- Thông tin E-mail
- Điện thoại
-
Địa chỉ
Số 1355 Lục Địa Đại Lộ Tô Châu Giang Tô
Tô Châu Qianshe Công nghệ sinh học Công ty TNHH
Số 1355 Lục Địa Đại Lộ Tô Châu Giang Tô
Tế bào lympho Hodgkin ở ngườiHs 611.T
Giới thiệu:Hs 611.T người Hodgkin lymphoma tế bào đến như mô hạch bạch huyết của một phụ nữ 48 tuổi bị bệnh Hodgkin. Một phần của dòng tế bào NBL. Dòng tế bào này được sản xuất hoặc đặc trưng bởi ATCC. Chúng tôi không đảm bảo rằng nó sẽ duy trì một hình thái cụ thể, độ tinh khiết hoặc bất kỳ đặc điểm nào khác sau khi truyền lại.
Mã hàng:Thông tin WS-S14667
quy cách:1 × 10⁶ tế bào/T25 chai nuôi cấy
I. Thông tin cơ bản về tế bào
- Nguồn gốc tế bào: hạch bạch huyết
- Hình thái tế bào: giống bạch huyết, tăng trưởng trên tường, tăng trưởng lơ lửng
- Nội dung tế bào:>1 × 10⁶ tế bào/chai
- Thông số kỹ thuật đóng gói: Chai nuôi cấy T25/Ống lưu trữ đông lạnh 1mL
- Sử dụng sản phẩm: chỉ dành cho nghiên cứu khoa học,Không được sử dụng như một sản phẩm điều trị cho bệnh động vật hoặc con người.
B5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)
1. Môi trường
Môi trường DMEM; 10% huyết thanh bò thai; 1% đôi kháng
Serum khuyến cáo:Sản phẩm WinSera FBS500 - WP-002
2. Điều kiện nuôi dưỡng
- Pha khí: 95% không khí+5% CO₂ Nhiệt độ: 37 ℃; Độ ẩm buồng nuôi cấy: 70% - 80%
3. Lưu trữ và lưu trữ đông lạnh
- Dung dịch đông lạnh: 90% huyết thanh bò thai+10% DMSO (hiện tại)
- Điều kiện bảo quản: Nitơ lỏng được bảo quản lâu dài
Hai, Quy trình xử lý tế bào nhiệt độ bình thường trong ngày
Bước: Nhận hàng và kiểm tra
· Thực hiện các bước 1, 2 của một phần (quy trình chung).
Bước 2: Thay thế môi trường và thu thập tế bào
· Phía sau chai khử trùng, mở nắp trong bàn làm việc siêu sạch.
· Thay thế phương tiện truyền thông được tặng kèm theo hàng hóa.
Đặc biệt chú ý: nếu tìm thấy nhiều tế bào lơ lửng dưới kính hiển vi, tất cả các môi trường trong chai cần được chuyển sang ống ly tâm vô trùng (ví dụ: 1200rpm, 5 phút) để thu thập các tế bào và loại bỏ môi trường cũ.
· Sau khi hoàn thành việc thay thế hoặc thu thập, đặt chai nuôi cấy vào hộp và tiếp tục để yên trong 2-3 giờ.
Bước 3: Xử lý sau khi ngồi (theo mật độ tế bào)
Mật độ tế bào |
Giải pháp xử lý |
Mật độ > 80% |
Tiến hànhTruyền thừa. Đề nghị tỷ lệ thế hệ1:2 đến 1:3Không chắc vui lòng liên hệ với bộ phận hỗ trợ kỹ thuật. |
Mật độ < 80% |
Tiếp tục nuôi dưỡng. Hãy chắc chắn rằng nắp được tháo ra hoặc sử dụng nắp thoáng khí để đảm bảo trao đổi khí. |
Tế bào lơ lửng |
Cần ly tâm thu thập toàn bộ tế bào trong môi trường nuôi cấy, dùng môi trường nuôi cấy mới treo lại rồi tiếp tục nuôi cấy. |
Số lượng lớn tế bào dán tường nổi |
Sau khi các tế bào được thu thập bằng máy ly tâm, có thể thử chuyển giao tiêu hóa trong ống ly tâm (xem điều trị đặc biệt bên dưới) hoặc liên hệ với hỗ trợ kỹ thuật ngay lập tức. |
Ba, Các bước vận hành di động
A. Di truyền tế bào dán tường
1. Chuẩn bị: Hút bỏ cơ sở bồi dưỡng cũ.
2. Rửa sạch: từ từ thêm PBS và các chất tẩy rửa khác dọc theo thành bên của chai nuôi cấy, hấp thụ và loại bỏ huyết thanh dư sau khi lắc nhẹ.
3. Tiêu hóa: Thêm enzyme yi nóng (như T25 cộng với 1ml) và lắc nhẹ để enzyme yi bao phủ tất cả các tế bào.
4. Ủ: tiêu hóa ở nhiệt độ phòng trong khoảng 2 phút (thời gian thay đổi tùy theo tế bào).
