- Thông tin E-mail
- Điện thoại
-
Địa chỉ
Số 85 đường Zhongshan, quận Yuzhong, Trùng Khánh
Trùng Khánh Zhengfanghe Công nghệ sinh học Công ty TNHH
Số 85 đường Zhongshan, quận Yuzhong, Trùng Khánh
ELISpot Pro: Human IL-4 (ALP) Kiểm tra IL-4 của con người
Nguyên lý thực nghiệm Mabtech Elispot
Thí nghiệm ELISPOT sử dụng một tấm 96 lỗ với màng PVDF (mèo: MSIPS 4510, Millipore) được bọc bằng kháng thể đơn dòng đặc hiệu (kháng thể không độc hại, không chứa nội độc tố và có ái lực cao) để bắt các cytokine được tiết ra bởi các tế bào.
Các tế bào và chất kích thích kháng nguyên được kiểm tra sau đó được thêm vào bên trong các lỗ của tấm nuôi cấy để nuôi cấy. Khi được kích thích bởi các chất kích thích, các tế bào T sẽ tiết ra các cytokine tương ứng trong khoảng thời gian tương ứng. Tại thời điểm này, cytokine bị bắt bởi các kháng thể trên màng.
Sau khi rửa sạch tế bào, các cytokine bị bắt có thể liên kết với kháng thể thứ hai được đánh dấu bằng biotin, sau đó liên kết với biotin bằng enzyme, tiến hành kết màu enzyme hóa học, có thể hình thành các đốm tròn cục bộ của màng (tất nhiên, cũng có thể sử dụng kháng thể thứ hai được đánh dấu bằng huỳnh quang, như vậy sẽ loại bỏ các phương pháp kết màu hóa học tiếp theo, và có thể phát hiện nhiều cytokine cùng một lúc), mỗi đốm tương ứng với một tế bào tiết ra cytokine ban đầu.
Thống kê số lượng đốm trên màng và chia cho tổng số tế bào được thêm vào lỗ ban đầu, có thể tính được tỷ lệ phần trăm tế bào dương tính.
MABTECHCông nghệ này có 3 ưu điểm sau:
Một: Độ nhạy cao. Chỉ cần một trong một triệu tế bào tiết ra cytokine có thể được phát hiện, tăng 2-3 bậc so với phương pháp ELISA truyền thống.
Hai: cấp độ tế bào đơn, phát hiện chức năng tế bào sống. ELISPOT trực tiếp kích thích các tế bào sống bằng kháng nguyên và phát hiện chức năng của chúng.
Ba: Hoạt động đơn giản và kinh tế, có thể được sàng lọc thông lượng cao. ELISPOT không có quá trình khuếch đại tế bào phức tạp, không sử dụng đồng vị, và theo các thí nghiệm tiêu chuẩn, một thí nghiệm có thể xử lý hàng trăm mẫu cùng một lúc, hiệu quả hơn nhiều so với các phương pháp khác.
ELISpot Pro: Human IL-4 (ALP) Kiểm tra IL-4 của con người
MABTECH: 3420-2APW-2 bao gồm:
Tấm phủ sẵn, mAb IL4-I (2 tấm trắng) Phát hiện mAb: IL4-II, ALP (150 μl)
Nền nền BCIP / NBT-plus (25ml)
Kiểm soát tích cực: Chống CD3mAb (CD3-2) (100 μl)