Tế bào ung thư tuyến đại trực tràng của con người chủng kháng cisbo HCT15/DDP

Tên tế bào:Tế bào ung thư tuyến đại trực tràng của con người chủng kháng cisboHCT15 / DDP　

Số hàng:Sản phẩm WS155(HCT15)STR 鉴定）　　

quy cách1 × 10⁶cells/T25 chai nuôi cấy

Sử dụng: Chỉ sử dụng cho nghiên cứu khoa học

I. Giới thiệu tế bào

Lý do tế bàoCác chủng tế bào kháng thuốc DDP được xây dựng bởi các tế bào HCT15.

II. Đặc tính tế bào

1) Nguồn: Rectal Cancer

2) Hình thái: giống như tế bào biểu mô, tăng trưởng trên miếng dán

3) Nội dung:>Số lượng tế bào 1x106

4) Thông số kỹ thuật: chai T25 hoặc gói lưu trữ đông lạnh 1mL

5) Ứng dụng: Chỉ sử dụng cho nghiên cứu khoa học.

B5-03=giá trị thông số Ki, (cài 3)

1）Xem chi tiết hướng dẫn sử dụng.

Serum được khuyên dùng Sản phẩm FBS500-WP-002

2) Điều kiện nuôi: pha khí: không khí, 95%; CO2, 5%. Nhiệt độ: 37 độ C, độ ẩm buồng nuôi cấy là 70% -80%.

3) Dung dịch đông lạnh: 90% huyết thanh, 10% DMSO, được sử dụng ngay bây giờ.

Bốn,Xử lý tế bào

1) Phục hồi tế bào đông lạnh

Sẽ chứaCác ống lưu trữ đông lạnh của hệ thống treo tế bào 1 mL nhanh chóng lắc và tan băng trong bồn nước 37 ℃, được thêm vào ống ly tâm với môi trường 4-6 mL để trộn đều. Ly tâm 3-5 phút ở 1000RPM, loại bỏ chất lỏng, môi trườngCác tế bào treo lại. Đình chỉ tế bào sau đó được thêm vào một chai (hoặc đĩa) có chứa 6-8ml môi trường để nuôi cấy 37oC qua đêm. Sự tăng trưởng tế bào và mật độ tế bào được quan sát dưới kính hiển vi vào ngày hôm sau.

2) Di truyền tế bào: Nếu mật độ tế bào đạt 80% -90%, nuôi cấy di truyền có thể được thực hiện.

Đối với việc truyền tế bào dán tường có thể tham khảo các phương pháp sau:

1. Bỏ đi nuôi cấy, rửa sạch tế bào bằng PBS không chứa canxi, ion magiê 1 - 2 lần.

2. Thêm 0,25% (w/v) tryptan albase-0,53 mM EDTA trong chai nuôi cấy (T25 chai 1-2mL, T75 chai 2-3mL), đặt trong một tủ nuôi cấy 37 ℃ tiêu hóa trong 1-2 phút (các tế bào khó tiêu hóa có thể kéo dài thời gian tiêu hóa thích hợp), sau đó quan sát sự tiêu hóa của tế bào dưới kính hiển vi, nếu một phần lớn tế bào tròn và rơi ra, nhanh chóng lấy lại bàn điều hành, sau vài lần nhấp vào chai nuôi cấy thêm 3-4ml môi trường chứa 10% FBS để chấm dứt tiêu hóa.

3. Nhẹ nhàng đánh đều rồi hút ra, ly tâm 3 - 5 phút trong điều kiện 1000 vòng M, bỏ đi chất lỏng, bổ sung 1 - 2 ml chất lỏng nuôi cấy rồi thổi đều. Đình chỉ tế bào được chia thành chai T25 mới theo tỷ lệ 1: 2, thêm 6-8ml môi trường mới được cấu hình theo yêu cầu của hướng dẫn để duy trì sự phát triển của tế bào, truyền thừa tiếp theo được thực hiện theo tỷ lệ 1: 2~1: 5 theo tình hình thực tế.

Lời bài hát: Cell GenerationSau 1~2 lần vẫn có thể tăng sinh, có thể tăng nồng độ thuốc lên 0,5 ug/mL để tiếp tục nuôi cấy; Nếu các tế bào ngừng sinh sôi nảy nở trong quá trình này và ở trạng thái kém, cần giảm nồng độ thuốc (giảm một nửa nồng độ thuốc) hoặc nuôi cấy bằng môi trường không chứa thuốc đến mật độ tế bào khoảng 8 × 105/mL và thay thế bằng nồng độ thuốc cần thiết khi tăng trưởng tốt hơn.

3) Đóng băng tế bào: Sau khi nhận được tế bào, nên đóng băng một số hạt giống tế bào trong quá trình nuôi cấy 3 thế hệ đầu tiên để sử dụng trong các thí nghiệm tiếp theo.

dưới đâyVí dụ như chai T25.

1. Khi tế bào đông lạnh theo quá trình di truyền tế bào để thu thập các tế bào tiêu hóa tốt vào ống ly tâm, có thể sử dụng bảng đếm máu để xác định mật độ đông lạnh của tế bào. Mật độ đông lạnh được khuyến cáo cho các tế bào nói chung là 1 × 106~1 × 107 tế bào sống/ml.

1000rpm ly tâm 3-5min, loại bỏ trên rõ ràng. Sử dụng dung dịch đông lạnh tế bào được điều chế để treo lại tế bào, mỗi 1 ml dung dịch đông lạnh chứa 1 × 106~1 × 107 tế bào sống/ml được phân phối vào một ống đông lạnh để phân phối tế bào vào ống đông lạnh, đánh dấu tên, đại số, ngày tháng và các thông tin khác.

Lưu ý: Trong quá trình đóng băng tế bào, thuốc không thể được thêm vào.

2. Đặt các tế bào được đông lạnh trong hộp làm mát chương trình, -80 độ trong tủ lạnh qua đêm, sau đó chuyển vào thùng chứa nitơ lỏng để lưu trữ. Đồng thời ghi lại vị trí của các ống lưu trữ đông lạnh trong các ống ni - tơ lỏng để tra cứu và sử dụng sau này.

Tế bào ung thư tuyến đại trực tràng của con người chủng kháng cisbo HCT15/DDP