RiboNAT™ Bộ xét nghiệm vô trùng nhanh

RiboNAT ™ Bộ xét nghiệm vô trùng nhanh

Trong kiểm tra tính an toàn của thuốc tiêm, luật kiểm tra vô trùng do dược điển đa quốc gia quy định cần bồi dưỡng ít nhất 14 ngày. Tuy nhiên, một số liệu pháp tế bào nhất định phải được truyền cho bệnh nhân trong vòng vài ngày sau khi sản xuất, điều này khiến việc hoàn thành xét nghiệm vô trùng trước khi dùng thuốc trở nên khó khăn, điều này cũng dẫn đến nhu cầu ngày càng tăng đối với các xét nghiệm vô trùng cung cấp kết quả nhanh hơn để tăng cường an toàn cho bệnh nhân.

RiboNAT ™ Nó là một bộ xét nghiệm vô trùng nhanh chóng với công nghệ phát hiện khuếch đại axit nucleic (NAT), có khả năng hoàn thành thử nghiệm chỉ trong 7 giờ, giảm đáng kể thời gian phát hiện so với các phương pháp truyền thống. Không giống như các xét nghiệm NAT truyền thống chỉ nhắm vào DNA di truyền của vi sinh vật, RiboNAT ™ Kiểm tra là RNA ribosome (rRNA). Do hàm lượng rRNA trong vi sinh vật khá cao, điều này làm cho việc phát hiện trở nên nhạy cảm hơn. Trong khi đó, các phương pháp truyền thống dễ dẫn đến dương tính giả do DNA còn sót lại của vi khuẩn chết hoặc DNA bị ô nhiễm trong môi trường và vật liệu. ™ Hiệu quả giảm vấn đề này và cải thiện độ chính xác của việc phát hiện.

◆ Tính năng

● Kết quả có sẵn trong ngày phát hiện (khoảng 7 giờ)

● Phát hiện bằng phương pháp PCR sao chép ngược thời gian thực rRNA (RT-rt PCR), độ nhạy (9 CFU/mL) cao hơn so với phát hiện gDNA

● Giảm dương tính giả do vi khuẩn chết và DNA còn sót lại

● Nhiều loại vi khuẩn (hiếu khí và kỵ khí) và nấm có thể được phát hiện cùng một lúc

◆ Quy trình thử nghiệm

◆ Đặc điểm kỹ thuật của bộ thử nghiệm

◆ Thành phần kit

◆ Phát hiện độ nhạy

Sơ đồ 1. Phát hiện độ nhạy

Đình chỉ vi sinh vật ở nồng độ 9 CFU/mL đã được chuẩn bị cho sáu vi sinh vật được quy định trong dược điển. Sử dụng RiboNAT ™ RNA được chiết xuất từ các đình chỉ này và RNA ribosome (rRNA) được kiểm tra. ARN rRNA của tất cả vi sinh vật đều được phát hiện thành công, giá trị Ct đều thấp hơn 35.

Hình 2. Độ nhạy phát hiện trong mẫu đình chỉ tế bào

Đối với sáu vi sinh vật được quy định trong dược điển, hệ thống treo vi sinh vật ở nồng độ 9 CFU/mL đã được chuẩn bị và tương ứng với 0,25 × 10⁶ Tế bào HEK293 hỗn hợp cells/mL. Sử dụng RiboNAT ™ RNA được chiết xuất từ hệ thống treo hỗn hợp và rRNA được phát hiện. ARN rRNA của tất cả vi sinh vật đều được phát hiện thành công, giá trị Ct đều thấp hơn 35.

Ngoài ra, tất cả 6 chủng cũng đã được phát hiện trong các điều kiện sau (dữ liệu không hiển thị):

· Tế bào gốc trung mô (MSC): 0,5 × 10⁶tế bào / ml

· T-tế bào: 1,0 × 10⁶tế bào / ml

◆ Phương pháp phát hiện có độ nhạy cao hơn

■ Nồng độ vi khuẩn: 2 CFU/mL

■ Thời gian ủ: 3~15 giờ

Hình 3. Phương pháp phát hiện có độ nhạy cao hơn

Đối với Aspergillus brasiliensis, Clostridium sporogenes và Propionium acnes, nồng độ được điều chế là2 CFUVi sinh vật huyền dịch. Mặc dù RiboNAT ™ Quy trình hoạt động thông thường quy định thời gian ủ là 3 giờ, nhưng thí nghiệm này trì hoãn thời gian ủ đến 3-15 giờ. Sau khi ủ xong, sử dụng RiboNAT ™ RNA được chiết xuất và rRNA được kiểm tra. Kết quả cho thấy ba chủng, bao gồm cả vi khuẩn kỵ khí nghiêm ngặt (Clostridium sporogenes) và vi khuẩn phát triển chậm (Propionibacterium acnes), đã được phát hiện thành công sau 14 giờ ủ và cả hai đều có giá trị Ct dưới 35.

◆ Giảm dương tính giả

RiboNAT ™ Bao gồm thuốc thử bất hoạt DNA của vi khuẩn chết cũng như các bước xử lý DNase có hiệu quả trong việc giảm nguy cơ dương tính giả do DNA còn lại trong mẫu.

Sơ đồ 4. Giảm dương tính giả

Thử nghiệm axit nucleic vi khuẩn (NAT) được thực hiện bằng cách sử dụng PBS vô trùng thương mại làm mẫu thử nghiệm. Một nhóm các thí nghiệm (hình trên), sử dụng các bộ dụng cụ có sẵn trên thị trường để trích xuất DNA, tiếp theo là phát hiện PCR định lượng huỳnh quang thời gian thực do vi khuẩn nhắm mục tiêu. Một bộ thí nghiệm khác (hình dưới đây), sử dụng RiboNAT ™ RNA được chiết xuất, tiếp theo là phát hiện PCR định lượng huỳnh quang phiên mã ngược thời gian thực. Sáu đường cong khuếch đại đã được quan sát thấy trong phương pháp dựa trên DNA, trong khi RiboNAT được sử dụng ™ Không có tín hiệu khuếch đại nào được phát hiện.

◆ Danh sách sản phẩm