Orexin B (OX-B) ELISA Kit - Thử nghiệm theo phương pháp cạnh tranh

Orexin B (OX-B) ELISA Kit - Thử nghiệm theo phương pháp cạnh tranh

Yêu cầu mẫu
1. Xử lý mẫu: (1) Sau khi thu thập mẫu nước qua -20 ℃ lặp đi lặp lại đông lạnh và tan chảy ba lần, sau đó lọc bằng sợi thủy tinh, kiểm tra
(2) Butanol cho các mẫu mô: methanol: nước (5: 25: 70 V: V: V) chiết xuất, hoặc theo pha
Tiến hành chiết xuất văn hiến quan trọng, sau khi chiết xuất nên tiến hành thí nghiệm càng sớm càng tốt. Nếu không thử nghiệm ngay lập tức,
Có thể lưu trữ mẫu vật ở -20 ℃, kiểm tra
Không thể phát hiện các mẫu có chứa NaN3 vì NaN3 ức chế hoạt động (HRP) của peroxidase horseradish.

Orexin B (OX-B) ELISA Kit - Thử nghiệm theo phương pháp cạnh tranhCác bước hoạt động
1. Thêm mẫu: lần lượt thiết lập lỗ tiêu chuẩn, lỗ trống (lỗ đối chiếu trống không thêm mẫu và thuốc thử enzym, các bước còn lại hoạt động giống nhau),
Lỗ mẫu được kiểm tra. 50 microliters được thêm vào lỗ tiêu chuẩn trên tấm trong gói tiêu chuẩn enzyme, 40 μl dung dịch pha loãng mẫu được thêm vào lỗ mẫu được kiểm tra,
Sau đó thêm 10μl vào mẫu cần kiểm tra (độ pha loãng cuối cùng của mẫu là 5 lần). Thêm mẫu vào dưới cùng của lỗ tiêu chuẩn enzyme.
Lượng không chạm đến vách lỗ, nhẹ nhàng lắc lư trộn đều.
2. Enzyme: 50 μl thuốc thử nhãn enzyme được thêm vào mỗi lỗ, ngoại trừ lỗ trống.
3. Ôn dục: Dùng màng niêm phong để ôn dục 37 độ C sau 60 phút.
4. Phân phối: Pha loãng 30 lần nước cất cho chất tẩy rửa đậm đặc 30 lần để sử dụng dự phòng
5. rửa: cẩn thận bóc màng niêm phong, loại bỏ chất lỏng, quăng khô, mỗi lỗ đầy chất lỏng rửa, để yên 30 giây sau khi vứt bỏ, vì vậy
Lặp lại 5 lần và bắn khô.
6. kết xuất màu sắc: mỗi lỗ đầu tiên thêm chất kết xuất màu A50μl, sau đó thêm chất kết xuất màu B50μl, chấn động nhẹ nhàng trộn đều, 37 ℃ tránh ánh sáng kết xuất màu
15 phút.
2
7. Chấm dứt: 50 μl chất chấm dứt mỗi lỗ, chấm dứt phản ứng (lúc này màu xanh chuyển sang màu vàng).
8. Xác định: bằng không với lỗ trống, bước sóng 450nm đo độ hấp thụ (giá trị ODD) của mỗi lỗ theo thứ tự. Kết quả xét nghiệm phải chấm dứt.
Trong vòng 15 phút sau khi dịch được tiến hành.

tính toán
Với nồng độ của các chất tiêu chuẩn là tọa độ ngang, giá trị OD là tọa độ dọc, vẽ đường cong tiêu chuẩn trên giấy tọa độ, theo mẫu
Giá trị ODD được tìm thấy nồng độ tương ứng bởi đường cong tiêu chuẩn; Lại nhân với bội số pha loãng; hoặc sử dụng nồng độ và giá trị ODD của vật liệu tiêu chuẩn để tính toán
Phương trình hồi quy thẳng của đường cong chuẩn, thay thế giá trị ODD của mẫu vào phương trình, tính toán nồng độ mẫu, sau đó nhân với bội số pha loãng,
Đó là nồng độ thực tế của mẫu.

Lưu ý
1. Bộ dụng cụ được lấy ra khỏi môi trường lạnh nên được sử dụng sau 15-30 phút cân bằng nhiệt độ phòng, sau khi gói enzyme được mở bởi tấm nếu không
Sau khi sử dụng, các thanh nên được đóng gói trong một túi kín để bảo quản.
2. Chất lỏng rửa mạnh có thể có kết tủa tinh thể, có thể được làm ấm trong bồn tắm nước khi pha loãng và không ảnh hưởng đến kết quả khi giặt.
3. Mỗi bước bổ sung mẫu nên được sử dụng và thường xuyên kiểm tra độ chính xác của nó để tránh lỗi thử nghiệm. Thời gian lấy mẫu là tốt nhất.
Kiểm soát trong vòng 5 phút, nếu số lượng mẫu vật nhiều, đề nghị sử dụng thêm mẫu súng trung đội.
4. Vui lòng làm đường cong tiêu chuẩn cùng một lúc với mỗi lần xác định, tốt nhất là làm lỗ kép. Nếu hàm lượng chất được kiểm tra trong mẫu quá cao (giá trị ODD của mẫu)
Lớn hơn giá trị OD của lỗ đầu tiên tiêu chuẩn), trước tiên hãy pha loãng một số bội số (n lần) với dung dịch pha loãng mẫu trước khi xác định, đo
Vui lòng nhân cuối cùng với tổng bội pha loãng (× n × 5).
5. Màng niêm phong chỉ được sử dụng một lần để tránh ô nhiễm chéo.
6. Vật nền xin tránh ánh sáng.
Thực hiện đúng theo hướng dẫn, kết quả kiểm tra phải được xác định bằng cách đọc máy đo enzyme. 8. Tất cả các mẫu, chất tẩy rửa và chất thải khác nhau nên được xử lý theo chất truyền nhiễm.
9. Các thành phần số lô khác nhau của thuốc thử này không được trộn lẫn.

quy cách
96 phần/hộp

Điều kiện bảo quản và ngày hết hạn
1. Bộ dụng cụ bảo quản; 2-8℃。
2. Ngày hết hạn: 6 tháng