- Thông tin E-mail
- Điện thoại
-
Địa chỉ
Tòa nhà số 2, Khu công nghệ cao Songjiang, Khu phát triển Tào Hà Jing, 518 Đường Xingji, Quận Songjiang, Thượng Hải
Thượng Hải Yanzun Công nghệ sinh học Công ty TNHH
Tòa nhà số 2, Khu công nghệ cao Songjiang, Khu phát triển Tào Hà Jing, 518 Đường Xingji, Quận Songjiang, Thượng Hải
HCC1438 - Tế bào ung thư phổi lớn ở người
Tên tế bào:HCC1438 - Tế bào ung thư phổi lớn ở người
Nguồn gốc loài: People
Tuổi giới tính: Nam, 43
Nguồn mô: Phổi
Đặc tính tăng trưởng: Tăng trưởng gắn tường
Hình thái tế bào: tế bào giống tế bào biểu mô
Thông số kỹ thuật: 1X106cells/T25 hoặc 1 mL
培养条件: RPM11640 + L-glutamine (300mg / L) + 25mM HEPES + 25mM NaHCO3 + 10% h.i.FBS37 ℃, 5% CO2
Điều kiện đóng băng: 90% FBS+10% DMSO
Phương pháp truyền: 1: 3 truyền, 2-3 ngày truyền 1 thế hệ
Thương hiệu: Shanghai Yanzun Biology
Sức sống tế bào: 95% (Viability by Trypan Blue Exclusion)
Xét nghiệm tế bào: tế bào không chứa HIV-1, HBV, HCV, Mycoplasma, vi khuẩn, nấm men và nấm
Điều kiện đông lạnh: Không có huyết thanh tế bào đông lạnh
Tế bào đông lưu trữ: Nitơ lỏng đông lưu trữ
Hoạt động nuôi cấy tế bào
Vận chuyển đá khô: Sau khi nhận được tế bào cần chuyển ngay vào bảo quản nitơ lỏng, hoặc tủ lạnh -80 ° C lưu trữ trong thời gian ngắn, hoặc hồi sức trực tiếp.
Vận chuyển ở nhiệt độ bình thường: ngay sau khi nhận được tế bào, vui lòng lấy chai nuôi cấy tế bào ra khỏi hộp và làm theo các bước dưới đây để nuôi cấy
Di truyền tế bào: mật độ tế bào lên tới 80-90%, có thể nuôi cấy di truyền
Các bước để nuôi cấy tế bào trong chai
Đối với các tế bào nuôi cấy dán tường, trước khi gửi, chúng tôi sẽ lấp đầy môi trường bằng toàn bộ chai để giảm sự mất mát của các tế bào dán tường trong quá trình vận chuyển sản phẩm.
1. Sau khi nhận được tế bào, hãy chú ý quan sát xem có ô nhiễm hay không. Đặt chai nuôi cấy dưới kính hiển vi đảo ngược để kiểm tra cẩn thận xem có bị đục hay không, có bị nhiễm vi khuẩn hay không. Bởi vì trong quá trình vận chuyển có va chạm, và một số tế bào cũng rất nhạy cảm với sự thay đổi nhiệt độ, có thể có một số tế bào rơi ra trôi nổi, những tế bào này vẫn là tế bào sống, không loại bỏ, có thể được làm giàu bằng cách ly tâm để sử dụng sau này.
2. Đối với các tế bào dán tường, trong môi trường tủ an toàn sinh học, môi trường dư thừa trong chai nuôi cấy được loại bỏ bằng bơm chân không, đến khoảng 5-8mL còn lại, sau đó chọn môi trường phù hợp với hàm lượng CO2 37 ℃ để nuôi cấy, tháo nắp chai. Nếu các tế bào đã phát triển đầy đủ trong chai, hãy truyền lại ngay lập tức.
3. Đối với các tế bào lơ lửng, trong môi trường tủ an toàn sinh học, chuyển các tế bào trong chai nuôi cấy sang ống ly tâm, 150 g ly tâm trong 5 phút, sau khi loại bỏ thanh lọc, thổi các tế bào với môi trường 5 mL, chuyển sang chai nuôi cấy mới, sau đó được đặt trong môi trường nuôi cấy nhiệt độ không đổi 37 ℃ với hàm lượng CO2 thích hợp.
Các bước hoạt động của tế bào lưu trữ đông lạnh
Lưu ý: Để đảm bảo tỷ lệ sống cao của tế bào, vui lòng rã đông nuôi cấy ngay sau khi nhận được sản phẩm.
