Neuro2a (N2a) tế bào u thần kinh não chuột

Giới thiệu Cell

Nhân bảnNeuro-2AĐược tạo ra bởiRJ KlebevàF.H. RuddleKinhAKhối u tự sinh của chuột bạch được thành lập. Tế bào này tạo ra một lượng lớn protein ống, hoạt động như một hệ thống co lại trong các tế bào thần kinh để đáp ứng với dòng chảy của trục plasma.

Đặc tính tế bào

1）Nguồn:U nguyên bào thần kinh não

2）Hình thái：tế bào gốc giống amip

3）Nội dung:>1x10⁶ Số tế bào

4）Thông số kỹ thuật:T25Chaihoặc1 mLĐóng gói lưu trữ đông

5) Sử dụng:Chỉ dùng cho nghiên cứu khoa học.

Vận chuyển và bảo quản:Đá khôVận chuyểnPhục hồi để sống sóttế bào：（1）1 mLFreeze Storage Pack Vận chuyển đá khô, sau khi nhận được-80Tủ lạnh sau khi bảo quản qua đêm chuyển sang nitơ lỏng hoặc hồi sức trực tiếp,Nếu phát hiện băng khô đã bốc hơi sạch sẽ,Nắp ống lưu trữ đông lạnh rơi ra,Tổn thương và ô nhiễm tế bào, xin vui lòng liên hệ với chúng tôi ngay lập tứcliên hệ。（2）T25Sự sống còn của chai phục hồitế bàoGửi hàng ở nhiệt độ bình thường,thuSau khi đến, hoạt động theo phương pháp xử lý sau khi tế bào tiếp nhận.

Sau khi tế bào nhậnXử lý:

1Sau khi nhận được tế bào,75%Rượu khử trùng chai tường sẽT25Chai đặt37℃ Đặt tủ nuôi khoảng2-3hNếu phát hiện bình nuôi cấy bị hư hỏng, có dịch tràn ra và tế bào bị ô nhiễm, xin vui lòng liên hệ với chúng tôi kịp thời sau khi chụp ảnh.

2(Xin mời vào4hoặc5XThông số kỹ thuật sản phẩm: - Type: Digital Multifunction Imaging System - Standard Functions: Copy, Print (10×，20x) Mỗi2-3Một tấm ảnh và một tấm ảnh bên ngoài bình bồi dưỡng được lưu giữ, làm căn cứ cho trạng thái tế bào khi nhận được sau khi bán.

3）Tế bào dán tường: Tế bào trong37℃ Đặt trong một tủ nuôi cấy2-3hDưới kính hiển vi quan sát sự phát triển và tình trạng dán tường của tế bào, một số tế bào dán tường trong quá trình vận chuyển nhanh sẽ rơi ra và rơi ra sau khi rơi ra. Nếu bạn quan sát mật độ tăng trưởng của tế bào dưới kính.60%Sau đây, có thể loại bỏ môi trường truyền dịch trong chai nuôi cấy (nếu có tế bào không dán tường cần thu hồi ly tâm, treo lại vào chai nuôi cấy ban đầu),Thêm môi trường đặc biệt mới được xây dựng6-8mlTiếp tục bồi dưỡng trong hộp nuôi dưỡng tế bào. Nếu tế bào phát triển mạnh70%-80%Trên đây, có thể tiến hành xử lý truyền đời tế bào. Trong quá trình truyền thừa, nếu các tế bào bị tách ra do rung động vận chuyển cần được thu hồi ly tâm.

4）Lưu ý: Môi trường vận chuyển (môi trường truyền dịch) không còn có thể được sử dụng để nuôi cấy tế bào, hãy thay thế bằng môi trường chuyên dụng mới được điều chế theo các điều kiện nuôi cấy tế bào hướng dẫn để nuôi cấy tế bào. Lời khuyên di truyền đầu tiên sau khi nhận được tế bàoT25Chai nuôi cấy1：2Truyền thừa

Một.Môi trườngvàVăn hóaLưu trữ đông lạnhChuẩn bị điều kiện:

1）chuẩn bịMEMCơ sở bồi dưỡng;chất lượng caohuyết thanh bò thai,10%；Song kháng,1%。

2）Điều kiện nuôi dưỡng: Giai đoạn khí: Không khí,95%CO2,5%. Nhiệt độ:37℃，Độ ẩm buồng nuôi cấy là70%-80%。

3）Lưu trữ đông lạnh：90%Huyết thanh，10% DMSO，Hiện tạihiệnKết hợp。

Hai.tế bàoXử lý：

1）Phục hồi tế bào đông lạnh：：

Sẽ chứa1 mLỐng lưu trữ đông lạnh của dịch treo tế bào trong37Nhanh chóng lắc lư và tan băng trong bồn tắm nước.4-6mL chuyên dụngTrộn đều trong ống ly tâm của môi trường. ở1000RPMLy tâm trong điều kiện3-5 phútBỏ đi dịch thượng thanh, chuyên dụng bồi dưỡng tế bào trọng huyền. Sau đó thêm dịch đình chỉ tế bào vào.6-8ml chuyên dụngB5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)37Bồi dưỡng qua đêm. Sự tăng trưởng tế bào và mật độ tế bào được quan sát dưới kính hiển vi vào ngày hôm sau.

