Dịch vụ kỹ thuật cá

Dịch vụ kỹ thuật cá ban đầu thường được sử dụng để tìm hiểu về sự khuếch đại, mất tích, hợp nhất hoặc gãy gen hoặc nhiễm sắc thể, áp dụng cho: chẩn đoán trước khi sinh, phát hiện bệnh di truyền sau khi sinh, chẩn đoán khối u và đánh giá tiên lượng, v.v. Các mẫu có nguồn gốc rộng: mô, tế bào rụng, nước ối, máu, tủy xương đều có thể được phát hiện, và không chỉ giới hạn trong các mẫu tươi, mẫu parafin 2-3 năm có thể được phát hiện.

FISH cũng có thể phát hiện axit nucleic trong chip mô (hiện nay thường được sử dụng để phát hiện ncRNA: microRNA, lncRNA, circRNA), có thể biết được vị trí biểu hiện của axit nucleic trong hàng chục hoặc hàng trăm mẫu vật, có thể được sử dụng để phân tích sự khác biệt biểu hiện của axit nucleic bên cạnh ung thư và ung thư, sự tương quan giữa biểu hiện axit nucleic và thời gian sống, mối quan hệ giữa biểu hiện axit nucleic và sự phát triển của khối u, v.v.

Quy trình thử nghiệm dịch vụ kỹ thuật cá:

Dịch vụ kỹ thuật cáFlorescence In Situ Hybridization (FISH) là một kỹ thuật sử dụng tín hiệu huỳnh quang không phóng xạ để phát hiện các mẫu lai tại chỗ. Nó kết hợp độ nhạy cao, an toàn của tín hiệu huỳnh quang, trực quan của tín hiệu huỳnh quang và độ chính xác cao của lai tạo tại chỗ, lai tạo tại chỗ với DNA của mẫu được thử nghiệm bằng đầu dò DNA được đánh dấu huỳnh quang, phân biệt và đếm tín hiệu huỳnh quang dưới kính hiển vi huỳnh quang, do đó phát hiện và chẩn đoán các tế bào, mẫu mô nhiễm sắc thể hoặc bất thường về gen, cung cấp cơ sở chính xác cho việc phân loại, tiền đề và tiên lượng của các bệnh liên quan đến gen khác nhau. Kể từ cuối những năm 1980, khi Pinkel và Heiles giới thiệu công nghệ FISH vào lĩnh vực xét nghiệm nhiễm sắc thể, công nghệ FISH đã được sử dụng rộng rãi trong chẩn đoán lâm sàng và nghiên cứu khoa học, cho thấy lợi thế rõ rệt so với một số kỹ thuật truyền thống.

Công nghệ lai huỳnh quang tại chỗDịch vụ kỹ thuật cáFISH có tính ổn định và lặp lại tốt so với phương pháp hóa học mô miễn dịch truyền thống (IHC). Hiện nay, phương pháp hóa học mô miễn dịch đang được sử dụng rộng rãi trong chẩn đoán lâm sàng trong nhiều lĩnh vực như khối u. Miễn dịch được thử nghiệm cho các protein liên quan đến bệnh. Vì sự biểu hiện của protein và cấu trúc của chính nó bị ảnh hưởng rất nhiều bởi các yếu tố khác nhau (ví dụ: axit, kiềm và các tác nhân biến tính), sự ổn định của các điều kiện phát hiện là rất quan trọng đối với kết quả phát hiện. Ngoài ra, việc đánh giá kết quả xét nghiệm miễn dịch dựa trên đánh giá chủ quan của người kiểm tra về kết quả kết xuất màu, và đối với một số kết quả dương tính yếu, các xét nghiệm khác nhau dễ bị bất đồng. Tất cả các yếu tố trên có thể ảnh hưởng đến chẩn đoán cuối cùng của bác sĩ về tình trạng này.

Công nghệ lai huỳnh quang tại chỗDịch vụ kỹ thuật cáĐối tượng là DNA trong tế bào, cấu trúc xoắn kép dày đặc giúp DNA có thể trải qua hàng triệu năm mà vẫn duy trì tốt, cấu trúc ổn định, không dễ bị ảnh hưởng bởi điều kiện môi trường, cung cấp nền tảng tốt cho sự ổn định của kỹ thuật lai tạo huỳnh quang tại chỗ. Ngoài ra, việc xác định kết quả lai huỳnh quang tại chỗ được đo lường một cách khách quan bằng cách sử dụng phán đoán màu sắc và số lượng tín hiệu của huỳnh quang. Nếu sử dụng hệ điều hành FISH tương ứng (ví dụ như máy lai Hybrit của Abbott-Vysis và hệ thống tiền xử lý mẫu VP2000) và hệ thống hình ảnh nhiễm sắc thể có thể tự động hóa toàn bộ hoạt động FISH, giảm thiểu các yếu tố chủ quan của người vận hành và người phát hiện và đảm bảo tính chính xác của kết quả.

PCR do độ nhạy cao, hoạt động dễ dàng và nhanh chóng được áp dụng trong những năm gần đây tương đối nhiều kỹ thuật chẩn đoán di truyền, nhưng tỷ lệ âm tính giả và dương tính giả của công nghệ chẩn đoán PCR cao hơn, cùng một mẫu chỉ có thể được phân tích một lần, không thể lặp lại kết quả thí nghiệm. Khi công nghệ thăm dò tiếp tục phát triển, độ nhạy hiện tại của FISH đã gần hoặc đạt đến mức PCR và bù đắp tốt cho những hạn chế của công nghệ PCR. Công nghệ lai huỳnh quang tại chỗ không chỉ có tỷ lệ dương tính giả cực thấp, âm tính giả (lấy đầu dò chẩn đoán trước sinh của Abbott-Vysis, với 29.000 trường hợp được xác nhận là chính xác 99,9%), mà còn thực hiện nhiều thao tác FISH trên cùng một mẫu và phát hiện nhiều bất thường nhiễm sắc thể hoặc gen cùng một lúc bằng cách sử dụng đầu dò huỳnh quang có màu sắc khác nhau, giúp tiết kiệm đáng kể thời gian phát hiện. Ngoài ra, thông quaDịch vụ kỹ thuật cáCác nghiên cứu chẩn đoán có thể được thực hiện trên số lượng bất thường của nhiễm sắc thể hoặc gen cụ thể, thiếu, chuyển vị và sắp xếp lại các mảnh cụ thể.