1. Đặt ống lưu trữ đông lạnh trong bồn tắm nước 37 độ C lắc qua lắc lại, nhanh chóng tan băng. Để tránh ô nhiễm, hãy đảm bảo rằng miệng ống đông lạnh được đặt trên mặt nước. Làm tan băng nhanh chóng, khoảng 1 phút.
2. Sau khi chất lỏng tan chảy trong ống lưu trữ đông lạnh, lấy ra ngay lập tức, sử dụng rượu phun để lau bề mặt của ống lưu trữ đông lạnh. Bắt đầu từ bước này, các thao tác tiếp theo phải được hoàn thành trong tủ an toàn sinh học.
3. Chuyển chất lỏng từ ống lưu trữ đông lạnh vào ống ly tâm có chứa môi trường hoàn thiện 5mL, 150 g ly tâm trong 5 phút, loại bỏ thanh lọc bằng bơm chân không.
4. Sử dụng môi trường để treo lại các tế bào và chuyển sang chai nuôi cấy mới. Để đảm bảo sự sống sót của sự hồi sinh tế bào, hãy sử dụng môi trường sau khi đun nóng trước khi tắm nước ở 37 độ C.
5. Nuôi cấy các tế bào trong một môi trường nhiệt độ không đổi 37 ° C với CO2 thích hợp.
Nuôi cấy tế bào dán tường
1. Hút và bỏ môi trường nuôi cấy trong chai, thêm vào PBS rửa sạch một lần.
2. Thêm 1 mL dung dịch Trypsin-EDTA 0,25 (w/v) và ủ trong môi trường 37 ℃ cho đến khi các tế bào tách ra khỏi thành. Quá trình này mất khoảng 3-5 phút.
3. Thêm môi trường hoàn thiện 2mL để trung hòa trypsin và thổi nhẹ để thổi các tế bào ra khỏi bề mặt của chai và phân tán chúng.
4. Thu thập đình chỉ tế bào vào ống ly tâm 15mL, ly tâm 150 g trong 5 phút, loại bỏ sự sạch sẽ bằng bơm chân không. Lấy một lượng môi trường thích hợp để treo lại các tế bào và chuyển sang một chai nuôi cấy mới để nuôi cấy.
Di truyền tế bào lơ lửng có thể tham khảo các phương pháp sau:
I. Phương pháp truyền trực tiếp
Khi các tế bào lơ lửng phát triển đến 80%~90% (huyền phù tế bào chuyển sang màu vàng), nó có thể được truyền lại;
2. Hút huyền phù tế bào bị loại bỏ bằng ống hút 1/2~1/3;
3. Thêm vào một lượng vừa phải cơ sở bồi dưỡng tươi mới, tiếp tục bồi dưỡng.
B5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)
1. Chuyển đình chỉ tế bào vào ống ly tâm;
2. 150 g ly tâm 5 phút, loại bỏ chất lỏng trong lớp trên;
3. Sử dụng các tế bào treo lại môi trường tươi;
4. Ống hút hấp thụ một lượng vừa phải huyền dịch tế bào, cho vào bình nuôi dưỡng mới, lại thêm vào một lượng vừa phải cơ sở nuôi dưỡng tươi mới, tiếp tục nuôi dưỡng.
