Danh mục sản phẩm

Công ty TNHH Thương mại và Thương mại Bắc Kinh Lambolid

Thông tin E-mail
Điện thoại
Địa chỉ
Cao ốc khoa học kỹ thuật Hoa Hạ số 8 vườn phần mềm Trung Quan Thôn khu Hải Tinh thành phố Bắc Kinh 307

Máy chiết xuất axit nucleic trizol pal Thuốc thử cloroform

Có thể đàm phánCập nhật vào05/06

Mô hình

Thiên nhiên của nhà sản xuất: Nhà sản xuất

Danh mục sản phẩm

Nơi xuất xứ

Tư vấn trực tuyến

Tổng quan

Thuốc thử cloroform trizol pal để chiết xuất RNA. Trizol pal (thuốc thử chloroform) có thể được sử dụng kết hợp với Trizol Reagent (R1000), có thể thay thế chloroform, lặp đi lặp lại hệ thống lysis để loại bỏ protein, rất linh hoạt, có thể lấy tổng RNA từ các mẫu như mô động vật, vật liệu thực vật, các loại vi sinh vật và tế bào nuôi cấy. Các mẫu được phân tách đầy đủ trong Trizol trong khi đảm bảo tối đa tính toàn vẹn của RNA.

Chi tiết sản phẩm

Thuốc thử chloroform trizol pal để chiết xuất RNASố hàng: R1200

Điều kiện lưu trữ 0-30 ℃ Bảo quản tránh ánh sáng

Thuốc thử chloroform trizol pal để chiết xuất RNAMô tả sản phẩm:

Trizol PAL có thể được sử dụng kết hợp với Trizol Reagent (R1000), có thể thay thế chloroform, lặp đi lặp lại hệ thống lysis để loại bỏ protein, rất linh hoạt, có thể chiết xuất tổng RNA từ các mẫu như mô động vật, vật liệu thực vật, các loại vi sinh vật và tế bào nuôi cấy. Các mẫu được phân tách đầy đủ trong Trizol trong khi đảm bảo tối đa tính toàn vẹn của RNA. Sau khi thêm ly tâm Trizol PAL, dung dịch được chia thành ba lớp: pha nước không màu ở trên, pha trung gian và pha hữu cơ màu đỏ ở dưới, với RNA được phân phối trong lớp thanh lọc trên. Sau khi thu thập lớp trên, tổng RNA có thể được thu hồi bằng kết tủa isopropyl alcohol. Toàn bộ RNA được chiết xuất có tính toàn vẹn tốt, không bị nhiễm protein và DNA và có thể được sử dụng trong các thí nghiệm thông thường khác nhau trong sinh học phân tử, chẳng hạn như RT-PCR、Real-time RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、 Phiên dịch bên ngoài cơ thể.

Thuốc thử tự chuẩn bị

Trizol Reagent (R1000), isopropyl alcohol, 75% ethanol, nước không có RNase (đặc biệt cho RNA mới mở hoặc chiết xuất)

Máy chiết xuất axit nucleicChú ý:

1. Phòng ngừa ô nhiễm RNase, cần chú ý các khía cạnh sau:

1) Sử dụng các sản phẩm nhựa và đầu súng không có RNase để tránh ô nhiễm chéo.

2) Thủy tinh nên được nướng khô ở nhiệt độ cao 180 ℃ trong 4h trước khi sử dụng, nhựa có thể được ngâm trong 0,5 M NaOH trong 10 phút, và hấp tiệt trùng sau khi rửa sạch với chedi.

3) Dung dịch pha chế nên sử dụng nước không có RNase.

4) Nhân viên vận hành đeo khẩu trang và găng tay dùng một lần, phải thay găng tay thường xuyên trong quá trình thử nghiệm.

2. Mẫu được chiết xuất tránh đông lạnh nhiều lần, nếu không sẽ ảnh hưởng đến tỷ lệ và chất lượng chiết xuất RNA.

3, Việc sử dụng sản phẩm này nên mặc các vật phẩm bảo vệ, chẳng hạn như găng tay, mặt nạ mắt, mặt nạ, v.v. Nếu vô tình tiếp xúc với mắt, bạn nên rửa ngay bằng nhiều nước và đến bệnh viện để điều trị. Tránh xa lửa, nguồn nhiệt khi sử dụng.

Kết tủa RNA được bảo quản trong 75% ethanol, 2-8 ℃ có thể được bảo quản trong một tuần, -20 ℃ có thể được bảo quản trong 1 năm.

RNA có chu kỳ bán rã tương đối ngắn và dễ bị phân hủy, nên tiến hành các thí nghiệm tiếp theo như sao chép ngược thành cDNA, Northern Blot, v.v. càng sớm càng tốt sau khi chiết xuất.

Nếu các thí nghiệm hạ lưu rất nhạy cảm với DNA, RNA nên được xử lý bằng DNase I không chứa RNase.

Các bước hoạt động:

1- Xử lý các loại vật liệu.

1.1 Mô thực vật: Lấy mô thực vật tươi để nghiền kỹ trong nitơ lỏng hoặc sau khi cắt nhỏ nhóm thực vật zhi để nghiền nhanh trong Trizol, thêm 1 mL Trizol mỗi 30-50 mg mô, trộn đều.

