HEC-1-B Tế bào ung thư tuyến nội mạc tử cung của con người

Tên sản phẩm:HEC-1-B Tế bào ung thư tuyến nội mạc tử cung của con người

Thương hiệu: Shanghai Yanzun Biology
Số lượng tế bào: 1x10^6 cells
Sức sống tế bào: 95% (Viability by Trypan Blue Exclusion)
Di truyền tế bào: 1: 4~1: 6 di truyền; Thay đổi chất lỏng 2~3 lần mỗi tuần
Điều kiện phát triển: pha khí: không khí, 95%; CO2 5%; Nhiệt độ: 37 ℃
Xét nghiệm tế bào: tế bào không chứa HIV-1, HBV, HCV, Mycoplasma, vi khuẩn, nấm men và nấm
Điều kiện nuôi trồng: DMEM (đường cao)+10% FBS+1% P/S; 37℃，5% CO2
Phương pháp truyền: Đề nghị 1: 2-1: 3 Hai ngày thay đổi chất lỏng một lần
Điều kiện đông lạnh: Không có huyết thanh tế bào đông lạnh
Điều kiện đóng băng: 90% FBS+10% DMSO
Tế bào đông lưu trữ: Nitơ lỏng đông lưu trữ

Tế bào để xử lý sau

Các tế bào sau khi được nuôi dưỡng trong chai đến trạng thái tốt thì đổ đầy dịch nuôi cấy và bịt kín miệng chai là cách vận chuyển tế bào. Sau khi nhận được tế bào trở lại phòng thí nghiệm của mình, trước tiên mở bao bì bên ngoài ra, dùng75% cồn phun toàn bộ chai khử trùng và đặt trong bàn siêu sạch, hoạt động vô trùng nghiêm ngặt,Tủ nuôi cấy đứng2-4 giờ. quan sát dưới gương: không vượt quáỞ mức độ hội tụ 80%, chất lỏng nuôi cấy có thể được đóng chaiThu thập vào ống ly tâm, tham giaMôi trường 6ml, đặt vàoNuôi cấy hộp ấp 37 độ C, 5% CO2; Hơn 80% độ hội tụ, tùy theo tình huống truyền lại hoặc đông lạnh, thao tác cụ thể xem trình tự nuôi dưỡng tế bào.（Chú ý gửi hàng là bình bồi dưỡng kín, cho vào hộp bồi dưỡng bồi dưỡng nhớ vặn nắp bình bồi dưỡng, sau khi truyền đời đề nghị một bình dùng cơ sở bồi dưỡng bên trong bình gốc, một bình khác dùng cơ sở bồi dưỡng tự mình phối.）

HEC-1-B Tế bào ung thư tuyến nội mạc tử cung của con ngườiCác bước nuôi dưỡng

Một,Tế bào hồi sức: sẽ chứaCác ống lưu trữ đông lạnh của hệ thống treo tế bào 1 mL nhanh chóng lắc và tan băng trong bồn tắm nước 37 ℃, trộn đều với môi trường 5 mL. Ly tâm trong 5 phút ở 1000RPM, loại bỏ chất lỏng, bổ sung4 - 6 ml môi trường sau đó thổi đều. Sau đó, tất cả đình chỉ tế bào sau đó được thêm vào chai nuôi cấy để nuôi cấy qua đêm (hoặc đình chỉ tế bào được thêm vào)Trong đĩa 6cm) Bồi dưỡng qua đêm. Thay dịch vào ngày hôm sau và kiểm tra mật độ tế bào.