Hoạt động đông lạnh tế bào
1. Ly tâm 1000 vòng/phút 5 phút để loại bỏ sự sạch sẽ. Thêm 1 mL huyết thanh treo lại tế bào, theo số lượng tế bào thêm huyết thanh và DMSO, nhẹ nhàng trộn đều, nồng độ DMSO cuối cùng là 10%, mật độ tế bào không thấp hơn 1 x 106/mL, mỗi ống lưu trữ đông lạnh lưu trữ 1 mL huyền phù tế bào, chú ý đến ống lưu trữ đông lạnh để đánh dấu tốt;
Đặt ống đông lạnh vào hộp làm mát chương trình, đặt trong tủ lạnh -80 ° C, sau ít nhất 2 giờ chuyển sang lưu trữ nitơ lỏng
BT-474/HR (kháng trastuzumab Hesetin, tế bào ung thư vú ở người)
LAD2 (Tế bào mast của con người)
HEC1B (dòng tế bào ung thư nội mạc tử cung)
Tế bào biểu mô niêm mạc miệng người
Tế bào biểu mô phế nang của chuột L2
IEC-6 (tế bào biểu mô ẩn trong ruột non của chuột)
U251 Tế bào nhân glioma
LN-229 Tế bào u thần kinh đệm ở người (STR được xác định chính xác)
Tế bào tiền chất olidodendril ở chuột CG4
TR146 Tế bào ung thư thực quản phốt pho ở người
C28/I2 (sụn bình thường của con người)
H9c2 (2-1) (tế bào cơ tim chuột)
LHCN-M2 Nguyên bào cơ xương người
Dòng tế bào mast HMC-1 của con người
RSC96 tế bào Schwann chuột (xác định chính xác chi loài)
Tế bào biểu mô phế nang của chuột (MLE-12)
Tế bào BEAS-2B Tế bào biểu mô phế quản của con người
Nguyên bào sợi nướu của con người; HGF-1
tế bào ung thư tuyến buồng trứng người; Tế bào SK-OV-3
Tế bào gốc trung mô mỡ chuột
Tế bào gốc phôi chuột
Nguyên bào sợi hạ bì của con người
SCL-1; Tế bào ung thư da người (đã được xác định bởi STR)
Caki-2 Tế bào ung thư biểu mô tế bào thận người
Tramp-C1 (tế bào biểu mô ung thư tuyến tiền liệt ở chuột)
Tế bào sNF02.2 (ATCC số: ys3821) tế bào u sợi thần kinh loại 1 ở người
CAL-120 Tế bào ung thư vú người
tế bào ung thư đại tràng chuột, CT26
HEL 299 Tế bào sợi phổi bình thường của thai nhi
SW1463 (Tế bào ung thư tuyến trực tràng của con người)
DU4475 Tế bào ung thư vú ở người
ARH-77 Tế bào bạch cầu ở người
ECC10 Tế bào ung thư dạ dày người
HMCB Tế bào khối u ác tính ở người
HPAF-II Tế bào ung thư tuyến tụy ở người
HT29/219 Tế bào ung thư ruột kết ở người
HuH-1 Tế bào ung thư gan người
J82 Tế bào ung thư bàng quang người
K-562 Tế bào bạch cầu ở người
Caki-1 Tế bào ung thư biểu mô tế bào thận người
3T3-L1 Nguyên bào sợi phôi chuột
AU565 Tế bào ung thư vú ở người
BDCM Tế bào bạch cầu ở người
BEL7404 Tế bào ung thư gan người
BFTC-905 Tế bào ung thư bàng quang người
BT-549 Tế bào ung thư vú ở người
BxPC-3 Tế bào ung thư tuyến tụy của con người
COLO 201 Tế bào ung thư ruột kết
CCK-81 Tế bào ung thư ruột kết ở người
CT26.WT Tế bào ung thư đại tràng chuột
Dao Tế bào nguyên bào tủy não người
HCC1187 Tế bào ung thư vú người
HEC-1-A Tế bào ung thư tử cung ở người
HT115 Tế bào ung thư ruột kết của con người
HuH-7 Tế bào ung thư gan người
KMS-21BM Đa u tủy xương ở người
KMS-26 Tế bào đa u tủy ở người
KBS-42 Tế bào u tế bào tráng men đa dạng của não người
LU99 Tế bào ung thư phổi tế bào không nhỏ ở người
M059J Tế bào u tế bào tráng men đa hình não người
MDA-MB-157 Tế bào ung thư vú ở người
MOLM-16 Tế bào bạch cầu ở người
RPMI 8226 Tế bào đa u tủy ở người
SCH Tế bào ung thư dạ dày người
SNU-1041 Tế bào ung thư biểu mô tế bào vảy ở cổ người
SNU-1750 Tế bào ung thư dạ dày người
SNU-407 Tế bào ung thư ruột kết ở người
SUIT-2 Tế bào ung thư tuyến tụy
SW837 Tế bào ung thư trực tràng của con người
TE-9 Tế bào ung thư biểu mô tế bào vảy thực quản ở người
TUHR14TKB Tế bào ung thư tế bào thận người
UACC-3199 Tế bào ung thư vú ở người
AGS Tế bào ung thư dạ dày người
BT-20 Tế bào ung thư vú người
COV362 Tế bào ung thư buồng trứng người
NCI-H28 (tế bào u trung biểu mô ác tính ở người)
SK-ES-1 (tế bào Ewing's sarcoma ở người)
SNU-878 (tế bào ung thư gan người)
TGBC1TKB (ung thư túi mật người và tế bào ung thư đường mật ngoại gan)