Nhuộm đa miễn dịch

Có thể đàm phánCập nhật vào05/06

Mô hình

Thiên nhiên của nhà sản xuất: Nhà sản xuất

Danh mục sản phẩm

Nơi xuất xứ

Tư vấn trực tuyến

Tổng quan

Nguyên tắc nhuộm đa miễn dịch: sử dụng nguyên tắc liên kết kháng nguyên đặc hiệu với kháng thể để làm cho kháng nguyên liên kết với kháng nguyên mục tiêu trong mô hoặc tế bào; Thêm vào dikháng đánh dấu HRP, nó có thể liên kết với một kháng đặc hiệu, tạo thành phức hợp "kháng nguyên - kháng nguyên - kháng - kháng HRP đánh dấu dikháng", thêm thuốc nhuộm huỳnh quang tyramine, với sự hiện diện của HRP và * tyramine được kích hoạt và liên kết cộng hóa trị với dư lượng protein gần kháng nguyên, một lượng lớn huỳnh quang lắng đọng trong phần liên kết kháng nguyên-kháng thể, làm cho tín hiệu được khuếch đại, bằng cách lặp lại nhiều bước trên, mỗi lần sử dụng một kháng nguyên khác nhau và thuốc nhuộm huỳnh quang tyramine tương ứng, có thể đạt được nhiều mục tiêu

Chi tiết sản phẩm

Nhuộm đa miễn dịchCác bước thử nghiệm

Chuẩn bị mẫu: bao gồm việc xử lý các lát sáp parafin, lát đông lạnh hoặc chip tế bào, v.v., chẳng hạn như cố định, sửa chữa kháng nguyên, ngăn chặn peroxidase nội sinh, v.v.

Một kháng ấp trứng: Thêm kháng thể pha loãng với dịch pha loãng kháng thể, ấp trong hộp tránh ánh sáng một thời gian nhất định.

Nhị kháng ấp trứng: Sau khi rửa thêm vào nhị kháng HRP đánh dấu với một giống kháng tương ứng, tránh ánh sáng nhiệt độ phòng ấp trứng.

Thuốc nhuộm huỳnh quang TSA: thuốc nhuộm huỳnh quang tyramine nhỏ giọt, được rửa sạch sau một thời gian phản ứng nhiệt độ phòng.

Tẩy tế bào kháng thể: Các phương pháp như sửa chữa nhiệt hoặc tẩy tế bào kháng thể được sử dụng để tẩy tế bào kháng thể của vòng trước cho vòng đánh dấu tiếp theo.

Lặp lại đánh dấu: Lặp lại các bước trên, sử dụng các loại thuốc nhuộm monokháng và huỳnh quang khác nhau để đạt được nhiều đánh dấu.

Tái nhiễm nhân tế bào và niêm phong: tái nhiễm nhân tế bào với các chất nhuộm hạt nhân như DAPI, nhỏ giọt và chống huỳnh quang dập tắt niêm phong viên nén.

Chụp ảnh nội soi: Hình ảnh được quan sát và thu thập dưới các thiết bị như kính hiển vi huỳnh quang.

Nhuộm đa miễn dịchLưu ý

Lựa chọn và tối ưu hóa kháng thể: Chọn kháng thể đặc hiệu, đã được chứng minh và tối ưu hóa các điều kiện như nồng độ kháng thể và thời gian ủ.

Vấn đề mặt nạ epitope: chú ý đến thứ tự nhuộm của kháng thể và tránh hiện tượng mặt nạ epitope, có thể được giải quyết bằng cách điều chỉnh thứ tự kháng thể hoặc bằng các phương pháp khác.

Thiết lập kiểm soát thí nghiệm: Thiết lập kiểm soát dương tính và kiểm soát âm tính để đảm bảo độ chính xác và độ tin cậy của kết quả thí nghiệm.

Kiểm soát độ phóng đại tín hiệu: Theo nhu cầu thí nghiệm cụ thể và cường độ tín hiệu huỳnh quang, lựa chọn hợp lý cho dù bổ sung chất tăng cường TSA và các phương tiện khác để kiểm soát độ phóng đại tín hiệu.

Sản phẩm tương tự Khuyến nghị