Tế bào cơ tim H9C2 chuột

Tế bào cơ tim H9C2

l Xác định tế bào

Xác định loài đã được thông qua.

l Nguồn tế bào

Kho tài nguyên quốc gia

l Bối cảnh tế bào

B. Kimes và B. Brandt đã nhân bản một dòng tế bào H9c2 (2-1) từ một dòng tế bào nhân bản có nguồn gốc từ mô tim phôi chuột BD1X, thể hiện nhiều đặc tính của cơ xương. Các nguyên bào cơ trong dòng tế bào này hợp nhất để tạo thành các ống cơ đa nhân và phản ứng với sự kích thích của acetylcholine. Nếu nồng độ huyết thanh trong môi trường giảm xuống 1%, quá trình hợp nhất xảy ra nhanh chóng.

l Đặc tính tế bào

1) Nguồn: Heart

2) Hình thái: Nguyên bào cơ, tăng trưởng trên tường

3) Nội dung:>Số lượng tế bào 1x106

4) Thông số kỹ thuật: chai T25 hoặc gói lưu trữ đông lạnh 1mL

5) Ứng dụng: Chỉ sử dụng cho nghiên cứu khoa học.

l Điều kiện nuôi dưỡng:

1) Chuẩn bị DMEM (bao gồm 1,5g/L NaHCO3 khuyến nghị: awcell-128-0001) hoặc (GIBCO, số 1280017, thêm NaHCO3 1,5g/L) môi trường; Huyết thanh bò thai chất lượng cao, 10%; Kháng gấp đôi 1%.

2) Điều kiện nuôi: pha khí: không khí, 95%; CO2, 5%. Nhiệt độ: 37 độ C, độ ẩm buồng nuôi cấy là 70% -80%.

l Lưu ý:

Lưu ý: Tế bào cơ tim chuột H9C2 Tế bào này phát triển tốt trong môi trường DMEM (chứa 1,5g/LNaHCO3), hầu hết các nhãn hiệu DMEM chứa nồng độ NaHCO3 cao hơn (3,7g/L), nếu sử dụng môi trường DMEM (3,7g/L NaHCO3) để nuôi cấy tế bào cần tăng nồng độ CO2 (7% -10%).

Đối với việc truyền tế bào dán tường có thể tham khảo các phương pháp sau:

1. Bỏ đi nuôi cấy, rửa sạch tế bào bằng PBS không chứa canxi, ion magiê 1 - 2 lần.

2. Thêm 0,25% (w/v) trypsin-0,53 mM EDTA trong chai nuôi cấy (T25 chai 1-2mL, T75 chai 2-3mL), đặt trong hộp nuôi cấy 37 ℃ tiêu hóa trong 1-2 phút (các tế bào khó tiêu hóa có thể kéo dài thời gian tiêu hóa thích hợp), sau đó quan sát tình trạng tiêu hóa tế bào dưới kính hiển vi, nếu phần lớn tế bào tròn và rơi ra, nhanh chóng lấy lại bàn điều hành, gõ vài lần vào chai sau đó thêm 3-4ml môi trường chứa 10℃ để chấm dứt tiêu hóa.

3. Nhẹ nhàng đánh đều rồi hút ra, ly tâm 3 - 5 phút trong điều kiện 1000 vòng M, bỏ đi chất lỏng, bổ sung 1 - 2 ml chất lỏng nuôi cấy rồi thổi đều. Đình chỉ tế bào được chia thành chai T25 mới theo tỷ lệ 1: 2, thêm 6-8ml môi trường * mới được cấu hình theo yêu cầu của hướng dẫn để duy trì sự tăng trưởng của tế bào, truyền thừa tiếp theo được thực hiện theo tỷ lệ 1: 2~1: 5 theo tình hình thực tế.

3) Đóng băng tế bào: Sau khi nhận được tế bào, nên đóng băng một số hạt giống tế bào trong quá trình nuôi cấy 3 thế hệ đầu tiên để sử dụng trong các thí nghiệm tiếp theo.

l Hình thức vận chuyển:

Nhiệt độ thấp: (1) 1mL đông lưu trữ đóng gói băng khô vận chuyển, sau khi nhận được -80 độ tủ lạnh lưu trữ qua đêm sau khi chuyển sang nitơ lỏng hoặc hồi sức trực tiếp, nếu bạn thấy rằng đá khô đã bay hơi sạch sẽ, nắp chai đông lưu trữ rơi ra, bị hỏng và ô nhiễm tế bào, xin vui lòng liên hệ với chúng tôi ngay lập tức.

Nhiệt độ bình thường (2) T25 Chai hồi sức tế bào sống sót được vận chuyển ở nhiệt độ bình thường, sau khi nhận được, hoạt động theo phương pháp xử lý của tế bào sau khi nhận.

An toàn sinh học:

Tất cả các tế bào động vật được coi là có khả năng gây nguy hiểm sinh học, phải được vận hành trong bảng an toàn sinh học thứ cấp và chú ý bảo vệ, tất cả các chất thải và dụng cụ đã tiếp xúc với tế bào này cần được khử trùng để loại bỏ.

2. Nên luôn sử dụng găng tay bảo hộ, quần áo và đeo mặt nạ bảo hộ khi hồi sức các tế bào đông lạnh. LƯU Ý: Các ống lưu trữ đông lạnh bị rò rỉ khi ngâm trong nitơ lỏng và sẽ từ từ được lấp đầy bằng nitơ lỏng. Khi tan băng, việc chuyển đổi nitơ lỏng thành pha khí có thể khiến thùng chứa phát nổ hoặc thổi bay nắp của nó bằng lực nguy hiểm, tạo ra các mảnh vụn bay để gây thương tích cho người.