Tế bào thận phôi người 293T

Có thể đàm phánCập nhật vào05/06

Mô hình

Thiên nhiên của nhà sản xuất: Nhà sản xuất

Danh mục sản phẩm

Nơi xuất xứ

Tư vấn trực tuyến

Tổng quan

Tế bào thận phôi người 293T/HEK-293T là dẫn xuất của dòng tế bào 293T (293tsA1609neo) (ATCC CRL-11268). Các tế bào liên tục biểu hiện kháng nguyên SV40, thường được sử dụng trong các thí nghiệm truyền nhiễm với hiệu quả truyền nhiễm cao hơn.

Chi tiết sản phẩm

HEK-293T tế bào thận phôi người Này, 293T'293T'.
l Xác định tế bào	Chứng nhận STR đã được thông qua
l Nguồn tế bào	Kho tài nguyên quốc gia
l Bối cảnh tế bào	Tế bào HEK-293T là dẫn xuất của dòng tế bào 293T (293tsA1609neo) (ATCC CRL-11268). Các tế bào liên tục biểu hiện kháng nguyên SV40, thường được sử dụng trong các thí nghiệm truyền nhiễm với hiệu quả truyền nhiễm cao hơn. (Chuyển đổi thường được lát với mật độ 50%, sau khi các tế bào vừa được dán vào tường đĩa (thường là 8-10 giờ), bạn có thể thực hiện chuyển đổi)
l Đặc tính tế bào	1) Nguồn: thận phôi người 2) Hình thái: giống như tế bào biểu mô, phát triển trên tường, khả năng dán tường yếu 3) Nội dung:>Số lượng tế bào 1x106 4) Thông số kỹ thuật: chai T25 hoặc gói lưu trữ đông lạnh 1mL 5) Ứng dụng: Chỉ sử dụng cho nghiên cứu khoa học
l Điều kiện nuôi dưỡng:	1) Chuẩn bị môi trường DMEM (khuyến nghị awcell-0001); Huyết thanh bò thai chất lượng cao, 10%; L-glutamine (2 mM) 1%; NEAA 1% ； Đôi kháng 1% 2) Điều kiện nuôi: pha khí: không khí, 95%; CO2, 5%. Nhiệt độ: 37 ℃, độ ẩm buồng nuôi cấy là 70% -80%.
l Lưu ý:	Tế bào này là tế bào treo và tế bào dán tường nhẹ, có thể tham khảo các phương pháp sau: 1. Thu thập: Các tế bào lơ lửng trong chai nuôi cấy được thu thập vào ống ly tâm. Rửa sạch tế bào 1-2 lần bằng PBS không chứa các ion canxi và magiê. Vì các tế bào không được bảo vệ tốt, PBS cũng được tái chế vào ống ly tâm. 2. Thêm 0,25% (w/v) trypsin-0,53 mM EDTA trong chai nuôi cấy (T25 chai 1-2mL, T75 chai 2-3mL) đặt trong hộp nuôi cấy 37 ℃ tiêu hóa trong 1-2 phút (các tế bào khó tiêu hóa có thể kéo dài thời gian tiêu hóa thích hợp), sau đó quan sát tình trạng tiêu hóa tế bào dưới kính hiển vi, nếu phần lớn tế bào trở nên tròn và rơi ra nhanh chóng lấy lại bàn điều hành, sau vài lần gõ chai nuôi cấy thêm 3-4ml môi trường chứa 10℃ để chấm dứt tiêu hóa. 3. Các tế bào đình chỉ thu thập được, các tế bào trong chất tẩy rửa pbs và các tế bào dán tường tiêu hóa được ly tâm ở 1000rpml trong 5 phút, loại bỏ và làm sạch, sau khi bổ sung 1-2mL nuôi cấy sau khi đình chỉ lại được trộn đều, đình chỉ tế bào được chia theo tỷ lệ 1: 2 vào chai T25 mới, thêm 6-8ml mới * môi trường được cấu hình theo yêu cầu của hướng dẫn để duy trì sức sống tăng trưởng của tế bào, truyền thừa tiếp theo được thực hiện theo tỷ lệ 1: 2~1: 5 theo tình hình thực tế. Tế bào thận phôi người 293T đông lạnh: Sau khi nhận được tế bào, nên đông lạnh một số hạt tế bào trong 3 thế hệ đầu tiên để sử dụng trong các thí nghiệm tiếp theo.
l Hình thức vận chuyển:	Nhiệt độ thấp: (1) 1mL đông lưu trữ đóng gói băng khô vận chuyển, sau khi nhận được -80 độ tủ lạnh lưu trữ qua đêm sau khi chuyển sang nitơ lỏng hoặc hồi sức trực tiếp, nếu bạn thấy rằng đá khô đã bay hơi sạch sẽ, nắp chai đông lưu trữ rơi ra, bị hỏng và ô nhiễm tế bào, xin vui lòng liên hệ với chúng tôi ngay lập tức. Nhiệt độ bình thường (2) T25 Chai hồi sức tế bào sống sót được vận chuyển ở nhiệt độ bình thường, sau khi nhận được, hoạt động theo phương pháp xử lý của tế bào sau khi nhận.
An toàn sinh học:	Tất cả các tế bào động vật được coi là có khả năng gây nguy hiểm sinh học, phải được vận hành trong bảng an toàn sinh học thứ cấp và chú ý bảo vệ, tất cả các chất thải và dụng cụ đã tiếp xúc với tế bào này cần được khử trùng để loại bỏ. 2. Nên luôn sử dụng găng tay bảo hộ, quần áo và đeo mặt nạ bảo hộ khi hồi sức các tế bào đông lạnh. LƯU Ý: Các ống lưu trữ đông lạnh bị rò rỉ khi ngâm trong nitơ lỏng và sẽ từ từ được lấp đầy bằng nitơ lỏng. Khi tan băng, việc chuyển đổi nitơ lỏng thành pha khí có thể khiến thùng chứa phát nổ hoặc thổi bay nắp của nó bằng lực nguy hiểm, tạo ra các mảnh vụn bay để gây thương tích cho người.