Kỹ thuật lai huỳnh quang tại chỗ (FISH) là một phương pháp áp dụng các chất huỳnh quang không phóng xạ để hiển thị vị trí của trình tự DNA trong hạt nhân hoặc trên nhiễm sắc thể dựa trên nguyên tắc lai đầu dò axit nucleic. Công nghệ này có các tính năng như nhanh chóng, an toàn, độ nhạy cao và đầu dò có thể được bảo quản lâu dài, hiện đã được sử dụng rộng rãi trong di truyền học tế bào, sinh học khối u, định vị gen, bản đồ gen, khuếch đại gen, chẩn đoán trước khi sinh và nghiên cứu tiến hóa nhiễm sắc thể động vật có vú.

Nói một cách đơn giản, đó là nguyên tắc ghép đôi bổ sung cơ sở, đó là chúng ta ghép đôi axit nucleic ngoại sinh (thường được gọi là đầu dò phân tử) với DNA hoặc RNA được kiểm tra trên các mô, tế bào, hình thành các phân tử lai axit nucleic, sau đó thông qua một số thủ đoạn để hiển thị vị trí của phân tử lai này.

RNA > DNARNA > DNADNA

　　Dịch vụ kỹ thuật cáNó đã được sử dụng rộng rãi trong các lĩnh vực di truyền tế bào, sinh học khối u, định vị gen, bản đồ gen, khuếch đại gen, chẩn đoán trước khi sinh và nghiên cứu tiến hóa nhiễm sắc thể động vật có vú.

Hybrid huỳnh quang tại chỗ đơn giản hóa việc phát hiện các biến thể cấu trúc của nhiễm sắc thể. Ví dụ như nhiễm sắc thể thực vật không hoàn chỉnh là do hành vi nhiễm sắc thể bất thường, tức là có thể do sự khác biệt về số lượng và cấu trúc của nhiễm sắc thể giao tử của cha mẹ hoặc do quan hệ họ hàng nhiễm sắc thể xa hơn. Các nhiễm sắc thể bị thiếu, đính kèm hoặc thay thế có thể được phát hiện dễ dàng hơn bằng cách sử dụng lai tạo tại chỗ.

Độ phân giải và độ nhạy không gian FISH cho phép bố mẹ và gen khuếch đại có thể định vị trong các tế bào kháng sâu bệnh. Gen được khuếch đại chủ yếu nằm trên cùng một cánh tay nhiễm sắc thể, nhưng ở một khoảng cách nhất định từ gen cha mẹ ban đầu và thường nằm độc lập tại vị trí telomere của nhiễm sắc thể; Phân tích FISH cho thấy các tế bào bị phá vỡ có thể là do sự sắp xếp lại cấu trúc của các vùng nhiễm sắc thể chứa các vùng khuếch đại. Đồng thời sử dụng FISH để xác định vị trí và số lượng bản sao của gen trong và ngoài thực vật biến đổi gen, phương pháp này đã thành công trong cà chua, thuốc lá, lúa mạch, lúa mì, lúa mạch đen và các loại cây trồng khác. Việc thiếu một số gen liên quan đến rối loạn di truyền cũng có thể được phát hiện bằng kỹ thuật FISH, chẳng hạn như phát hiện thành công các gen bị thiếu ở những người mắc bệnh aniridia.

Kỹ thuật định vị gen của lai tạo huỳnh quang tại chỗ có ứng dụng rộng rãi. Vị trí của các gen liên quan đến ung thư phổi đột biến PP2Ac trong vùng nhiễm sắc thể, đặc điểm của các tín hiệu lai được ghi lại và phân tích dưới kính hiển vi huỳnh quang. Kết quả là tín hiệu lai rõ ràng có thể nhìn thấy trên nhiễm sắc thể 5q23-31 của tế bào lympho người bình thường và tín hiệu mạnh hơn xuất hiện trên nhiễm sắc thể 5 và 7 của tế bào GLC-82. Đột biến điểm mô tả gây ra sự thay đổi trong hoạt động PP2Ac, do đó thay đổi gen, dẫn đến sản xuất khối u phổi. Kỹ thuật FISH kết hợp với các kỹ thuật sinh hóa, máy tính và DNA tái tổ hợp để phát hiện vị trí Alu, cho thấy trình tự DNA có liên quan đến kiểu vành đai. Các nghiên cứu về sự phân bố gen mã hóa trong bộ gen người bằng kỹ thuật FISH đã tiết lộ rằng các gen tập trung chủ yếu vào các đoạn DNA G+C (35% bộ gen đầy đủ) trên nhiễm sắc thể. Kỹ thuật FISH cung cấp một phương tiện quan trọng để nghiên cứu cấu trúc tâm động. Các telomere nhiễm sắc thể có thể được quan sát trực tiếp bằng kỹ thuật FISH, giúp đơn giản hóa việc nghiên cứu cấu trúc và chức năng của nhiễm sắc thể trong hạt nhân.