CTF-LTM 2D Tế bào huỳnh quang Vitality Test Kit

Có nhiều phương pháp phát hiện sức sống tế bào, chẳng hạn như phát hiện loại trừ thuốc nhuộm, thay đổi nồng độ ATP, thay đổi hoạt động enzyme, v.v. Xét nghiệm tế bào đôi khi đòi hỏi nghiên cứu cơ chế về độc tính tế bào và/hoặc thiết lập kiểm soát nội tham, dẫn đến nhu cầu phân tích nhiều (multiplex), tức là cùng một mẫu được phát hiện bằng nhiều phương pháp phân tích, cơ chế phát hiện khác nhau và không can thiệp lẫn nhau, do đó có thể tiến hành so sánh tương quan, do đó tiết lộ cơ chế độc tính tế bào hoặc loại trừ sự khác biệt hệ thống. Các sản phẩm CellTiter Fluor (CTF) được thiết kế dựa trên nguyên tắc này. Công ty đã tự phát triển và giới thiệu bộ dụng cụ kiểm tra sức sống tế bào huỳnh quang tương tự (Fluorescent Cell Viability Assay Kit), không có sự khác biệt đáng kể về hiệu suất so với các sản phẩm thương hiệu nước ngoài. Sản phẩm này dựa trên sự suy thoái của các sản phẩm chất nền của nhóm polypeptide huỳnh quang bởi protease bên trong tế bào sống, tạo ra tín hiệu huỳnh quang. Khi tính toàn vẹn của màng tế bào bị tổn thương, protease này mất hoạt động phân hủy trên chất nền và không tạo ra tín hiệu huỳnh quang. CTF-LTMKhác với nguyên tắc phát hiện bộ dụng cụ luciferase, phương pháp phát hiện cũng khác nhau, độ nhạy phát hiện của nó thấp hơn so với phương pháp luciferase, nhưng tổn thương tế bào nhỏ có thể được phát hiện sớm hơn, hai xét nghiệm tương thích tốt, có thể được kiểm tra multiplex.
Đặc tính sản phẩm:
1, Hiệu suất
phát hiện tín hiệu, Window， Độ nhạy và đặc hiệu tương tự như các sản phẩm tương tự của các thương hiệu nước ngoài.
2、 相容性
Tương thích với các tác nhân phân tích phổ biến như CTG và không tạo thành ảnh hưởng lẫn nhau.
3, Tính năng
Nhạy cảm hơn với tổn thương màng tế bào sớm.
4, Tiện lợi
"Thêm - trộn nhiệt độ - thử nghiệm", toàn bộ các bước thử nghiệm là đơn giản và dễ dàng để hoạt động.
Thành phần sản phẩm:
Chất nền protease, đệm trộn sau đó được đổ đầy trong chai màu nâu 10 mL hoặc 100 mL và trong ống 2 ml, thông số kỹ thuật như sau:

1. Chuẩn bị tế bào:
(1) Đặt các tế bào được phát hiện với mật độ phù hợp trên các tấm nuôi cấy tế bào 96 hoặc 384 lỗ. Nên sử dụng bảng đen (chẳng hạn như kết hợp với thuốc thử phát sáng, có thể chọn bảng trắng).
(2) Chuẩn bị hợp chất để kiểm tra. Thêm nồng độ thích hợp của các hợp chất được phát hiện vào lỗ tấm tế bào. Nồng độ dung môi hữu cơ trong dung dịch nuôi cấy được duy trì dưới 1-2%. Thiết lập một nhóm kiểm soát không có hợp chất. Tiếp tục phát triển thời gian phù hợp với nhu cầu của dự án.
2. Kiểm tra sức sống tế bào:
(1) Loại bỏ CTF-LTMTác nhân phát hiện sức sống tế bào, bộ đệm CTF wan được cân bằng đến nhiệt độ phòng sau khi hòa tan hoàn toàn. Dao động xoáy cơ chất CTF trộn đều đáy của nó và ly tâm tức thời thu thập cơ chất CTF xuống đáy ống.
(2) Xây dựng chất lỏng phản ứng CTF: Chất nền CTF là 100x, theo liều lượng được sử dụng với chất đệm CTF được kết hợp với chất lỏng phản ứng 1x, trộn đều.
(3) Lấy bảng nuôi cấy tế bào được kiểm tra và thêm vào mỗi lỗ dung dịch phản ứng CTF bằng nhau, chẳng hạn như 100 μl dung dịch nuôi cấy thêm 100 μl 1x dung dịch phản ứng CTF.
(4) Tốc độ thấp rung tấm 20 giây trộn đều, tránh ánh sáng 37 ℃ phản ứng sau 60 phút để phát hiện huỳnh quang. Tốc độ cắt chất nền CTF của các tế bào khác nhau là khác nhau và thời gian đọc tốt nhất cần được tối ưu hóa theo tế bào. Bảng đọc có thể được thực hiện nhanh nhất 30 phút sau khi thêm thuốc thử. Thông thường, bảng đọc có tỷ lệ tín hiệu tiếng ồn cao hơn sau 60 phút hoặc lâu hơn. Thời gian đọc sách tối đa không quá 3 giờ.
(5) Đọc tín hiệu huỳnh quang trên đầu đọc huỳnh quang, kích thích ánh sáng Ex 380-400nm, phát ra ánh sáng Em 505nm.
(6) Tiếp tục với nhiều phân tích hạ lưu, chẳng hạn như phát hiện apoptosis của Caspases 3/7, khi cần thiết.

1. Sau khi sử dụng lần đầu tiên, đề nghị phân loại chất nền - 20 độ C để bảo quản, mỗi lần pha chế chất lỏng phản ứng tươi.
2. Không trải qua nghiệm chứng nghiêm ngặt, không đề nghị tùy ý thay đổi lượng thuốc thử phản ứng.

- Bảo quản tránh ánh sáng ở 20 ℃ trở xuống, có hiệu lực trong 12 tháng.