Tế bào gốc tủy người

Thuộc tính sản phẩm:

Nguồn mô: endodontic tissue

Thông số kỹ thuật sản phẩm: Chai nuôi cấy tế bào 5 × 105cells/T25

Giới thiệu tế bào:

Tế bào gốc tủy ngườiTách mô tự hoạt dịch; Mô endodontic nằm trong khoang endodontic bên trong răng. Ngoại hình của khoang tủy răng đại khái tương tự như hình thái của thân răng, khoang tủy răng lớn hơn, gọi là khoang tủy, khoang tủy răng nhỏ hơn, gọi là ống rễ, đầu rễ có lỗ nhỏ, gọi là lỗ nhọn. Mô nội nha chủ yếu chứa thần kinh, mạch máu, bạch huyết và mô liên kết, còn có tế bào tạo răng sắp xếp ở ngoại vi tủy răng, tác dụng của nó là tạo răng. Tủy răng do tác dụng khác nhau của các chất kích thích nguyên nhân gây bệnh và sự khác biệt về sức đề kháng của cơ thể, xuất hiện những thay đổi bệnh lý khác nhau, trong lâm sàng sẽ biểu hiện như một loạt các triệu chứng và dấu hiệu khác nhau. Sau một thời gian dài của tình trạng tắc nghẽn nội nha, nó chuyển thành viêm nội nha cấp tính. Tế bào gốc trung mô (MSC) có nguồn gốc từ mô trung phôi thời kỳ phôi thai, có tiềm năng tự sao chép và phân hóa đa hướng rất mạnh, có khả năng phân hóa định hướng tới nhiều loại tế bào cuối như tế bào mỡ, nguyên bào xương, sụn và tế bào cơ, ứng dụng MSC để sửa chữa tổn thương sụn có triển vọng ứng dụng rất tốt, hiện đã có thể tách và chuẩn bị tế bào gốc trung mô từ tủy xương, mỡ, hoạt mạc, xương, cơ bắp và các mô khác cũng như nước ối, cuống rốn, máu cuống rốn.

Giới thiệu phương pháp:

Phòng thí nghiệm của công ty được phân lập bằng cách sử dụng phương pháp tiêu hóa collagen, nhân bản pha loãng mật độ thấp, tổng lượng tế bào khoảng 5 × 10. Cells/chai

Kiểm tra chất lượng:

Phòng thí nghiệm của công ty đã được xác định bằng huỳnh quang miễn dịch CD90, độ tinh khiết có thể đạt hơn 90% và không chứa HIV-1, HBV, HCV, Mycoplasma, vi khuẩn, nấm men và nấm.

Thông tin nuôi dưỡng:

Môi trường: với FBS, phụ gia tăng trưởng, Penicillin, Streptomycin, vv

Tần số thay đổi chất lỏng: thay đổi chất lỏng mỗi 2-3 ngày

Đặc tính tăng trưởng: Dán tường

Hình thái tế bào: Nguyên bào sợi

Đặc tính truyền: Có thể truyền khoảng 3-5 thế hệ

Dịch tiêu hóa: 0,25%

Điều kiện nuôi: pha khí: không khí, 95%; CO2，5%

Phương pháp bảo quản tế bào đông lạnh?

Phương pháp bảo quản lạnh I: ống đông lạnh được đặt ở 4 ℃ 30~60 phút → (-20 ℃ 30 phút *) → -80 ℃ 16~18 giờ (hoặc qua đêm) → bể nitơ lỏng vaporphase lưu trữ lâu dài.

Phương pháp bảo quản lạnh 2: ống đông lạnh được đặt trong máy làm mát có thể lập trình của chương trình đã thiết lập mỗi phút giảm 1-3 ℃ xuống dưới -80 ℃, sau đó đặt vào bể chứa nitơ lỏng vapor phase để lưu trữ lâu dài. Nhiệt độ -20 độ C không được vượt quá 1 giờ để ngăn chặn tinh thể băng quá lớn, khiến tế bào chết đi rất nhiều, cũng có thể bỏ qua bước này trực tiếp bỏ vào tủ lạnh -80 độ C, tỷ lệ sống sót giảm đi một chút.

