Gạo nội sinh Gos9 Gene Probe Method qPCR Kit Không có nhân sâm

Phương pháp thăm dò gen PLD nội sinh lúa qPCR Kit (không có nhân sâm)

Phương pháp thăm dò gen PLD nội sinh lúa qPCR Kit (không có nhân sâm)Sản phẩm và tính năng:
Nó chủ yếu được sử dụng để kiểm tra hàm lượng gen Gos9 nội sinh trong gạo và các sản phẩm lúa, có thể được sử dụng trong các tổ chức nghiên cứu khoa học, công ty hạt giống, phòng thí nghiệm kiểm tra thực phẩm, v.v. Được sử dụng trong việc xác định giống lúa, phân tích độ tinh khiết của hạt giống, kiểm tra thành phần biến đổi gen trong thực phẩm, v.v. Bằng cách kiểm tra mức độ biểu hiện của gen Gos9, cơ chế điều chỉnh biểu hiện gen của lúa ở các giai đoạn tăng trưởng và phát triển khác nhau, trong các điều kiện môi trường khác nhau cũng có thể được nghiên cứu.Nó có các tính năng sau:

1. Bật và chạy, người dùng chỉ cần cung cấp mẫu DNA mẫu.

2. mồi và đầu dò được tối ưu hóa, độ nhạy phân tích cao, có thể đạt 100 bản sao/phản ứng.

3. Cung cấp kiểm soát dương tính để dễ dàng phân biệt các mẫu âm tính giả.

Độ đặc hiệu cao, mồi được thiết kế theo DNA PLD nội nguồn của lúa, không phản ứng chéo với DNA khác.

5. Nó có thể được sử dụng để kiểm tra định tính và định lượng. Phạm vi tuyến tính của nó không ít hơn 5 bậc độ lớn khi được sử dụng để định lượng.

6. Sản phẩm này đủ 50 lần phản ứng PCR định lượng huỳnh quang bằng phương pháp thăm dò của hệ thống 20μL.

7. Sản phẩm này chỉ có thể được sử dụng trong nghiên cứu khoa học.

Thông số kỹ thuật và thành phần:

Vận chuyển và bảo quản:Vận chuyển nhiệt độ thấp, -20 ℃ bảo quản, thời gian bảo quản là 12 tháng.
Tự chuẩn bị DNA mẫu thuốc thử.

GMO Elements pUbi Probe Method qPCR Kit (không có tham số)Phương pháp sử dụng:
I. Pha loãng mẫu đường cong tiêu chuẩn(Lấy bản sao 10E1-10E6/μL 6 pha loãng gấp 10 lần này làm ví dụ). Do nồng độ tiêu chuẩn rất cao, các hoạt động pha loãng sau đây phải được thực hiện trong khu vực độc lập, không được làm ô nhiễm mẫu hoặc các thành phần khác của bộ dụng cụ). Để tăng sự ổn định của sản phẩm và tránh lây lan các mầm bệnh truyền nhiễm, sản phẩm này không cung cấp các mẫu sống để kiểm soát dương tính, chỉ các mảnh DNA không lây nhiễm làm kiểm soát dương tính.

1. Đánh dấu 6 ống ly tâm, tương ứng là 6, 5, 4, 3, 2, 1.

2. Sử dụng đầu súng có lõi để thêm 45 μL huỳnh quang PCR mẫu đặc biệt pha loãng chất lỏng, tốt nhất là với đầu súng có lõi, dưới cùng).

Thêm 5 μL 1 × 10E7 bản sao/μL kiểm soát dương tính (được cung cấp bởi bộ dụng cụ) vào ống số 6, chấn động đầy đủ trong 1 phút, thu được 1 × 10E7 bản sao/μL mẫu đường cong tiêu chuẩn. Cứ để đá chờ.

Thay đầu súng, thêm 5 μL 1 × 10E6 bản sao/μL đối chiếu dương tính (kết quả pha loãng ở bước trên) vào ống số 5, chấn động đầy đủ trong 1 phút, thu được 1 × 10E5 bản sao/μL mẫu đường cong tiêu chuẩn. Cứ để đá chờ.