Hai,Di truyền tế bàoNếu mật độ tế bào đạt80 - 90%, có thể tiến hành bồi dưỡng truyền đời.

a）、 Đối với các tế bào dán tường, thế hệ có thể tham khảo các phương pháp sau:

1. Bỏ đi nuôi cấy, rửa sạch tế bào bằng PBS không chứa canxi, ion magiê 1 - 2 lần.

2. Thêm 1-2ml dung dịch tiêu hóa (0,25% Trypsin-0,53mM EDTA) trong chai nuôi cấy, đặt trong hộp nuôi cấy 37 ℃ để tiêu hóa 1-2min, sau đó theo dõi sự tiêu hóa của tế bào dưới kính hiển vi, nếu hầu hết các tế bào tròn và rơi ra, nhanh chóng lấy lại bàn điều hành, nhấn vài lần vào chai nuôi cấy và thêmTrên 5mlhàm10% huyết thanhMôi trường chấm dứt tiêu hóa.

3. Nhẹ nhàng thổi các tế bào, sau khi tách ra hút ra, ly tâm trong điều kiện 1000RPM trong 8-10 phút, loại bỏ chất lỏng, bổ sung 1-2mL nuôi cấy và thổi đều.

4. Bổ sung dịch nuôi cấy theo tỷ lệ 5 - 6 ml/lọ, chia dịch đình chỉ tế bào vào đĩa hoặc chai mới có chứa 5 - 6 ml dịch nuôi cấy theo tỷ lệ 1: 2.

b）、 Đối với các tế bào lơ lửng, di truyền có thể tham khảo các phương pháp sau:

Phương pháp 1: Thu thập tế bào, ly tâm trong điều kiện 1000RPM trong 8-10 phút, bỏ chất lỏng, bổ sung 1-2ml dung dịch nuôi cấy sau đó thổi đều, truyền dịch tế bào theo tỷ lệ 1: 2 đến 1: 5 vào đĩa hoặc chai mới có chứa 8ml môi trường.

Phương pháp 2: Có thể lựa chọn phương thức thay đổi một nửa, sau khi bỏ đi một nửa môi trường, treo các tế bào còn lại lên, truyền dịch tế bào theo tỷ lệ 1: 2 đến 1: 3 vào đĩa hoặc chai mới chứa 8ml môi trường.

PS:Nếu khách hàng nhận được2ml tế bào ống nhỏ, sau khi nhận được tế bào, khử trùng toàn bộ ống bằng cách phun rượu 75% và đặt vào bàn siêu sạch hoặc tủ an toàn, hoạt động vô trùng nghiêm ngặt; Chuyển các tế bào ống nhỏ sang chai nuôi cấy T25 hoặcĐĩa nuôi cấy 6 cm, trộn đều với khoảng 5 ml môi trường nuôi cấy, sau khi cho vào hộp nuôi cấy qua đêm thì kiểm tra mật độ tế bào: nếu mật độ không vượt quá 80%, thay dịch tiếp tục nuôi cấy, tùy theo tình hình truyền lại hoặc đông lạnh. Nếu mật độ vượt quá 80%, có thể truyền trực tiếp (phương pháp giống như trên).

Ba,Tế bào đông lạnh:1- Tên đề tài: Giải pháp nâng cao hiệu quả đầu tư phát triển kết cấu hạ tầng thương mại (

1, tế bào phát triển để che chai nuôi cấyỞ 80% diện tích, bỏ 25 cm2 dung dịch nuôi cấy trong chai, rửa tế bào bằng PBS một lần;

2, Thêm0,25% dung dịch tiêu hóa khoảng 1 ml vào chai nuôi cấy, nhìn dưới kính hiển vi đảo ngược, sau khi tế bào co lại và tròn, thêm dung dịch nuôi cấy để chấm dứt tiêu hóa, nhẹ nhàng thổi tế bào để nó rơi ra, sau đó chuyển huyền dịch vào ống ly tâm 15 ml, ly tâm 1000 vòng/phút;

3. Dùng lượng dịch đông lưu thích hợp để treo lại tế bào và đặt trong ống đông lưu;

4. Trước hết đặt ống lưu trữ đông lạnh tế bào vào.-20oC 1,5h, sau đó di chuyển đến -80oC

Một số tế bào liên quan như sau: