Tế bào cảm nhận DH5A

Tế bào cảm nhận DH5A

Tên sản phẩm: DH5a Chemical Competent Cell

Mã sản phẩm: G6016

Điều kiện bảo quản: -80 ° C

Số hàng, số lượng, quy cách: G6016-20 (20 chiếc 100u1), G6016-100 (100 chiếc 100u1)

pUC19 (vector điều khiển) 10pg / μ 1; 10μ 1

Kiểu gen

F-φ80 lac Z△M15△(lacZYA-arg F) U169 endAl recAl

hsdR17 (rk-, mk+) supE44 λ- thi -1 gyrA96 relAl phoA

Hướng dẫn vận hành |

1. CLBioTế bào cảm nhận DH5AĐặt băng tan chảy (hoặc đặt trong lòng bàn tay hoặc nhiệt độ phòng trong một khoảnh khắc, nhanh chóng đưa vào băng khi nấm ở trạng thái hỗn hợp nước đá), thêm DNA mục tiêu (plasmid hoặc sản phẩm kết nối) và đánh bằng tay.Đáy ống EP nhẹ nhàng trộn đều, để trên băng 25 phút.

2.42 ° C tắm nước nóng trong 45 giây, nhanh chóng đặt trở lại trên băng và để yên trong 2 phút, lắc lư sẽ làm giảm hiệu quả chuyển đổi.

3. Sau khi trộn 700 μ1 môi trường vô trùng không có kháng sinh (2YT hoặc LB) vào ống ly tâm, 37 ° C, phục hồi 200 vòng/phút trong 60 phút.

4. 5000rpm ly tâm trong một phút để thu hồi vi khuẩn, để lại 100μ1 hoặc hơn rõ ràng nhẹ nhàng thổi khối treo nặng và phủ lên môi trường 2YT hoặc LB có chứa kháng sinh tương ứng.

5. Đặt tấm ngược lên tủ nuôi cấy 37 ° C qua đêm. Nếu các hoạt động sàng lọc đốm xanh-trắng được thực hiện, tấm phẳng được đặt ở 37 ° C và nuôi trong ít nhất 17 giờ.

Lưu ý

1. tế bào cảm thụ CLBiođề nghịTan chảy trên băng. Để trên băng khoảng 5 phút là tan chảy, sau khi tan chảy trong vòng 8 phút sẽ thêm plasmid, nếu không sẽ ảnh hưởng đến hiệu quả chuyển đổi.

2. Nó nên được vận hành nhẹ nhàng khi trộn các hạt hoặc các sản phẩm kết nối.

3. Chuyển đổi nồng độ plasmid cao hoặc các sản phẩm kết nối hiệu quả cao có thể làm giảm lượng vi khuẩn cuối cùng được sử dụng cho tấm phủ tương ứng.