T-Carrier Colony PCR Bộ dụng cụ nhận dạng T4 Nguyên tắc Carrier

Bộ dụng cụ nhận dạng PCR T Carrier Colony phổ quát

T-Carrier Colony PCR Bộ dụng cụ nhận dạng T4 Nguyên tắc Carrier

Số thư mục:42015

Bộ thành phần, lưu trữ, ổn định:

Lưu trữ:-20 ℃ 保存。

Giới thiệu sản phẩm:

Thuộc địaPCRXác định làTSau khi kết nối nhân bản mang theo, xác định xem có phương pháp nhân bản dương tính hay không (bao gồm các đoạn cắt vào) thuận tiện và nhanh chóng. Nhưng có thể thấy trên thị trường.PCRBộ dụng cụ giám định đều được sử dụng.T3, T7hoặcSP6Đẳng đặc dịTChất dẫn vận chuyển, chỉ có thể được sử dụng cho một số loại cụ thểTGiám định kết nối vật dẫn với nhân bản dương tính. Nếu sử dụng khácTPhương tiện truyền tải, cần đồng thời mua nhiều loại dụng cụ giám định, tăng thêm rất nhiều chi phí sử dụng. Công ty áp dụng chungTPhát triển chung của Carrier PrimerTThuộc địa vận chuyểnPCRNhận dạng bộ dụng cụ, chỉ cần mua một loại bộ dụng cụ, là có thể dùng cho tất cả các loại phổ biến trên thị trường.TTrang chủ(bao gồmpGEM，PUC，PBluescriptloạt)Xác định kết nối nhân bản dương tính. Ngoài ra, áp dụngT3, T7hoặcSP6Thuộc địa làm mồi nhửPCRXác định khoảng cách từ vị trí chèn của bộ dụng cụ là rất ngắn, vì vậy trong việc xác định100bpKhi chèn các đoạn trái và phải hoặc nhỏ hơn, kích thước của dải nhị tụ dẫn của bản sao âm tính và dải khuếch đại bản sao dương tính gần nhau, không thể phân biệt được. Thường coi dải dẫn vật nhị tụ là dải khuếch đại dương tính, tạo thành dương tính giả. Ngược lại, tạo thành âm tính giả. Kit này dùng chungTKhoảng cách của mồi mang ít nhất là khi mảnh vỡ không được chèn150bpTrên đây, cộng thêm chiều dài của đoạn chèn, có thể phân biệt rõ ràng là đoạn chèn mở rộng ra hay là đoạn dẫn mở rộng ra. Tránh dương tính giả hoặc âm tính giả, nâng cao độ chính xác rất nhiều.Một ống xách tay được phát triển bởi công ty chúng tôiPCR MasterMixHệ thống trộn sẵn, không cần bạn thêm vào từng thành phần, trực tiếp thêm vào cần sàng lọc các thuộc địa đơn lẻ, trải qua1Khoảng một giờ.PCRPhản ứng và kiểm tra điện di có thể nhận được kết quả giám định lại thuộc địa.

Phân đoạn khuếch đại dự kiến:

Lưu ý:

1. Khi giám định lại các thuộc địa, trước khi chọn ra các thuộc địa đơn lẻ, nên đánh dấu trước, thuận tiện cho việc giám định và sử dụng sau đó.

2. Khi chọn các thuộc địa, nên chọn các thuộc địa đơn lẻ, không chọn quá nhiều để không ảnh hưởng đếnPCRKết quả.

3. thiết lậpPCRKhi chương trình, hãy quyết định thời gian mở rộng dựa trên kích thước mảnh chèn, nếu kích thước mảnh chèn làKhoảng 1 kbSau đây, kéo dài thời gian30-45Giây là được, nếu đoạn dài hơn, có thể tăng thời gian kéo dài theo tỷ lệ này.

Hành Chính Nhân Sự Tổng Hợp (Human Resources - Admin Executive (25mlVí dụ về hệ thống, khách hàng cũng có thể áp dụng.20mlHệ thống):

{C}1. Kết hợp các chất có chứa mồi theo hệ thống sau1 x Taq MasterMixChất lỏng phản ứng.

2. Sau khi đánh số khuẩn lạc trên tấm nuôi qua đêm, sử dụng đầu súng khử trùng để chọn một phần khuẩn lạc đơn lẻ cho vào dịch phản ứng nói trên, thổi và trộn đều để khuẩn lạc phân tán đầy đủ vào dịch phản ứng.

Có thể thiết lập thêm một ống đối chiếu âm tính không thêm khuẩn lạc để dễ dàng phân tích kết quả thí nghiệm.

3. đặtPCRỐng được đặt trên máy tuần hoàn nhiệt để bắt đầu phản ứng theo các điều kiện sau, các điều kiện được khuyến nghị như sau:

94℃10 phút

94℃30 giây

55℃30 giây 30-33 chu kỳ

72℃0,5-1 phút

72℃5 phút

Lưu ý: Thời gian mở rộng Vui lòng điều chỉnh theo kích thước đoạn chèn. Thời gian chuyển đổi được kéo dài đến10phút, chủ yếu để tách các thuộc địa, giải phóngDNABản mẫu.

Sau khi phản ứng kết thúc, lấy5-10mlKiểm tra điện di mẫu trực tiếp.

Lưu ý: Nếu vi khuẩn khó nứt hoặc tạp chất đa âm tính giả, hãy thử phương pháp dưới đây, nứt giải phóngDNASau đó tiến hành.

1. Chọn thuộc địa để tham gia 50mLddnước (hoặc10mLddtrong nước) rung động.

2. 99Độ,10Bất hoạt enzyme trong dung dịch vi khuẩn phút và giải phóngDNA。

3. 12000rpmLy tâm1Một phút để loại bỏ các mảnh tế bào.

4. Lấy sạchPCR，25ml PCRHệ thống lấy5mlKhởi đầu (Beginning)50mLddnước) hoặc1mlKhởi đầu (Beginning)10mLddnước) làm khuôn mẫu.

T-Carrier Colony PCR Bộ dụng cụ nhận dạng T4 Nguyên tắc Carrier