E14 Môi trường đặc biệt cho tế bào

Hoạt động vô trùng:Nuôi cấy tế bào cần được thực hiện trong môi trường vô trùng, trước khi sử dụng cần phải khử trùng bằng tia cực tím của bàn làm việc siêu sạch, làm sạch bình nuôi cấy thường xuyên. Nhân viên thí nghiệm cần thay quần áo làm việc, bao giày, đeo khẩu trang, găng tay.

Thiết bị khử trùng:Dụng cụ thủy tinh, dụng cụ kim loại và như vậy có thể được khử trùng bằng hơi nước áp suất cao, các sản phẩm nhựa thì nhiều lựa chọn để khử trùng ethylene oxide hoặc mua các sản phẩm đã khử trùng.

Lựa chọn thuốc thử:Các tác nhân như nuôi cấy, huyết thanh, đệm được sử dụng phải vô trùng, không bị ô nhiễm và cần được kiểm tra vô trùng trước khi sử dụng. Các tế bào khác nhau có yêu cầu khác nhau về thành phần nuôi cấy, nên chọn loại nuôi cấy thích hợp theo loại tế bào.

Điều kiện nuôi dưỡng:Hầu hết các tế bào động vật có vú thích hợp để nuôi cấy ở nhiệt độ 37 ℃, độ lệch nên được kiểm soát ở ± 0,5 ℃. Môi trường nuôi cấy phải được niêm phong tốt, thường xuyên kiểm tra nồng độ và lưu lượng khí, nuôi cấy tế bào thường cần 5% CO2 để duy trì độ pH ổn định. Độ ẩm trong hộp nuôi cấy nên được duy trì ở mức khoảng 95%.

‌Quan sát hàng ngày:Hình thái tế bào, trạng thái tăng trưởng và sự thay đổi màu sắc của chất lỏng nuôi cấy được quan sát dưới kính hiển vi hàng ngày.

Kiểm tra thường xuyên:Các tế bào thường xuyên được kiểm tra ô nhiễm như mycoplasma, vi khuẩn, nấm.

E14Môi trường đặc biệt cho tế bào

Giới thiệu sản phẩm

E14Môi trường tế bào được tạo ra bởiĐội ngũ được tối ưu hóa cẩn thận và sau khi thử nghiệm lâu dài, sản phẩm này có thể duy trìTình trạng tăng trưởng tuyệt vời của tế bào E14.

Đã bao gồm trong sản phẩm này Các thành phần khác nhau cần thiết cho sự phát triển của tế bào E14 mà không cần thêm bất kỳ thành phần nào có thể được sử dụng trực tiếp trong nuôi cấy tế bào E14.

Thành phần chính của sản phẩm

Môi trường cơ bản DMEM 405mL

Huyết thanh bò thai đặc biệt 75 mL

Vận chuyển và bảo quản

Giao thông vận tải: vận chuyển nhiệt độ thấp được đặt trong hộp cách nhiệt có chứa túi nước đá sinh học

Phương pháp bảo quản: 2 ℃~8 ℃, tránh ánh sáng, bảo quản 2 tháng; ׏

Chú ý chỉ dùng cho nghiên cứu khoa học.

Một số thành phần của hệ thống nuôi cấy là các chất có hại cho sức khỏe con người, vui lòng không tiếp xúc với da tiếp xúc với chất lỏng của hệ thống nuôi cấy và bên trong thùng chứa với dư lượng chất lỏng của hệ thống nuôi cấy; Phần này của các chất có hại có nồng độ và tính nguy hiểm thấp, nếu tiếp xúc, rửa sạch bằng nước máy ngay lập tức.

Phục hồi

1) Làm nóng nước trong nồi tắm nước nhiệt độ không đổi đến 37 ℃;

2) Chuẩn bị một ống ly tâm 15ml, thêm 5ml môi trường với 10% FBS và đặt vào nồi nước 37 ℃ để làm nóng trước;

3) Đeo kính bảo hộ, sau khi găng tay len dày, loại bỏ các tế bào để hồi sức từ bể nitơ lỏng và chuyển vào nồi nước nhiệt độ không đổi 37 ℃ càng sớm càng tốt

Nhiệt độ phục hồi lắc ống lưu trữ đông để tăng tốc độ phục hồi;

4) Các tế bào tan chảy trong ống lưu trữ đông lạnh được hít vào ống ly tâm đã chuẩn bị trước, sau khi trộn đều, ly tâm 1000 vòng/phút;

5) Chuẩn bị một chai T-25, viết tên tế bào, ngày tháng và thêm 4 ml môi trường;

6) Sau khi ly tâm hoàn thành bỏ đi thanh lọc, sau khi treo lại tế bào với 1 ml môi trường, chuyển sang nuôi cấy tế bào T-25, trộn đều và chuyển sang nuôi cấy tế bào T-25

Nuôi cấy trong một môi trường nuôi cấy CO2.

Di truyền (Đề xuất di truyền tế bào 1-2)

1) Di truyền có thể xảy ra khi sự hội tụ tế bào đạt trên 85%.