Tế bào HEK-293T, còn được gọi là tế bào thận phôi người 293T, là một dòng tế bào được biến đổi gen có nguồn gốc từ các tế bào thận phôi người. Dòng tế bào này được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu y sinh do hiệu quả truyền nhiễm cao, đặc biệt là trong biểu hiện gen, sản xuất protein. Tế bào 293T là một dòng có nguồn gốc từ dòng tế bào HEK-293 thu được bằng cách chèn gen kháng nguyên SV40 T, cho phép chúng thể hiện hiệu quả cao hơn khi chuyển sang DNA ngoại lai.
Các tế bào HEK-293T có đặc điểm hình thái của các tế bào biểu mô và phát triển trên các bức tường. Tuy nhiên, khả năng dán tường của chúng tương đối yếu, vì vậy chúng có thể gặp vấn đề với việc tách tế bào trong quá trình nuôi cấy. Để cải thiện việc dán tường, các thùng nuôi cấy đôi khi được xử lý trước khi nuôi cấy bằng gelatin. Những tế bào này phát triển tốt hơn trong môi trường hơi có tính axit, thường được nuôi cấy trong môi trường DMEM chứa 10% huyết thanh bò thai và được nuôi cấy ở 37 ° C, 5% CO2.
Khi thực hiện di truyền tế bào, nó thường được thực hiện khi tỷ lệ hợp nhất tế bào đạt 80-90%, tỷ lệ truyền được đề xuất là 1: 3 đến 1: 4 và chu kỳ truyền khoảng 3-4 ngày. Khi các tế bào đông lạnh, chúng thường sử dụng chất đông lạnh chứa 5% DMSO và được lưu trữ trong nitơ lỏng để duy trì hoạt động của chúng.
Cần lưu ý rằng các tế bào 293T có những yêu cầu nhất định đối với nồng độ natri bicarbonate và nồng độ CO2 trong quá trình nuôi cấy. Nếu các tế bào không dính vào tường hoặc trôi nổi trong môi trường, nồng độ natri bicarbonate của môi trường và nồng độ CO2 trong môi trường có thể cần được kiểm tra và điều chỉnh khi cần thiết.

Sản phẩm tương tự Khuyến nghị