Hoạt động nuôi cấy:

1) Tế bào hồi sức: Các ống lưu trữ đông lạnh có chứa đình chỉ tế bào 1mL sẽ nhanh chóng lắc và tan băng trong bồn tắm nước 37 ℃, thêm vào môi trường 4mL để trộn đều. Ly tâm trong 4 phút trong điều kiện 1000 vòng/phút, bỏ đi chất lỏng trong, bổ sung 1 - 2 ml môi trường rồi thổi đều. Sau đó, tất cả đình chỉ tế bào sau đó được thêm vào chai nuôi cấy qua đêm (hoặc đình chỉ tế bào được thêm vào đĩa 10cm với khoảng 8ml môi trường nuôi cấy qua đêm). Thay dịch vào ngày hôm sau và kiểm tra mật độ tế bào.

2) Di truyền tế bào: Nếu mật độ tế bào đạt 80% -90%, nuôi cấy di truyền có thể được thực hiện.

1. Bỏ đi nuôi cấy, rửa sạch tế bào bằng PBS không chứa canxi, ion magiê 1 - 2 lần.

2. Thêm 1 ml dung dịch tiêu hóa (0,25% Trypsin-0,53 mM EDTA) trong chai nuôi cấy, đặt trong hộp nuôi cấy 37 ℃ tiêu hóa trong 1-2 phút, sau đó quan sát sự tiêu hóa của tế bào dưới kính hiển vi, nếu hầu hết các tế bào tròn và rơi ra, nhanh chóng lấy lại bàn điều hành, sau vài lần nhấp vào chai nuôi cấy thêm một lượng nhỏ môi trường để chấm dứt tiêu hóa.

3. Nhấn 6 - 8 ml/lọ bổ sung môi trường nuôi cấy, nhẹ nhàng đánh đều rồi hút ra, ly tâm trong điều kiện 1000 vòng/phút, bỏ đi chất lỏng trong, bổ sung 1 - 2 ml dung dịch nuôi cấy rồi thổi đều.
4. Chia dịch đình chỉ tế bào theo tỷ lệ 1: 2 vào đĩa hoặc chai mới có chứa môi trường 8 ml.

3) Đóng băng tế bào: Khi tế bào phát triển tốt, có thể đóng băng tế bào. Dưới đây là 25 chai.

Khi tế bào đông lạnh, sau khi loại bỏ môi trường, sau khi rửa PBS một lần, thêm 1ml, sau khi tế bào tròn và bong ra, thêm 1ml môi trường chứa huyết thanh để chấm dứt tiêu hóa, có thể sử dụng bảng đếm tế bào máu.

2. 4min 1000rpm ly tâm loại bỏ làm sạch trên. Thêm 1ml huyết thanh treo lại tế bào, theo số lượng tế bào thêm huyết thanh và DMSO, trộn đều nhẹ nhàng, nồng độ DMSO cuối cùng là 10%, mật độ tế bào không thấp hơn 1x106/ml, mỗi ống lưu trữ đông lạnh lưu trữ 1ml huyền dịch tế bào, chú ý đến ống lưu trữ đông lạnh để đánh dấu tốt.

3. Đặt ống lưu trữ đông lạnh vào hộp làm mát chương trình, đặt vào tủ lạnh -80 độ, sau 2 giờ chuyển sang lưu trữ nitơ lỏng. Ghi lại vị trí ống lưu trữ đông lạnh để lấy lần sau.

