phân tử và được sử dụng tốt trong nghiên cứu sửa đổi sau khi dịch protein; Và 2D-WB kết hợp với công nghệ xác định phổ khối lượng, có thể tìm thấy kháng nguyên miễn dịch mạnh hơn từ hỗn hợp protein.

Hai,Dịch vụ thí nghiệm điện di hai chiều proteinTổng quan

2D-WB là một công nghệ kết hợp giữa điện di hai chiều và blot phương Tây truyền thống. Quy trình thí nghiệm chung là hỗn hợp protein kháng nguyên trước tiên được tách ra bằng điện di hai chiều, sau đó truyền protein gel lên màng hỗ trợ, sau đó kết màu bằng cách lai kháng thể. Công nghệ 2D-WB có thể phát hiện những thay đổi nhỏ trong các điểm điện như kháng nguyên hoặc trọng lượng phân tử và được sử dụng tốt trong nghiên cứu sửa đổi sau khi dịch protein; Và 2D-WB kết hợp với công nghệ xác định phổ khối lượng, có thể tìm thấy kháng nguyên miễn dịch mạnh hơn từ hỗn hợp protein.

III. Nội dung dịch vụ

1. Chiết xuất protein và định lượng;

2- Điện di hai chiều;

3. Chuyển màng, khép kín, ấp trứng, hiển thị hình ảnh.

IV. Quy trình hoạt động thử nghiệm

B5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)

2. Sau khi kết thúc hạng mục điện di thứ hai, lấy gel ra để chuyển màng, phương pháp chuyển màng có thể lựa chọn phương pháp ướt và phương pháp bán khô. Màng thường được sử dụng là màng NC và màng PVDF.

Đóng kín, 5% sữa bột tách kem hoặc 5% BSA đóng kín trong 1 giờ (nhiệt độ phòng) hoặc qua đêm (4 độ).

4, một chống ủ, theo hướng dẫn kháng thể để lựa chọn thời gian ủ, điều kiện ủ thông thường là nhiệt độ phòng 1 giờ hoặc 4 độ qua đêm, một chống ủ sau khi lấy màng

TBST rửa 3 lần, mỗi lần 5 phút.

5, hai kháng ủ: theo kháng một để chọn kháng hai thích hợp (chống chuột, chống người, chống thỏ, vv), sau khi ủ ở nhiệt độ phòng 1 giờ lấy màng TBST rửa 3 lần, mỗi lần 5 phút.

6, phát triển: pha loãng chất nền A và B theo tỷ lệ đồng đều sau khi nhỏ giọt trên màng, trong phòng tối đặt phim trên màng, bao gồm kẹp ép, sau khi phơi sáng một thời gian nhất định đặt phim vào chất lỏng phát triển để phát triển, cho đến khi xuất hiện dải protein rõ ràng, nước sạch sau khi rửa sạch sẽ sẽ được định hình trong chất lỏng cố định, thời gian phơi sáng cần xem xét tổng thể lượng mẫu protein trên, nồng độ pha loãng kháng thể, thời gian ủ kháng thể và các yếu tố khác.

Sau khi cố định, rửa phim, sấy khô, đánh dấu marker, quét hình ảnh và phân tích hình ảnh khối phương Tây 2D.

Để đảm bảo dịch vụ kỹ thuật blot 2D Western diễn ra suôn sẻ, việc gửi mẫu cần đáp ứng các yêu cầu sau:

1, khách hàng cung cấp: mô, tế bào, giải pháp protein, vv; 1- Tên đề tài: Giải pháp nâng cao hiệu quả đầu tư phát triển kết cấu hạ tầng thương mại (

2, Yêu cầu vận chuyển: băng khô hoặc nitơ lỏng đóng gói để gửi.

Lưu ý: Các mẫu phải tránh tất cả các loại ô nhiễm và đông lạnh lặp đi lặp lại.

V. Nội dung báo cáo dịch vụ kỹ thuật

1. Kết quả định lượng protein và mẫu điện di;

2, phim gốc, hình ảnh điện tử và kết quả phân tích hình ảnh;

2D Western blot Báo cáo thử nghiệm đầy đủ, bao gồm các bước thử nghiệm, sử dụng dụng cụ và thuốc thử.

Hướng dẫn cài đặt 2D Western Blot

2D Western blot protein mẫu chuẩn bị, nguyên tắc chính của chuẩn bị là để hòa tan tất cả các protein càng nhiều càng tốt, phá vỡ sự tương tác giữa protein và protein, tránh tất cả các loại chất gây nhiễu, chuẩn bị mẫu tương thích với IEF, vv

2, Các bước chính của điện di hai chiều, mục điện (IEF), cân bằng thanh keo, mục điện di thứ hai SDS-APGE.

3. Sau khi kết thúc hạng mục điện di thứ hai, lấy gel ra để chuyển màng, phương pháp chuyển màng có thể lựa chọn phương pháp ướt và phương pháp bán khô. Màng thường được sử dụng là màng NC và màng PVDF.

Đóng kín, 5% sữa bột tách kem hoặc 5% BSA đóng kín trong 1 giờ (nhiệt độ phòng) hoặc qua đêm (4 độ).

5- Chống ấp trứng, theo hướng dẫn kháng thể chọn thời gian ấp trứng, điều kiện ấp trứng thông thường là nhiệt độ phòng 1 giờ hoặc 4 độ qua đêm, sau khi chống ấp trứng lấy màng TBST ra rửa 3 lần, mỗi lần 5 phút.

6, chống ủ: theo - chống chọn kháng thích hợp (chống chuột, chống người, chống thỏ, v.v.), ủ ở nhiệt độ phòng sau 1 giờ lấy màng TBST ra rửa 3 lần, mỗi lần 5 phút.

7, phát triển: pha loãng chất nền A, B theo tỷ lệ trộn đều sau khi nhỏ giọt trên màng, phòng tối đặt phim trên màng, bao gồm kẹp ép, phơi sáng sau một thời gian nhất định đặt phim vào chất lỏng phát triển để phát triển, cho đến khi dải protein rõ ràng xuất hiện, nước sạch sau khi rửa sạch sẽ trong chất lỏng cố định, thời gian phơi sáng cần được xem xét tổng hợp protein. Lượng mẫu trên, nồng độ pha loãng kháng thể, thời gian ủ kháng thể......

Sau khi hoàn thiện, rửa phim, sấy khô, đánh dấu marker, quét hình ảnh và phân tích hình ảnh 2D Western blot.

từBắt đầu năm 2011chúng tôiCam kếtTrong lĩnh vực khoa học đời sống、Gia công phần mềm thí nghiệm y sinh và dịch vụ đánh bóng luận án, hỗ trợ khách hàng trong tất cả các loại dịch vụ thử nghiệm và đánh bóng luận ánHơn một thập kỷLà đối tác nghiên cứu khoa học đáng tin cậy của bạn.!

Nếu bạn bị giới hạn bởi thời gian, điều kiện thử nghiệm và không thể hoàn thành nghiên cứu chủ đề của mình, bạn được chào đón liên hệ với chúng tôi.

Dịch vụ thay thế thí nghiệm: