Bộ xét nghiệm ELISA kháng thể liên kết enzyme với Geta Virus

Bộ xét nghiệm kháng thể kết hợp enzyme Gaita Virus

Hướng dẫn sử dụng

Nguyên tắc phát hiện

Bộ dụng cụ này bao gồm một tấm enzyme, dấu ấn enzyme và các thuốc thử hỗ trợ khác của kháng nguyên virus protecta được bọc trước, khi thử nghiệm thêm huyết thanh đối chứng và mẫu được kiểm tra vào bảng enzyme, sau khi làm ấm nếu mẫu có kháng thể virus protecta, nó sẽ được liên kết với kháng nguyên trên bảng enzyme, sau khi rửa để loại bỏ các thành phần khác không liên kết; Tái bổ sung các dấu ấn enzyme, liên kết cụ thể với phức hợp kháng nguyên kháng thể trên bảng enzyme; Sau khi rửa để loại bỏ các dấu hiệu enzyme không liên kết, thêm chất lỏng cơ chất TMB vào lỗ, phản ứng với các liên kết enzyme để tạo thành các sản phẩm màu xanh, độ sâu và độ nông của màu sắc có liên quan tích cực đến hàm lượng kháng thể đặc hiệu trong mẫu; Sau khi thêm phản ứng chấm dứt dịch, sản phẩm chuyển sang màu vàng; Giá trị hấp thụ ánh sáng trong các lỗ phản ứng được xác định bằng máy đo enzyme ở bước sóng 450nm, tức là mẫu có chứa kháng thể Gaita hay không.

Thành phần Kit

Lưu trữ và ngày hết hạn

Bảo quản 2~8 ℃, có hiệu lực trong 12 tháng.

Sau khi mở nắp, hãy bảo quản tránh ánh sáng ở 2~8 ℃, tránh ẩm. Thời gian sử dụng là 2 tháng.

Dụng cụ áp dụng

Máy đo kích thước enzyme với bước sóng 450nm, thiết bị nhiệt độ không đổi 37 ℃, pipette vi lượng có thể điều chỉnh.

Chuẩn bị mẫu

1. Lấy toàn bộ máu động vật để chuẩn bị huyết thanh theo phương pháp thông thường, yêu cầu huyết thanh phải sáng, không tan máu, không ô nhiễm. Mẫu có thể được bảo quản ở 2-8 ℃ trong vòng 1 tuần, cần được bảo quản lâu dài ở -20 ℃.

2. Chất tẩy rửa tập trung nên được khôi phục lại nhiệt độ phòng trước khi sử dụng để làm cho lượng mưa hòa tan, sau đó pha loãng 20 lần với nước cất hoặc nước khử ion thành chất tẩy rửa làm việc (ví dụ: 19 phần nước cất hoặc nước khử ion cộng với 1 phần nước tẩy tập trung).

phương pháp kiểm tra

1. Đặt bộ dụng cụ ở nhiệt độ phòng trong 30 phút trước khi sử dụng, khôi phục lại nhiệt độ phòng.

2. Lấy số lượng cần thiết của thanh đánh dấu enzyme, thiết lập một lỗ cho mỗi đối chiếu âm tính và dương tính, thanh không sử dụng được niêm phong càng sớm càng tốt, 2~8 ℃ được bảo quản.

3. lỗ mẫu đầu tiên thêm 5ul để kiểm tra mẫu, sau đó thêm 95ul mẫu pha loãng, đầy đủ dao động trộn đều.

4. Lỗ đối chiếu âm tính, dương tính lần lượt thêm vào lỗ đối chiếu âm tính, dương tính 100 ml.

5. Trộn đều, đậy kín màng, ủ trong hộp nhiệt 37 độ C 30 phút.

6. Vứt bỏ chất lỏng bên trong lỗ, mỗi lỗ thêm 250ul dung dịch giặt làm việc, dùng phương thức trộn đều chấn động rửa sạch sau 60 giây vứt bỏ, lặp lại rửa 5 lần, sau đó vỗ khô chất lỏng.

7. 100 μl dấu enzyme cho mỗi lỗ, phản ứng tránh ánh sáng ở 37 ℃ trong 30 phút.

8. Vứt bỏ chất lỏng bên trong lỗ, mỗi lỗ thêm 250ul chất lỏng giặt làm việc, dùng phương thức trộn đều chấn động rửa sạch sau 60 giây vứt bỏ, lặp lại rửa 5 lần, sau đó vỗ khô chất lỏng.

9. Theo số lượng mẫu trộn chất lỏng màu A và chất lỏng màu B theo tỷ lệ thể tích bằng nhau để cấu hình chất lỏng làm việc cơ bản, bây giờ được sử dụng. Mỗi lỗ thêm 100ul, đặt 37 ℃ phản ứng tránh ánh sáng trong 10 phút, nếu tốc độ hiển thị màu tổng thể quá nhanh, có thể kết thúc hiển thị màu trước 5 phút, thời gian hiển thị màu * dài không quá 15 phút.

10. Mỗi lỗ cộng với chất chấm dứt 100 μl, trộn đều, xác định giá trị hấp thụ ánh sáng của mỗi lỗ (giá trị OD) ở 450nm.

Giá trị tham chiếu

Trong trường hợp thí nghiệm bình thường, OD đối chứng dương tính - OD đối chứng âm tính>0,2.

Giải thích kết quả kiểm tra

S/P=(mẫu OD-âm tính kiểm soát OD)/(dương tính kiểm soát OD-âm tính kiểm soát OD).

Kết quả được đánh giá là dương tính với S/P ≥ 0,4.

Kết quả được xem xét ở 0,2<S/P<0,4 có thể có hiệu lực kháng thể không đủ hoặc nghi ngờ nhiễm trùng.

Kết quả được đánh giá là âm tính với S/P<0,2.

Hạn chế của phương pháp thử nghiệm

1. Bộ dụng cụ này chỉ được sử dụng như một đánh giá sơ bộ về kháng thể Gaitavirus trong mẫu thử nghiệm định tính.

2. Bộ dụng cụ này chỉ dành cho mục đích nghiên cứu và không được sử dụng trong các thí nghiệm lâm sàng hoặc thử nghiệm trên người.

Lưu ý

1. Hoạt động thí nghiệm đòi hỏi phải đeo găng tay, mặc quần áo làm việc, nghiêm chỉnh kiện toàn và thực hiện chế độ cách ly khử trùng, tất cả các loại chất thải thí nghiệm nên được xử lý theo chất truyền nhiễm.

2. Chấm dứt chất lỏng là ăn mòn, nên tránh tiếp xúc với da và quần áo, nếu không cẩn thận tiếp xúc xin vui lòng rửa sạch ngay lập tức với nhiều nước máy.

3. Khi lấy tấm tiêu chuẩn enzym ra khỏi môi trường lạnh phải khôi phục lại nhiệt độ phòng mới có thể mở túi, tấm tiêu chuẩn enzym chưa dùng hết cần bỏ vào túi kín có chất hút ẩm để bảo quản.

4. Chất tẩy rửa cô đặc dễ kết tinh ở nhiệt độ thấp, khi sử dụng cần quay trở lại nhiệt độ phòng để hòa tan.

5. Các mẫu được sử dụng để phát hiện phải được giữ tươi.

6. Việc xác định kết quả thử nghiệm phải phụ thuộc vào việc đọc máy đo enzyme.

7. Các thành phần thuốc thử số lô khác nhau không được trộn lẫn.