2）Di truyền tế bào:nếutế bàoMật độ đạt80%-90%，Tức làCó thể thực hiệnNuôi cấy truyền thừa。

Đối với việc truyền tế bào dán tường có thể tham khảo các phương pháp sau:

1. Bỏ đi.Nuôi dưỡng thượng thanh, dùng canxi không chứa, ion magiêcủaPBSTẩy tế bào gốc1-2lần。

2. Tham gia0.25％（W / V) trypsin0,53 mM EDTAvàoNuôi cấy chai（T25Chai1-2ml，T75Chai2-3ml），Đặt37℃Tủ nuôi cấyTiêu hóa trung bình1-2phút(Các tế bào khó tiêu hóa có thể kéo dài thời gian tiêu hóa)Nhưng......Sau đó nhìn dưới kính hiển vi.Tiêu hóa tế bàotình huống,nếuHầu hết các tế bào đều tròn.Và rơi ra.Nhanh chóng lấy lại bàn điều khiển.Một vài cú nhấp chuộtSau khi trồng chaiTham gia3-4 mlhàm10%FBSCơ sở đào tạo.Chấm dứtTiêu hóa。

3.Nhẹ nhàng đánh đều rồi hút ra.Trong1000RPMđiềuLy tâm dưới mảnh3-5 phútBỏ đi. Bổ sung.1-2mlDịch bồi dưỡng sau đó thổi đều.Nhấn Cell Suspension1：2Tỷ lệ chia ra mớiT25Trong chai, thêm6-8mlTheo yêu cầu của hướng dẫn cấu hình một môi trường đặc biệt mới để duy trì sự phát triển của tế bào, các thế hệ tiếp theo theo tình hình thực tế1:2~1:5Tỷ lệ tiến hành。

3) Tế bào đông lạnh:Sau khi nhận được tế bào, đề nghị trước khi nuôi cấy.3Đóng băng một số hạt giống tế bào để sử dụng trong các thí nghiệm tiếp theo. Dưới đâyT25Ví dụ như chai;

1. tế bàoKhi đông lạnhtheoQuá trình di truyền tế bào thu thập các tế bào được tiêu hóa vào ống ly tâm, có thể sử dụng số lượng bảng đếm cầu máu để xác định mật độ đông lạnh của tế bào. Mật độ đông lạnh được khuyến nghị cho các tế bào nói chung là1×10⁶~1×10⁷Một tế bào sống./ ml.

2. 1000rpmLy tâm3-5 phútBỏ đi. Dùng dịch đông lạnh tế bào công thức để treo lại tế bào, theo từng tế bào.1 mlDung dịch đông lạnh1×10⁶~1×10⁷Một tế bào sống./ mLPhân phối vào một ống đông phân phối các tế bào vào ống đông, đánh dấu tên, đại số, ngày tháng và các thông tin khác.

3. Đặt các tế bào đông lạnh trong hộp làm mát chương trình,-80Qua đêm trong tủ lạnh, sau đó chuyển vào bình nitơ lỏng để lưu trữ. Đồng thời ghi lại vị trí của các ống lưu trữ đông lạnh trong các ống ni - tơ lỏng để tra cứu và sử dụng sau này.

Lưu ý:

1. Tất cả các tế bào động vật được coi là có khả năng gây nguy hiểm sinh học và phải được vận hành trong bảng an toàn sinh học cấp độ 2 và được bảo vệ cẩn thận, tất cả chất thải và đồ dùng tiếp xúc với tế bào này cần được khử trùng để loại bỏ.

2. Nên luôn sử dụng găng tay bảo hộ, quần áo và đeo mặt nạ bảo hộ khi hồi sức các tế bào đông lạnh. LƯU Ý: Các ống lưu trữ đông lạnh bị rò rỉ khi ngâm trong nitơ lỏng và sẽ từ từ được lấp đầy bằng nitơ lỏng. Khi tan băng, việc chuyển đổi nitơ lỏng thành pha khí có thể khiến thùng chứa phát nổ hoặc thổi bay nắp của nó bằng lực nguy hiểm, tạo ra các mảnh vụn bay để gây thương tích cho người.