Lưu ý: Khối lượng mẫu thường không vượt quá 10% khối lượng Trizol.

1.2 Mô động vật: Lấy mô động vật tươi hoặc đông lạnh -70 ℃ càng nhiều càng tốt, mỗi 30-50 mg mô thêm 1 mL Trizol, san lấp mặt bằng để điều trị san lấp mặt bằng. Hoặc trộn Trizol 1 mL sau khi nghiền trong nitơ lỏng.

Lưu ý: Khối lượng mẫu thường không vượt quá 10% khối lượng Trizol.

1.3 Tế bào nuôi cấy một lớp: Hút dung dịch nuôi cấy, có thể trực tiếp thêm lượng Trizol vừa phải vào đĩa nuôi cấy (mỗi 10 cm2 diện tích cần 1 mL Trizol), dùng máy lấy mẫu thổi liên tục để phân giải tế bào. Nó cũng có thể được sử dụng sau khi xử lý enzyme tụy bai, chuyển dung dịch tế bào vào ống ly tâm RNase-Free, 300 × g ly tâm trong 5 phút, thu thập lượng mưa tế bào, cẩn thận hấp thụ tất cả các thanh lọc, thêm Trizol 1 mL trộn đều.

Lưu ý: 1) Số lượng tế bào thu thập không vượt quá 1 × 10 7.

2) TRNzol bổ sung được xác định theo diện tích của tấm nuôi cấy, không phải bởi số lượng tế bào. Nếu không đủ Trizol, nó có thể dẫn đến nhiễm DNA trong RNA được chiết xuất.

3) Khi thu thập tế bào nhất định phải loại bỏ sạch dịch nuôi cấy tế bào, nếu không sẽ dẫn đến phân giải không đầy đủ, dẫn đến sản lượng RNA giảm.

1.4 Đình chỉ tế bào: Thu thập tế bào ly tâm. 1 mL Trizol được thêm vào mỗi 5 × 10 6-1 × 10 7 tế bào động vật, thực vật và nấm men hoặc mỗi 10 7 tế bào vi khuẩn.

Lưu ý: 1) Không rửa tế bào trước khi thêm Trizol để tránh sự suy thoái RNA.

2) Một số tế bào men và vi khuẩn có thể yêu cầu điều trị san lấp mặt bằng hoặc mài nitơ lỏng.

Xử lý máu 1,5: Lấy máu tươi trực tiếp, thêm 3 lần thể tích Trizol (khuyến nghị 0,25 mL máu toàn phần thêm 0,75 mL Trizol), trộn đều.

1.6 Bước tùy chọn: Đối với các mẫu có hàm lượng protein, chất béo, polysaccharide hoặc chất ngoại bào cao, chẳng hạn như mô cơ, mô mỡ hoặc củ của thực vật, có thể được ly tâm trong 10 phút sau khi điều trị san lấp mặt bằng, 12.000 vòng/phút (~13.400 × g) để loại bỏ các chất không hòa tan, khi kết tủa chứa chất ngoại bào, polysaccharide và DNA có trọng lượng phân tử cao, trong khi RNA tồn tại trong quá trình thanh lọc.

2, sau khi thêm Trizol vào mẫu, thổi nhiều lần để mẫu được nứt đầy đủ. Để ở nhiệt độ phòng trong 5 phút để phức hợp axit nucleic protein hoàn toàn tách biệt.

Thêm Trizol Pal vào dung dịch trên, mỗi 1 mL Trizol thêm 0,2 mL Trizol Pal, đậy nắp ống, dao động mạnh trong 15 giây, để ở nhiệt độ phòng 2-3 phút.

4, 4 ℃ 12.000 rpm ly tâm trong 15 phút, tại thời điểm này mẫu được chia thành ba lớp: pha hữu cơ màu đỏ, pha trung gian và pha nước không màu trên, RNA chủ yếu ở pha nước, chuyển pha nước (khoảng 600 μL) vào một ống ly tâm RNase-Free mới (tự chuẩn bị).

5. Thêm các thể tích khác nhau vào dung dịch nước, trộn đều, để ở nhiệt độ phòng 10 phút.

6, 4 ℃ 12.000 vòng/phút ly tâm, loại bỏ.

Thêm 75% ethanol (pha với nước không có RNase) để rửa kết tủa. Lượng mưa được rửa bằng 1 mL 75% ethanol cho mỗi 1 mL Trizol được sử dụng.

8, 4 ℃ 12.000 rpm ly tâm trong 3 phút, cẩn thận hút sạch, chú ý không hút kết tủa RNA.

Lưu ý: Một lượng nhỏ chất lỏng còn lại có thể được ly tâm trong thời gian ngắn, sau đó được hút ra bằng đầu súng, chú ý không hút và lắng đọng.

9. Để nhiệt độ phòng 2 - 3 phút, hong khô. Thêm 30-100 μL nước không có RNase, hòa tan RNA đầy đủ và RNA thu được được giữ ở -70 ℃, ngăn ngừa sự suy thoái.

Lưu ý: lắng đọng không nên quá khô, để tránh khó hòa tan.

Sản phẩm tương tự Khuyến nghị