Thực vật Trehalose-6-Phosphate (T6P) ELISA Kit

　　Thực vật Trehalose-6-Phosphate (T6P) ELISA KitHướng dẫn sử dụng

BS-8050-A Thực vật Trehalose-6-Phosphate (T6P) ELISA Kit 96T

BS-8050-B Thực vật Trehalose-6-Phosphate (T6P) ELISA Kit 48T

I. Nguyên tắc thí nghiệm

Bộ dụng cụ này sử dụng xét nghiệm hấp phụ miễn dịch liên kết enzyme lưỡng kháng thể (ELISA) để phát hiện nồng độ T6P trong mô hoặc tế bào thực vật. Tấm microporous được bọc trước kháng thể chống T6P, và sau khi T6P liên kết với kháng thể pha rắn trong mẫu, một phức hợp diantiform được đánh dấu bởi horseradish peroxidase (HRP) được thêm vào. Kết xuất màu TMB cơ chất được thêm vào, TMB được chuyển đổi thành màu xanh dưới xúc tác HRP, màu vàng sau khi kết thúc axit, độ sâu kết xuất màu tương quan tích cực với nồng độ T6P trong mẫu, nồng độ tính toán hấp thụ được xác định ở bước sóng 450nm.

II. Thành phần bộ dụng cụ

Thông số kỹ thuật thành phần Điều kiện bảo quản

Pre-packed được sấy khô bằng tấm micropore 12 lỗ × 8 dải 2-8 ℃

Bột đông khô tiêu chuẩn -20 ℃ sau khi tái hòa tan

HRP đánh dấu phát hiện kháng thể lỏng tránh ánh sáng 2-8 ℃

Chất nền kết xuất màu (TMB) Chất lỏng A+B Chất lỏng hiện tại, tránh ánh sáng

Chấm dứt chất lỏng 2M Sulfuric Acid Nhiệt độ phòng

Chất lỏng rửa cô đặc 40 ℃ Tắm nước hòa tan tinh thể

Mẫu xishi lỏng chứa chất ổn định

Lưu ý: Các thành phần thương hiệu khác nhau có thể có sự khác biệt, xem hướng dẫn cụ thể.

III. Xử lý mẫu

1. Loại mẫu

Mô thực vật: được gọi là 0,1g mô, thêm 1mL chiết xuất nước đá tắm san lấp mặt bằng, ly tâm được làm sạch.

Tế bào/vi khuẩn: thu thập ly tâm sau khi loại bỏ, siêu âm phá vỡ tế bào chiết xuất làm sạch.

2. Điều kiện bảo quản

Ngắn hạn ‌ Bảo quản ≤ 48 giờ ở 2-8 ℃.

Dài hạn: đông lạnh ở -20 ℃ sau khi tách, tránh đông lạnh và tan chảy lặp đi lặp lại.

3. Đề xuất pha loãng

Mẫu thông thường ‌: Pha loãng đề nghị 5-20 lần (ví dụ: lấy mẫu 20 μL+180 μL pha loãng).

Mẫu nồng độ cao‌: Cần phải thử nghiệm trước để xác định bội số pha loãng, pha loãng tối đa 100.000 lần (phương pháp pha loãng ba bước).

IV. Các bước hoạt động

Sản phẩm tiêu chuẩn ‌

Tiêu chuẩn đông khô thêm 1 ml dung dịch pha loãng hòa tan, trộn đều rồi để yên 10 phút.

Pha loãng hàng loạt (ví dụ: 8pmol/L → 4pmol/L →... → 0,5pmol/L).

Thêm mẫu ‌

Lỗ tiêu chuẩn: 50μL/lỗ.

Lỗ mẫu: Đầu tiên pha loãng 40 μL, sau đó là mẫu 10 μL (tổng pha loãng 5 lần).

Lỗ trắng: Không thêm mẫu và kháng hai.

ấp ‌

Ủ ở 37 độ C 120 phút, rửa 3 lần (mỗi lần ngâm 1 phút).

Kết xuất và kết thúc ‌

Mỗi lỗ có dung dịch kết xuất màu TMB 100 μL, ủ tránh ánh sáng 37 ° C trong 15 phút.

Thêm dung dịch chấm dứt 50μL phản ứng chấm dứt, đo giá trị OD trong vòng 30 phút.

V. Chú ý

Tránh lấy mẫu: Các mẫu có chứa natri azide (NaN3) (ức chế hoạt động HRP).

Cân bằng thuốc thử: Sử dụng cân bằng nhiệt độ buồng trước trong 20 phút, chất tẩy rửa cô đặc cần tắm nước 40 ℃ để hòa tan kết tinh.

Kiểm soát chất lượng‌: đề nghị thiết lập các lỗ lặp, đường cong tiêu chuẩn R² nên ≥ 0,95.

VI. Phân tích kết quả

Standard Curve: Vẽ phương trình bốn tham số theo nồng độ ODvalue.

Tính nồng độ: Giá trị ODD mẫu được thay thế bằng phương trình đường cong và nhân với bội số pha loãng.

Ghi chú: Trên đây chỉ để tham khảo, không phải là dữ liệu thực tế, thí nghiệm cần tuân thủ nghiêm ngặt hướng dẫn hoặc tư vấn cho giáo viên kỹ thuật.

　　Thực vật Trehalose-6-Phosphate (T6P) ELISA KitThiên Tân luôn coi kiểm soát chất lượng là cuộc sống của doanh nghiệp, theo đuổi sức cạnh tranh của doanh nghiệp không ngừng nâng cao. Công ty trong hoạt động luôn tuân thủ: tuân thủ luật pháp, nghiêm khắc với bản thân, khoan dung, dám đảm nhận tinh thần doanh nghiệp như một tiêu chuẩn, với chất lượng vượt trội và dịch vụ tuyệt vời để duy trì và mở rộng thị trường, đáp ứng nhu cầu của khách hàng ở mức độ lớn hơn. Cùng thắng lợi với khách hàng, là mục tiêu phát triển của chúng tôi, bản sinh, đối tác tin cậy của ngài! Bộ dụng cụ Bunsen