Quan sát: Quan sát dưới kính hiển vi cho đến khi ≥90% tế bào tròn và rụng. Nếu không đạt được, có thể kiểm tra mỗi 30 giây một lần.
6. Chấm dứt: Khi sự phân hủy của tế bào được tách ra, ngay lập tức thêm một môi trường làm nóng trước gấp đôi khối lượng enzyme yi để chấm dứt tiêu hóa.
7. Thổi: Nhẹ nhàng thổi các bức tường chai với pipet để các tế bào rơi ra và phân tán thành đình chỉ tế bào đơn.
8. Ly tâm: chuyển đình chỉ tế bào sang ống ly tâm, ly tâm 200 × g trong 3-5 phút, loại bỏ.
9. Treo lại so với tiêm chủng: kết tủa với một lượng nhỏ tế bào treo lại của môi trường tươi, pha loãng theo tỷ lệ thích hợp, tiêm vào chai nuôi cấy mới.
10. Nuôi cấy: Đặt vào hộp nuôi cấy. Nếu sử dụng nắp bình thường, cần phải vặn nắp để trao đổi khí.
B. Di truyền tế bào lơ lửng
1. Thu thập và ly tâm: Chuyển toàn bộ huyền dịch tế bào sang ống ly tâm, ly tâm 1000 vòng/phút, bỏ đi.
2. Treo lại: Thêm 1-2ml môi trường tươi, treo lại tế bào nhẹ nhàng.
3. Tiêm chủng: Truyền dịch đình chỉ tế bào đến chai T25 mới theo tỷ lệ 1: 2 và bổ sung tổng lượng môi trường lên 5-8ml.
4. Bồi dưỡng: Cho vào hộp bồi dưỡng tiếp tục bồi dưỡng.
Bốn, Điều trị vấn đề đặc biệt: các tế bào dán tường rơi ra trong quá trình vận chuyển
Một phần của các tế bào dán tường không chắc chắn sẽ rơi ra trong quá trình vận chuyển, là một hiện tượng bình thường, được xử lý theo các bước sau:
1. Thu thập: Chuyển tất cả môi trường trong chai vào ống ly tâm vô trùng, ly tâm (1200rpm, 3-5min) được loại bỏ.
2. rửa: treo lại các tế bào với PBS và loại bỏ PBS một lần nữa ly tâm (1200rpm, 3-5 phút).
3. Tiêu hóa: thêm khoảng 1ml enzyme 0,25% yi, trộn đều nhẹ nhàng (không thổi mạnh), cho vào hộp nuôi cấy để tiêu hóa trong 1-2 phút.
4. Chấm dứt và phân tán: Sau khi lấy ra nhẹ nhàng thổi làm cho tế bào phân tán, nhanh chóng thêm vào môi trường 3 - 5 ml để chấm dứt tiêu hóa, ly tâm (1200 vòng/phút, 3 - 5 phút) bỏ đi.
5. Treo nặng so với tiêm chủng: Thêm 5 ml treo nặng môi trường, tiêm theo tỷ lệ vào chai/đĩa mới.
6. Quan sát: Quan sát dưới gương. Nếu tế bào là một hoặc chỉ có 3-5 tế bào nhỏ, nó có thể được nuôi cấy bình thường và phát triển trên tường. --
tình hình |
Chính sách xử lý |
Điều kiện |
Tình trạng tế bào kém/Tỷ lệ sống thấp |
Phát lại có thể thương lượng |
Ngày nhận hàngChụp ảnh và liên hệ với công nghệHỗ trợ bán hàng. |
Ô nhiễm vi sinh |
Miễn phí gửi lại |
Nhận hàngTrong vòng 24 giờCung cấp ảnh rõ ràng (hình thức chai chưa mở và trạng thái dưới gương). |
Ô nhiễm Mycoplasma |
Miễn phí gửi lại |
Nhận hàngtrong vòng 48 giờXét nghiệm dương tính.Chú ý: Làm sạch và lưu trữ đông lạnhKết quả xét nghiệm sau 48 giờ là không hợp lệ. |
Rò rỉ chất lỏng |
Phát lại có thể thương lượng |
Ngày nhận hàngChụp ảnh kỷ lục. Giữ lại môi trường chai gốc để nuôi cấy trong một thùng chứa vô trùng, nếuÔ nhiễm trong 3 ngày。 |
Lỗi hoạt động của khách hàng |
Không gửi lại miễn phí |
- |
Sử dụng thuốc thử ngoại sinh không được khuyến cáo |
Không gửi lại miễn phí |
- |
Chết tế bào không có vấn đề về chất lượng |
Có thể yêu cầu mua lại giá thấp |
Trong vòng một tháng kể từ ngày nhận hàng. |
Dữ liệu thí nghiệm không lý tưởng |
Không lùi/Đổi |
- |
Lời khuyên quan trọngBất kỳ vấn đề bất thường nào,Thời gian chụp ảnhVà liên hệ với chúng tôi là chìa khóa để có được hỗ trợ sau bán hàng.