Peptide giống glucagon của con người 1 (GLP-1) ELISA Kit

　　Peptide giống glucagon của con người 1 (GLP-1) ELISA KitHướng dẫn sử dụng

BS-0203-A Peptide giống glucagon của con người 1 (GLP-1) ELISA Kit 96T

BS-0203-B Peptide giống glucagon của con người 1 (GLP-1) ELISA Kit 48T

I. Nguyên tắc thí nghiệm

Bộ dụng cụ này sử dụng phương pháp kẹp kháng thể kép để phát hiện nồng độ GLP-1 trong huyết thanh người, huyết tương hoặc nuôi cấy tế bào. Các bước cốt lõi của nó bao gồm:

Gói kháng thể pha rắn được bao bọc bởi: Tấm micropore pre-packed kháng thể đơn dòng kháng GLP-1.

Liên kết kháng nguyên-kháng thể: GLP-1 trong mẫu liên kết với kháng thể pha rắn và kết hợp với phức hợp diantiforming được đánh dấu bởi peroxidase horseradish (HRP).

Phản ứng tạo màu: Thêm chất nền TMB tạo màu, độ hấp thụ được xác định ở bước sóng 450nm sau khi kết thúc axit, nồng độ tỷ lệ thuận với độ sâu tạo màu.

II. Thành phần bộ dụng cụ

Thông số kỹ thuật thành phần Ghi chú

Tấm micropore 12 lỗ × 8 thanh chứa kháng thể GLP-1

Sản phẩm tiêu chuẩn 0,5ml/chai bột đông khô, cần tái hòa tan

HRP đánh dấu hai kháng 6ml bảo quản tránh ánh sáng

Chất nền kết xuất màu (TMB) Chất lỏng A 6ml+Chất lỏng B 6ml Sử dụng hiện tại

Chấm dứt chất lỏng 6ml axit sulfuric 2M

Dung dịch rửa đậm đặc 20ml cần pha loãng 1:20

Mẫu xishi lỏng 6ml với chất ổn định

Lưu ý: Các thành phần thương hiệu khác nhau có thể có sự khác biệt, xem hướng dẫn cụ thể.

III. Xử lý mẫu

1. Loại mẫu

Huyết thanh/huyết tương: EDTA hoặc heparin chống đông máu, lấy sạch ly tâm.

Làm sạch tế bào: 1000 × g ly tâm trong 20 phút để loại bỏ tạp chất.

Mô cân bằng: Ly tâm được làm sạch sau khi tách.

2. Điều kiện bảo quản

Ngắn hạn ‌ Bảo quản ≤ 48 giờ ở 2-8 ℃.

Dài hạn: đông lạnh -20 ℃ hoặc -80 ℃ sau khi tách, tránh đông lạnh và tan chảy lặp đi lặp lại.

3. Đề xuất pha loãng

Mẫu thông thường ‌: Pha loãng đề nghị 5-20 lần (ví dụ: lấy mẫu 20 μL+180 μL pha loãng).

Mẫu nồng độ cao‌: Cần phải thử nghiệm trước để xác định bội số pha loãng, pha loãng tối đa 100.000 lần (phương pháp pha loãng ba bước).

IV. Các bước hoạt động

Sản phẩm tiêu chuẩn ‌

Tiêu chuẩn đông khô thêm 1 ml dung dịch pha loãng hòa tan, trộn đều rồi để yên 10 phút.

Pha loãng hàng loạt (ví dụ: 8pmol/L → 4pmol/L →... → 0,5pmol/L).

Thêm mẫu ‌

Lỗ tiêu chuẩn: 50μL/lỗ.

Lỗ mẫu: Đầu tiên pha loãng 40 μL, sau đó là mẫu 10 μL (tổng pha loãng 5 lần).

Lỗ trắng: Không thêm mẫu và kháng hai.

ấp ‌

Ủ ở 37 độ C 120 phút, rửa 3 lần (mỗi lần ngâm 1 phút).

Kết xuất và kết thúc ‌

Mỗi lỗ có dung dịch kết xuất màu TMB 100 μL, ủ tránh ánh sáng 37 ° C trong 15 phút.

Thêm dung dịch chấm dứt 50μL phản ứng chấm dứt, đo giá trị OD trong vòng 30 phút.

V. Chú ý

Tránh lấy mẫu: tan máu, mẫu chất béo cao và các mẫu có chứa NaN3 (ức chế hoạt động HRP).

Cân bằng thuốc thử: Sử dụng cân bằng nhiệt độ buồng trước trong 20 phút, chất tẩy rửa cô đặc cần tắm nước 40 ℃ để hòa tan kết tinh.

Kiểm soát chất lượng‌: đề nghị thiết lập các lỗ lặp, đường cong tiêu chuẩn R² nên ≥ 0,95.

VI. Phân tích kết quả

Standard Curve: Vẽ phương trình bốn tham số theo nồng độ ODvalue.

Tính nồng độ: Giá trị ODD mẫu được thay thế bằng phương trình đường cong và nhân với bội số pha loãng.

Ghi chú: Trên đây chỉ để tham khảo, không phải là dữ liệu thực tế, thí nghiệm cần tuân thủ nghiêm ngặt hướng dẫn hoặc tư vấn cho giáo viên kỹ thuật.

　　Peptide giống glucagon của con người 1 (GLP-1) ELISA KitThiên Tân luôn coi kiểm soát chất lượng là cuộc sống của doanh nghiệp, theo đuổi sức cạnh tranh của doanh nghiệp không ngừng nâng cao. Công ty trong hoạt động luôn tuân thủ: tuân thủ luật pháp, nghiêm khắc với bản thân, khoan dung, dám đảm nhận tinh thần doanh nghiệp như một tiêu chuẩn, với chất lượng vượt trội và dịch vụ tuyệt vời để duy trì và mở rộng thị trường, đáp ứng nhu cầu của khách hàng ở mức độ lớn hơn. Cùng thắng lợi với khách hàng, là mục tiêu phát triển của chúng tôi, bản sinh, đối tác tin cậy của ngài! Bộ dụng cụ Bunsen