Báo cáo thí nghiệm:

Sản phẩm chỉ dùng cho nghiên cứu khoa học:

Một, tách ra và bồi dưỡng:

Trong điều kiện vô trùng, mô tâm nhĩ chuột SD 1-3d tuổi được lấy ra, sau đó khối mô này được làm sạch 2 lần bằng PBS, sau đó sẽ có kích thước khoảng 1 mm 3;

2, thêm 4mL enzyme tiêu hóa chất lỏng (0,1% và 0,1% loại I collagen) vào khối mô, treo 10 giây, đặt trong điều kiện 37 ℃ để tiêu hóa 10 phút, sau đó thổi bằng ống nhỏ giọt để làm đình chỉ tế bào đơn, kết tủa tự nhiên và thu thập thanh lọc, với môi trường 10 ℃ để chấm dứt tiêu hóa sau khi đặt 4 ℃;;

3, các mô còn lại được thêm vào 3~4mL enzyme tiêu hóa dịch, treo trong 10 giây, sau khi đặt 37 ℃ tiêu hóa trong 10 phút, theo các phương pháp trên thu thập thanh lọc và chấm dứt tiêu hóa sau khi đặt 4 ℃, lặp lại bước này 2-3 lần, cho đến khi mô được tiêu hóa;

4, lọc chất lỏng tiêu hóa tế bào bằng lưới thép không gỉ 200 lưới, ly tâm 1200r/phút 10 phút, loại bỏ và làm sạch, các tế bào kết tủa được sử dụng với 10% FBS DMEM/F12 phương tiện truyền thông đình chỉ, tiêm trong 25cm2 chai, đặt ở 37 ℃, 5% CO2 nuôi cấy;

5. Sau khi dán tường chênh lệch 1 giờ, hút ra môi trường nuôi cấy, theo thí nghiệm cần tiêm vào 6 lỗ để tiếp tục nuôi cấy.
Giám định huỳnh quang miễn dịch:
Khi tế bào cơ nhĩ phát triển đến 80% dung hợp, loại bỏ môi trường, rửa sạch tế bào bằng PBS ấm 2 lần, mỗi lần 10 phút, sau đó cố định tế bào bằng 4% paraformaldehyde ở nhiệt độ phòng trong 15 phút;

2, PBS rửa tế bào 2 lần, mỗi lần 10 phút, sau đó ở 4 ℃, với 0,1% Triton X-100 xuyên qua màng 15 phút;

3, PBS rửa tế bào 2 lần, mỗi lần 10 phút, sau đó ở nhiệt độ phòng, đóng tế bào với 4% BSA trong 30 phút;

Pha loãng alpha-actin theo tỷ lệ 1: 100, sau đó đặt nó trong tủ lạnh 4 ° C để ủ tế bào qua đêm;

5, PBS tuôn ra các tế bào 3 lần, mỗi lần 10 phút, pha loãng kháng thuốc kháng alpha-actin theo tỷ lệ 1: 150, đặt ở 37 ℃ trong 1 giờ;

Rửa bằng PBS 3 lần, mỗi lần 10 phút, sau đó xem hình ảnh dưới kính hiển vi huỳnh quang ngược và chụp ảnh.
Kháng thể Angiotensin II

Kháng thể Angiotensin II Receptor 1

Kháng thể angiogenin-1

Kháng thể angiogenin-like protein 2

Con người CC Chemogen Receptor 5 (CCR5) Elisa xét nghiệm Kit miễn phí thế hệ

Người CC Chemogen Receptor 2 (CCR2) Elisa xét nghiệm Kit

Con người CC Chemogen Receptor 1 (CCR1) Elisa xét nghiệm Kit

Con người CC chemokine 7 (CCL7/MCP3/SCYA6/SCYA7) elisa xét nghiệm kit

Con người CC chemokine 5 (CCL5/D17S136E/SCYA5) Elisa thử nghiệm Kit miễn phí

Chuột trắng Interleukin 17A (IL-17A) Elisa xét nghiệm Kit

Chuột trắng Interleukin 17B (IL17B) Elisa xét nghiệm Kit

Chuột trắng Interleukin 17C (IL17C) Elisa xét nghiệm Kit

Chuột trắng Interleukin 17F (IL17F) Elisa xét nghiệm Kit