NCI-H69 Nhận dạng STR tế bào ung thư phổi tế bào nhỏ ở người

NCI-H69 Nhận dạng STR tế bào ung thư phổi tế bào nhỏ ở người

Giới thiệu Cell

Dòng tế bào này có nguồn gốc từ việc thành lập mô phổi của một người đàn ông da trắng 55 tuổi, các tế bào không nguyên vẹn sẽ hình thành các tập hợp trong thạch mềm và giữ lại hình thái ung thư tế bào nhỏ và siêu cấu trúc cũng như đặc điểm tế bào APU. Các tế bào phát triển với nhau, do đó số lượng tế bào không chính xác. Các tế bào dương tính với keratin tế bào. Gen N-myc được khuếch đại và biểu hiện mRNA và protein. Nồng độ biểu hiện mRNA C-myc thấp hơn so với protein.

Các biểu hiện của c-myb, v-fes, v-fms, c-raf 1, Ha-ras, Ki-ras và N-ras mRNA tồn tại. Các tế bào dễ dàng hình thành các khối u với các đặc điểm mô học điển hình của ung thư tế bào nhỏ ở chuột trần. Các thuộc địa được hình thành trong thạch mềm.

Đặc tính tế bào

1) Nguồn: Phổi của nam giới da trắng 55 tuổi

2) Hình thái: Tăng trưởng lơ lửng tập thể đa bào

3) Nội dung:>Số lượng tế bào 1x106

4) Thông số kỹ thuật: chai T25 hoặc gói lưu trữ đông lạnh 1mL

5) Ứng dụng: Chỉ sử dụng cho nghiên cứu khoa học.

Vận chuyển và bảo quản

Băng khô vận chuyển và phục hồi tế bào sống tốt

(1) 1mL đông lưu trữ đóng gói băng khô vận chuyển, sau khi nhận được -80 độ tủ lạnh lưu trữ qua đêm sau khi chuyển sang nitơ lỏng hoặc hồi sức trực tiếp, nếu bạn thấy rằng đá khô đã bay hơi sạch sẽ, nắp chai đông lưu trữ rơi ra, bị hỏng và ô nhiễm tế bào, xin vui lòng liên hệ với chúng tôi ngay lập tức.

(2) T25 chai hồi sức tế bào sống sót được vận chuyển ở nhiệt độ bình thường, sau khi nhận được hoạt động theo phương pháp xử lý sau khi nhận tế bào.

Xử lý tế bào sau khi tiếp nhận

1) Sau khi nhận được tế bào, 75% rượu khử trùng tường chai đặt chai T25 trong 37 ℃ nuôi cấy hộp đặt khoảng 2-3 giờ, nếu bạn tìm thấy chai bị hỏng, tràn chất lỏng và ô nhiễm tế bào, xin vui lòng liên hệ với chúng tôi kịp thời sau khi chụp ảnh.

2) Vui lòng xác nhận trạng thái tế bào dưới kính hiển vi 4 hoặc 5X, trong khi chụp ảnh các tế bào vừa nhận được (10 × 20 ×) mỗi 2-3 tấm và hình ảnh bên ngoài của chai nuôi cấy một tấm, làm cơ sở cho trạng thái tế bào khi nhận được sau khi bán.

3) tế bào dán tường: các tế bào được đặt trong một buồng nuôi cấy 37 ℃ trong 2-3h, dưới kính hiển vi để xem sự phát triển của tế bào và tình trạng dán tường, một số tế bào dán tường trong quá trình vận chuyển nhanh sẽ rơi ra và rơi ra do rung động sau khi hình thành các cụm. Nếu mật độ tăng trưởng của tế bào dưới 60% được quan sát dưới gương, có thể loại bỏ môi trường truyền dịch trong chai nuôi cấy (nếu có tế bào không dán tường cần thu hồi ly tâm, treo lại vào chai nuôi cấy ban đầu), thêm môi trường quan hoàn chỉnh mới được xây dựng 6-8mL, đặt vào trong hộp nuôi cấy tế bào để tiếp tục nuôi cấy. Nếu mật độ tăng trưởng tế bào đạt trên 70% -80%, có thể tiến hành xử lý di truyền tế bào. Trong quá trình truyền thừa, nếu các tế bào bị tách ra do rung động vận chuyển cần được thu hồi ly tâm.

