Bộ xét nghiệm tăng sinh tế bào MTS

Bộ xét nghiệm tăng sinh tế bào MTSMTS Cell Proliferation Assay Kit là một bộ xét nghiệm độc tính và tăng sinh tế bào phổ biến. MTS là một muối tetrazole mới có thể được khử bởi succinate dehydrogenase trong ty thể của tế bào sống thành sản phẩm tan trong nước, methylene (Formazan). Methane được hấp thụ đặc hiệu ở 490 nm, vì vậy nó có thể phản ánh sự gia tăng tế bào bằng cách xác định độ hấp thụ ở 490 nm. Tế bào nhân lên càng nhanh, giá trị hấp thụ càng cao.
So với bộ dụng cụ MTT thông thường, bộ dụng cụ này không cần phải loại bỏ môi trường ban đầu, cũng không cần sử dụng dung môi khác để hòa tan methylene, thuận tiện hơn để sử dụng, đồng thời có thể tránh được lỗi thử nghiệm gây ra bởi việc loại bỏ một phần methylene khi loại bỏ môi trường. Bộ dụng cụ này rất linh hoạt để sử dụng và có thể tiếp tục ủ sau khi thử nghiệm để có kết quả màu tốt hơn. Ngoài ra, bộ dụng cụ này có những ưu điểm như phạm vi tuyến tính rộng, độ nhạy cao và an toàn khi sử dụng.
Thành phần sản phẩm:

Hoạt động thử nghiệm:
1. Chế biến dịch làm việc MTS:
Trộn MTS Solution và PMS Solution theo tỷ lệ 20: 1 là dung dịch làm việc MTS. Dung dịch làm việc MTS được pha chế tốt nếu cần lưu trữ nên được bảo quản tránh ánh sáng ở nhiệt độ -20 độ C, lúc này đề nghị phân phối vừa phải để tránh đông lạnh nhiều lần.
LƯU Ý: Cả MTS Solution và PMS Solution đều dễ bị phân hủy khi nhìn thấy ánh sáng, vì vậy cần phải tránh ánh sáng trong quá trình xây dựng và sử dụng (có thể được bọc trong giấy thiếc). Để sử dụng thường xuyên, bạn muốn giữ bộ dụng cụ này ở 4 ° C, tại thời điểm này bạn nên chuẩn bị dung dịch làm việc MTS mỗi lần trước khi phát hiện. Chất lỏng làm việc MTS được pha chế không sử dụng cần được bảo quản tránh ánh sáng ở -20 ° C.
2. Nuôi dưỡng tế bào:
Các tế bào được cấy vào các thùng chứa thích hợp như tấm lỗ. Đối với các tấm 96 lỗ, môi trường 100uL được khuyến nghị cho mỗi lỗ, trong khi 5-100 × 10 được khuyến nghị cho mỗi lỗ3Một tế bào. Có thể căn cứ vào thiết kế thí nghiệm dùng thuốc quan tâm xử lý tế bào nhóm thí nghiệm một thời gian, lúc này cần thiết lập thêm nhóm trống (chỉ chứa môi trường) và nhóm đối chứng (bao gồm môi trường nuôi cấy, tế bào và dung môi thuốc).
Lưu ý: Số lượng tế bào được tiêm mỗi lỗ cụ thể có thể được điều chỉnh theo loại tế bào cụ thể.
3. Trồng trọt MTS:
20 uL dung dịch làm việc MTS được thêm vào mỗi lỗ và sau đó được đưa vào một tế bào nuôi cấy để ủ trong 1-4 giờ.
Lưu ý: Thời gian ủ MTS có thể được điều chỉnh theo các thí nghiệm cụ thể.
4. Phát hiện:
Độ hấp thụ (A) được xác định bằng máy đo enzyme ở 490 nm. Nếu không có bộ lọc 490 nm, bạn có thể chọn sử dụng bộ lọc 450-540 nm.
5. Phân tích dữ liệu:
Tỷ lệ sống sót của tế bào được tính như sau:
Tỷ lệ sống của tế bào (%)=(A)Nhóm thử nghiệm- ANhóm trống) / (ANhóm kiểm soát- ANhóm trống)] ×100

1, Khi nuôi cấy tế bào trong thời gian dài, lỗ cạnh của tấm 96 lỗ dễ xảy ra vấn đề bay hơi chất lỏng. Đề nghị bỏ qua một vòng tròn xung quanh tấm 96 lỗ, chuyển sang nước vô trùng, môi trường nuôi cấy hoặc PBS; Đồng thời có thể đặt tấm 96 lỗ trong bể nuôi gần nguồn nước.
MTS Solution và PMS Solution sẽ đông cứng ở nhiệt độ thấp, trước khi sử dụng, vui lòng quay lại nhiệt độ phòng hoặc tắm nước 37 ℃ khoảng 10 phút cho đến khi tan chảy hoàn toàn.
MTS Solution và PMS Solution nhạy cảm với ánh sáng, nếu được bảo quản ở 4 ° C, màu sắc của dung dịch có thể thay đổi một chút, sự thay đổi này có thể làm tăng giá trị hấp thụ của đáy, nhưng không ảnh hưởng đến kết quả thí nghiệm cuối cùng.
Nếu không phát hiện kịp thời, phản ứng kết thúc SDS 10% của 25uL có thể được thêm vào mỗi lỗ sau khi kết thúc ủ ở bước 3. Tấm lỗ sau khi xử lý SDS có thể được đặt
Bảo quản tránh ánh sáng trong hộp nuôi dưỡng không quá 18 giờ.
5, Vì sự an toàn và sức khỏe của bạn, vui lòng mặc quần áo thử nghiệm và vận hành găng tay dùng một lần.

Lưu trữ bộ ở -20 ° C cách ánh sáng và độ ẩm, ổn định trong 1 năm. Để sử dụng thường xuyên, bộ có thể được lưu trữ ở 4 ° C cách ánh sáng và độ ẩm, ổn định trong 6 tuần.