KMS-21BM Tế bào đa u tủy ở người

KMS-21BM_Tế bào đa u tủy ở người

Thông tin sản phẩm

Tên tế bào：KMS-21BM Tế bào đa u tủy ở người

Nguồn gốc loài: người

Tuổi giới tính: Phụ nữ,67tuổi

Nguồn tổ chức: tràn dịch màng phổi

Đặc tính tăng trưởng: Tăng trưởng lơ lửng

Hình thái tế bào: Giống tế bào lympho

Thông số kỹ thuật tế bào: 1 X 10⁶Cells/T25 hoặc 1 mL

Điều kiện bồi dưỡng:RPMI 1640 + 10% huyết thanh bò thai nhi，37 ℃, 5% CO2

Điều kiện lưu trữ đông lạnh： 90% FBS + 10% DMSO

Phương pháp truyền: 1：3 thế hệ，2-3 ngày truyền 1 thế hệ

Hoạt động nuôi cấy tế bào

Vận chuyển đá khô：Sau khi nhận được tế bào cần chuyển ngay sang bảo quản nitơ lỏng hoặc-80°CTủ lạnh đóng băng ngắn hạn hoặc hồi sức trực tiếp

Vận chuyển nhiệt độ bình thường：Ngay sau khi nhận được tế bào, hãy lấy chai nuôi cấy tế bào ra khỏi hộp và làm theo các bước dưới đây để nuôi cấy

Di truyền tế bào：Mật độ tế bào lên tới 80-90%, cho phép nuôi cấy truyền thừa

Các bước để nuôi cấy tế bào trong chai

Đối với các tế bào nuôi cấy dán tường, trước khi gửi, chúng tôi sẽ lấp đầy môi trường bằng toàn bộ chai để giảm sự mất mát của các tế bào dán tường trong quá trình vận chuyển sản phẩm.

1. Sau khi nhận được tế bào, hãy chú ý quan sát ô nhiễm. Đặt chai nuôi cấy dưới kính hiển vi đảo ngược để kiểm tra cẩn thận xem có bị đục hay không, có bị nhiễm vi khuẩn hay không. Bởi vì trong quá trình vận chuyển có va chạm, và một số tế bào cũng rất nhạy cảm với sự thay đổi nhiệt độ, có thể có một số tế bào rơi ra trôi nổi, những tế bào này vẫn là tế bào sống, không loại bỏ, có thể được làm giàu bằng cách ly tâm để sử dụng sau này.

2. Đối với các tế bào dán tường, trong môi trường tủ an toàn sinh học, môi trường dư thừa trong chai nuôi cấy được loại bỏ bằng bơm chân không để lại khoảng 5-8mL, sau đó chọn môi trường phù hợp với hàm lượng CO2 37℃Bồi dưỡng trong hộp nuôi dưỡng nhiệt độ ổn định, vặn nắp chai. Nếu các tế bào đã phát triển đầy đủ trong chai, hãy truyền lại ngay lập tức.

3. Đối với các tế bào lơ lửng, trong môi trường tủ an toàn sinh học, chuyển các tế bào trong chai nuôi cấy sang ống ly tâm, 150 g ly tâm trong 5 phút, sau khi loại bỏ Shang Clear, thổi các tế bào với môi trường 5 mL, chuyển sang chai nuôi cấy mới, sau đó đặt các nội dung CO2 thích hợp 37℃Bồi dưỡng trong lồng nuôi dưỡng nhiệt độ ổn định.

Các bước hoạt động của tế bào lưu trữ đông lạnh

Lưu ý: Để đảm bảo tỷ lệ sống cao của tế bào, vui lòng rã đông nuôi cấy ngay sau khi nhận được sản phẩm.

1. Tủ lạnh 37℃Tắm nước lắc lư qua lại, nhanh chóng rã đông. Để tránh ô nhiễm, hãy đảm bảo rằng miệng ống đông lạnh được đặt trên mặt nước. Làm tan băng nhanh chóng, khoảng 1 phút.