Thay đầu súng, thêm 5 μL 1 × 10E5 bản sao/μL đối chiếu dương tính (kết quả pha loãng ở bước trên) vào ống số 4, chấn động đầy đủ trong 1 phút, thu được 1 × 10E5 bản sao/μL mẫu đường cong tiêu chuẩn. Cứ để đá chờ.

Lặp lại thao tác trên cho đến khi bạn có được 6 mẫu đường cong tiêu chuẩn pha loãng. Cứ để đá chờ.

II. Chuẩn bị DNA mẫu

Nếu có N mẫu, tốt nhất là thiết lập N+2 trích xuất, nhiều hơn một là PC (mẫu chuẩn bị đối chứng dương tính), một là NC (mẫu chuẩn bị đối chứng âm tính). Có thể thu được dung dịch pha loãng số 4 với 10μL cộng với một lượng nước nhất định để làm cho tổng thể tích giống như thể tích ban đầu yêu cầu cho mỗi lần chuẩn bị như là

PC. Thêm nước như NC.

8. Tinh chế DNA của mẫu bằng phương pháp tự chọn, bộ dụng cụ này tương thích với hầu hết các bộ dụng cụ chiết xuất DNA mẫu trên thị trường. Bạn cũng có thể chọn mua chất phóng a - xít nucleic miễn phí của công ty chúng tôi.

III. Phản ứng Probe qPCR (hệ thống 20μL, được thực hiện trong phòng chuẩn bị mẫu)

Nếu bạn thực hiện phân tích định lượng và chỉ thực hiện 1 lần lặp lại, hãy đánh dấu N+9 ống PCR, trong đó N+2 ống

N+2 mẫu thu được từ bước trên, 1 cho kiểm soát PCR âm tính (làm khuôn bằng nước) và 6 cho đường cong tiêu chuẩn. Nếu bạn thực hiện phân tích định tính và chỉ lặp lại 1 lần, hãy đánh dấu N+4 ống PCR, trong đó N+2 cho N+2 mẫu thu được ở bước trên, 1 cho kiểm soát PCR âm tính (làm khuôn với nước) và 1 cho kiểm soát PCR dương tính (làm khuôn trực tiếp với dung dịch pha loãng đối chứng dương tính của ống số 4 ở bước 6). Sau đây mô tả các bước hoạt động chỉ với phân tích định lượng làm ví dụ.

10. Nhấn bảng trong ống đánh dấu để thêm các thành phần(Bảng này chỉ liệt kê một lần lặp lại. Ống mẫu và kiểm soát âm tính được thiết lập sau khi kiểm soát dương tính được thiết lập, và mẫu kiểm soát dương tính được thêm vào sau khi tất cả các ống được đậy nắp và bảo quản tốt):

11. Lên máy sau khi đậy nắp, PCR theo các thông số sau:

IV. Xử lý dữ liệu

12. Nếu bộ dụng cụ này được sử dụng để kiểm tra định lượng, giá trị log của nồng độ kiểm soát dương tính là trục ngang và giá trị Ct là trục dọc, vẽ đường cong tiêu chuẩn. Sau đó, giá trị Ct của mẫu được tính từ đường cong tiêu chuẩn để tính toán giá trị log của nồng độ DNA của mẫu và sau đó tính toán nồng độ của nó.

Nếu bộ dụng cụ này được sử dụng để kiểm tra định tính và chỉ đánh giá dương tính hoặc âm tính, Ct đối chứng âm tính phải không có giá trị số, hoặc giá trị Ct bằng hoặc lớn hơn 40. Kiểm soát dương tính phải có sự tăng trưởng logarit huỳnh quang với đường cong khuếch đại điển hình và giá trị Ct phải nhỏ hơn 40. Đối xử với mẫu thử nghiệm dương tính nếu Ct của nó nhỏ hơn 40. Âm tính nếu không có giá trị Ct, hoặc lớn hơn hoặc bằng 40.
Chỉ dùng cho nghiên cứu khoa học, không thể dùng cho chẩn đoán lâm sàng! Tất cả các sản phẩm chỉ dành cho mục đích nghiên cứu khoa học, không được sử dụng cho bất kỳ mục đích nào khác như điều trị cho người hoặc động vật và không cung cấp sản phẩm và dịch vụ cho bất kỳ cá nhân nào. Lấy bản thuyết minh sản phẩm thu hàng thực tế làm chuẩn, bản thuyết minh trang web chỉ để tham khảo.