2) Bên trong tủ an toàn sinh học, mở miệng chai nuôi cấy và thu thập môi trường bên trong chai;

3) Sau khi thêm 3ml vô trùng 1 × PBS vào chai, đặt chai theo chiều ngang để PBS có thể thấm vào tất cả các khu vực trên bề mặt đáy chai và hút PBS;

4) Thêm dung dịch tiêu hóa 1ml vào chai, sau khi thấm vào bề mặt đáy, cho vào hộp nuôi cấy CO2 37 ℃ để ủ 1~2 phút;

5) Sau khi ủ hoàn thành dưới kính hiển vi đảo ngược để quan sát xem các tế bào có tròn lên hay không, nếu tiêu hóa tất cả, thêm 2ml trực tiếp vào môi trường nuôi cấy với 10% FBS, hít huyền dịch vào ống ly tâm 15ml;

① Chuẩn bị ống ly tâm 15ml vô trùng, thêm 2ml môi trường chứa 10% FBS;

b) Hít các tế bào đã tiêu hóa vào trong ống ly tâm (tránh thổi); Thêm 1 ml vào bình nuôi cấy đã tiêu hóa trước đó, tiếp tục tiêu hóa khoảng 2 phút, vỗ nhẹ bình nuôi cấy, khoảng 95% tế bào thoát.

6) 5 phút ly tâm 1000rpm;

7) Chuẩn bị hai chai T-25 mới, mỗi chai thêm 4 ml.

8) Sau khi ly tâm hoàn thành, loại bỏ thanh lọc, treo lại các tế bào ly tâm với môi trường 2ml, chuyển các tế bào treo lại vào 2 chai nuôi cấy T-25, mỗi chai 1ml;

(9) Đặt bình nuôi cấy theo chiều ngang, sau khi trộn đều chấn động, đặt bình nuôi cấy ở 37 độ C, 5% bình nuôi cấy CO2.

Lưu trữ đông lạnh (lưu trữ đông lạnh tế bào đề nghị mỗi chai T25 đóng băng một điếu)

1)~6) Tham khảo các bước truyền

7) Sau khi hoàn thành ly tâm, bỏ qua việc làm sạch, lắng đọng lại tế bào với dung dịch đông lạnh 1mL, sau đó chuyển vào ống đông lạnh 1,8ml;

8) Chuyển ống lưu trữ đông vào hộp làm mát thủ tục đầy cồn isopropyl, sau đó chuyển vào tủ lạnh -80 ℃ để làm mát qua đêm;

9) Ngày hôm sau, lấy ống lưu trữ đông lạnh trong hộp làm mát thứ tự hoàn thành làm mát và chuyển vào bể nitơ lỏng càng sớm càng tốt để bảo quản.

Protein điều hòa huyết khối ở lợn(TM) ELISABộ dụng cụ

Bộ ELISA myosin con người (Myosin)Myosin ở người(Myosin)Bộ dụng cụ

Thỏ prothrombinfragme1 + 2, F1 + 2ELISAKitLời bài hát: Rabbit OriginalF1+2(F1+2)Kit phụ kiện

CLIAKitforAi-TMKháng thể vi thể tuyến giáp(TM)Kháng thể)

血小板因子4 (Tín tử huyết cầu IV)Bộ dụng cụ định lượng huỳnh quang hoạt tính20lần

phân tử bám dính tế bào lợn 2, ICAM-2ELISAKitPhân tử dính giữa các tế bào lợn2 (ICAM-2 / CD102)Bộ dụng cụ

Chuột glutamine synthase(GLUL)Kit, tên tiếng Anh:Bộ dụng cụ GLUL ELISA

Bộ ELISA ierleukin thỏ 8 (IL-8 / CXCL8)Thỏ trắng Medium8 (IL-8 / CXCL8)Bộ dụng cụ

Vi khuẩn E. coli(O157:H7)Bộ dụng cụ axit nucleic(PCR-Phương pháp thăm dò huỳnh quang) 48T

CLIAKitforMIP-1Beta / CCL4 ((Nhân vật MacrophageViêm Protein-1Beta) ELISAkitProtein đại thực bào của con người1β

Virus dịch cơ thể KosakiB (Coxsackievirus B)Định lượngPCRBộ khuếch đại20lần

5 đêm ở ElizabethChó5Name

apolipoprotein lợnB（Apo-B) Bộ dụng cụ lắp ráp/Nguyên bản

apolipoprotein lợnA1 (apo-A1)Kit hội/Nguyên bản

mạc đường ruột muqueuses digestives (PROG) Bộ dụng cụ lắp ráp/Nguyên bản

mạc đường ruột muqueuses digestives (P) Bộ dụng cụ lắp ráp/Nguyên bản

5-Thụ thể Inositol Triphosphate1Kháng thể

Chu kỳ tốD2Kháng thể

Số IL1R2Chuột tái cấu trúcIL1R2 / IL1RB / CD121blòng trắng trứng(Hắnnhãn(Protein)

GRP94 (gp96 0.5mgGRP94 (gp96) 94kDaProtein điều hòa đường(Kháng nguyên)

ANP32ANgười tổ chức lạiANP32A / PHAP1lòng trắng trứng(Ngài & GST)nhãn(Protein)

BLOC1S2 Protein con ngườiNgười tổ chức lạiBLOC1S2 / BLOS2lòng trắng trứng(GST)nhãn)

Chú Protein PGLYRP1Chuột tái tổ hợpPGLYRP1 / PGRP-Slòng trắng trứng(Hắntừ

E14Môi trường đặc biệt cho tế bàoGRP94 (gp96 0.5mgGRP94 (gp96) 94kDaProtein điều hòa đường(Kháng nguyên)

BLOC1S2 Protein con ngườiNgười tổ chức lạiBLOC1S2 / BLOS2lòng trắng trứng(GST)nhãn)

Số IL1R2Chuột tái cấu trúcIL1R2 / IL1RB / CD121blòng trắng trứng(Hắnnhãn(Protein)

Chú Protein PGLYRP1Chuột tái tổ hợpPGLYRP1 / PGRP-Slòng trắng trứng(Hắnnhãn)

ANP32ANgười tổ chức lạiANP32A / PHAP1lòng trắng trứng(Ngài & GST)nhãn(Protein)