2. Sau khi chất lỏng tan chảy trong ống lưu trữ đông lạnh, nó được lấy ra ngay lập tức, với một phun rượu để lau bề mặt của ống lưu trữ đông lạnh. Bắt đầu từ bước này, các thao tác tiếp theo phải được hoàn thành trong tủ an toàn sinh học.

3. Chuyển chất lỏng từ ống lưu trữ đông lạnh vào ống ly tâm có chứa môi trường hoàn thiện 5mL, 150 g ly tâm trong 5 phút, loại bỏ thanh lọc bằng bơm chân không.

4. Sử dụng môi trường để treo lại các tế bào và chuyển sang chai nuôi cấy mới. Để đảm bảo tỷ lệ sống sót của sự hồi sinh tế bào, hãy đặt môi trường ở 37.℃Sử dụng sau khi tắm nước nóng.

5. Đặt tế bào ở vị trí 37 có chứa CO2 thích hợp℃Bồi dưỡng trong lồng nuôi dưỡng nhiệt độ ổn định.

Nuôi cấy tế bào dán tường

1. Hấp thụ và vứt bỏ cơ sở nuôi cấy trong chai, thêm P.BSRửa sạch một lần.

2. Tham gia 10,25 ml (w / v) Trypsin-EDTAGiải pháp, và đặt 3.7℃ ủ trong lồng nuôi cấy cho đến khi các tế bào tách ra khỏi tường. Quá trình này đòi hỏi khoảng 3-5phút.

3. Tham gia 2mLMôi trường hoàn chỉnh trung hòa trypsin và thổi nhẹ nhàng để thổi các tế bào ra khỏi bề mặt của chai và phân tán chúng.

4. Lời bài hát: Cell Suspension15 mLTrong ống ly tâm,150 g ly tâm 5 phútDùng bơm chân không để loại bỏ thanh lọc. Lấy một lượng môi trường thích hợp để treo lại các tế bào và chuyển sang một chai nuôi cấy mới để nuôi cấy.

Di truyền tế bào lơ lửng có thể tham khảo các phương pháp sau:

I. Phương pháp truyền trực tiếp

1. Khi các tế bào lơ lửng phát triển đến 80%~90% (huyền phù tế bào chuyển sang màu vàng), nó có thể được truyền lại;

2. VớiỐng hútĐình chỉ tế bào phế thải 1/2~1/3;

3. Thêm vào một lượng vừa phải cơ sở bồi dưỡng tươi mới, tiếp tục bồi dưỡng.

   B5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)

4. Chuyển cell suspension đếnỐng ly tâmbên trong;

5. 150 g ly tâm 5 phút, bỏ đi chất lỏng trong thượng tầng;

6. Sử dụng các tế bào treo lại môi trường tươi;

7. Ống hút hút một lượng vừa phải đình chỉ tế bào và nạp vào một cái mớiChai nuôi cấyThêm vào một lượng vừa phải cơ sở bồi dưỡng mới, tiếp tục bồi dưỡng.

Hoạt động đông lạnh tế bào

1. Ly tâm 1000 vòng/phút 5 phút để loại bỏ sự sạch sẽ. Thêm 1 mL huyết thanh treo lại tế bào, thêm huyết thanh và DMSO theo số lượng tế bào, nhẹ nhàng trộn đều，Nồng độ DMSO cuối cùng là 10%, mật độ tế bào không dưới 1 x 10⁶/mL， Mỗi ống lưu trữ đông lạnh lưu trữ 1mL tế bào đình chỉ, chú ý lưu trữ đông lạnh làm tốt nhận dạng；

2. Đặt ống đông lạnh vào hộp làm mát chương trình, đặt vào tủ lạnh -80 độ C, sau ít nhất 2 giờ chuyển sang lưu trữ nitơ lỏng.

Một số tế bào liên quan như sau:

Thêm tế bào xin vui lòng tư vấn cho chúng tôi:Ung thư trung biểu mô (phế nguyên) NCI-H226 Tích tụ nách (di căn) tế bào vảy