4) Lưu ý: Môi trường vận chuyển (môi trường truyền dịch) không còn có thể được sử dụng để nuôi cấy tế bào, hãy thay thế bằng môi trường quan hoàn chỉnh mới được điều chế theo các điều kiện nuôi cấy tế bào hướng dẫn để nuôi cấy tế bào. Sau khi nhận được tế bào, khuyến nghị truyền 1: 2 cho chai nuôi cấy T25.

NCI-H69 Nhận dạng STR tế bào ung thư phổi tế bào nhỏ ở người

Thiết bị vớt váng dầu mỡ cho xử lý nước thải -PetroXtractor - Well Oil Skimmer (

1) Chuẩn bị môi trường RPMI-1640 (iCell-0002 được khuyến nghị); Huyết thanh bò thai chất lượng cao, 10%; Kháng gấp đôi, 1%.

2) Điều kiện nuôi: pha khí: không khí, 95%; CO2, 5%. Nhiệt độ: 37 độ C, độ ẩm buồng nuôi cấy là 70% -80%.

3) Dung dịch đông lạnh: 90% huyết thanh, 10% DMSO, được sử dụng ngay bây giờ.

2. Xử lý tế bào:

1) Phục hồi tế bào đông lạnh:

Các ống lưu trữ đông lạnh chứa 1 mL đình chỉ tế bào được lắc nhanh chóng và tan băng trong một bồn tắm nước 37 ° C, thêm vào một ống ly tâm với 4-6 mL môi trường hoàn thiện quan trộn đều. Ly tâm 3-5 phút trong điều kiện 1000RPM, loại bỏ chất lỏng thượng lưu, hoàn thành các tế bào treo lại trong môi trường quan. Đình chỉ tế bào sau đó được thêm vào một chai (hoặc đĩa) chứa 6-8ml môi trường quan đã hoàn thành để nuôi cấy 37oC qua đêm. Sự tăng trưởng tế bào và mật độ tế bào được quan sát dưới kính hiển vi vào ngày hôm sau.

2) Di truyền tế bào: Nếu mật độ tế bào đạt 80% -90%, nuôi cấy di truyền có thể được thực hiện.

Đối với các tế bào lơ lửng, truyền gen có thể tham khảo các phương pháp sau:

Các tế bào phát triển trong trạng thái lơ lửng, có thể duy trì trạng thái tăng trưởng của tế bào bằng cách thêm môi trường wan đầy đủ vào chai nuôi cấy, trong trường hợp chung, mật độ tế bào duy trì ở mức 1 × 105~1 × 106/mL (các tế bào khác nhau có yêu cầu mật độ khác nhau,) có thể duy trì sự phát triển bình thường của tế bào. Nếu cần chia chai có thể thu thập huyền phù tế bào vào ống ly tâm 1000rpm, ly tâm 5 phút, bỏ đi thanh lọc, bổ sung 1-2mL nuôi cấy sau khi treo lại sau đó chia huyền phù tế bào theo tỷ lệ 1: 2 vào chai T25 mới, thêm 6-8ml theo yêu cầu của hướng dẫn cấu hình mới wan đầy đủ môi trường để duy trì sức sống tăng trưởng của tế bào, tiếp theo truyền theo theo tình hình thực tế theo tỷ lệ 1: 2~1: 5.

3) Đóng băng tế bào: Sau khi nhận được tế bào, nên đóng băng một số hạt giống tế bào trong quá trình nuôi cấy 3 thế hệ đầu tiên để sử dụng trong các thí nghiệm tiếp theo.

Ví dụ như chai T2 dưới đây.

1. Khi tế bào đông lạnh theo quá trình di truyền tế bào để thu thập các tế bào tiêu hóa tốt vào ống ly tâm, có thể sử dụng bảng đếm máu để xác định mật độ đông lạnh của tế bào. Mật độ đông lạnh được khuyến cáo cho các tế bào thông thường là 1 × 10 ^ 6~1 × 107 tế bào sống/ml.

2. 1000rpm ly tâm 3-5min, loại bỏ Shangqing. Các tế bào được treo lại bằng dung dịch đông lạnh tế bào được điều chế, với 1 × 10 ^ 6~1 × 107 tế bào sống/ml được phân bổ vào một ống đông lạnh phân phối các tế bào vào ống đông lạnh, đánh dấu tên, đại số, ngày tháng và các thông tin khác.

3. Đặt các tế bào được đông lạnh trong hộp làm mát chương trình, -80 độ trong tủ lạnh qua đêm, sau đó chuyển vào thùng chứa nitơ lỏng để lưu trữ. Đồng thời ghi lại vị trí của các ống lưu trữ đông lạnh trong các ống ni - tơ lỏng để tra cứu và sử dụng sau này.