Công nghệ xác định trọng lượng phân tử LC-MS Chi tiết

Công nghệ xác định trọng lượng phân tử LC-MS Chi tiếtGiới thiệu chi tiết dịch vụ kỹ thuật phát hiện

Trong nghiên cứu khoa học đời sống và phát triển y sinh học, xác định chính xác trọng lượng phân tử là liên kết cơ bản của nhiều liên kết như xác định cấu trúc, kiểm soát chất lượng và nghiên cứu và phát triển thuốc. Thông tin trọng lượng phân tử là một trong những dữ liệu của bù kěhuòquē, cho dù đó là để xác nhận protein thể hiện đầy đủ hay xác minh độ tinh khiết của các phân tử nhỏ tổng hợp. Trong số nhiều kỹ thuật xác định trọng lượng phân tử, công nghệ kết hợp sắc ký lỏng-khối phổ (LC-MS) được sử dụng rộng rãi để xác định trọng lượng phân tử của các phân đoạn peptide, thuốc phân tử nhỏ và thậm chí cả các sản phẩm trao đổi chất do độ nhạy cao, khả năng ứng dụng rộng rãi và khả năng phân tích cấu trúc.

I. Tổng quan về các nguyên tắc kỹ thuật LC-MS

LC-MS là một hệ thống kết hợp giữa sắc ký lỏng (Liquid Chromatography) và công nghệ Mass Spectrometry (MS):

• Phần LC: Trước tiên tách các thành phần khác nhau trong mẫu bằng sắc ký, giảm nhiễu ma trận và cải thiện tính đặc hiệu phát hiện.

• Phần MS: Phát hiện lại tỷ lệ ion trên điện tích (m/z) thông qua ion hóa, phân tích khối lượng, do đó thu được thông tin trọng lượng phân tử của từng thành phần.

Các phương pháp ion hóa phổ biến bao gồm:

• ESI (ion hóa phun điện): Thích hợp để phân tích các hợp chất phân cực như hạt dẻ, polypeptide, nucleotide, v.v.

• APCI (Hóa học ion hóa áp suất khí quyển): Thích hợp cho các phân tử nhỏ dễ bay hơi.

• MALDI (Matrix-Assisted Laser Decorption Ionization): thường được sử dụng để quét trọng lượng phân tử nhanh chóng.

Tại Patei Pike Biotechnology, chúng tôi chủ yếu sử dụng phổ khối phun điện có độ phân giải cao (HR-ESI-MS), kết hợp với hệ thống sắc ký tối ưu để đạt được xác định trọng lượng phân tử jīngquè từ các phân tử nhỏ đến các sản phẩm sinh học phân tử cao.

II. Lợi thế của LC-MS trong xác định trọng lượng phân tử

1, độ nhạy cao và độ chính xác cao cùng tồn tại

Hệ thống LC-MS có thể phát hiện vật thể mục tiêu ở nồng độ thấp như pimol (pmol) hoặc thấp hơn và lỗi khối lượng thường được kiểm soát ở mức<5 ppm, đặc biệt thích hợp cho việc phân tích trọng lượng phân tử của các thành phần dấu vết trong các mẫu phức tạp.

2, Qiángdà tương thích với các mẫu phức tạp

So với các phương pháp truyền thống như SDS-PAGE hoặc phương pháp hấp thụ tia cực tím, LC-MS hầu như không bị nhiễu bởi tạp chất mẫu và có thể được sử dụng trực tiếp trong các hệ thống phức tạp như chất lỏng lysis tế bào, huyết thanh và lên men.

3. Thông tin liên quan đến cấu trúc có sẵn

Ngoài trọng lượng phân tử, MS cung cấp các manh mối cấu trúc như phân bố đồng vị, thông tin phân mảnh, sửa đổi sau dịch thuật (ví dụ: phosphoryl hóa, glycosyl hóa) và có lợi thế tự nhiên trong việc xác nhận cấu trúc phân tử.

III. Các kịch bản ứng dụng điển hình để xác định trọng lượng phân tử LC-MS

1, kiểm tra trọng lượng phân tử

Trong quá trình biểu hiện và tinh chế protein tái tổ hợp, xác nhận xem protein mục tiêu có còn nguyên vẹn hay không (chẳng hạn như có N-terminal, C-terminal vắng mặt, tín hiệu peptide không cắt) là liên kết QC thông thường. Trọng lượng phân tử jīngquè đo được bằng LC-MS cho phép xác định nhanh chóng liệu protein có phù hợp với trọng lượng phân tử lý thuyết hay không và liệu có những sửa đổi nhỏ hay không.

2, độ tinh khiết của thuốc phân tử nhỏ và xác nhận danh tính

LC-MS là một trong những phương pháp shǒuxuǎn xác nhận cấu trúc sau khi tổng hợp các phân tử thuốc. Bằng cách thu được đỉnh plasma [M+H]+, [M+Na]+khối lượng phân tử của đỉnh chính được xác định là phù hợp với cấu trúc mục tiêu, đồng thời theo dõi sự hiện diện của các sản phẩm phụ tổng hợp hoặc phân hủy.

3. Kiểm soát chất lượng tổng hợp polypeptide

Các polypeptide tổng hợp nhân tạo dễ bị thất bại trong việc mở rộng chuỗi hoặc thiếu dư lượng. LC-MS có thể đánh giá hiệu quả tính toàn vẹn của chuỗi polypeptide, cải thiện tỷ lệ thành công tổng hợp và độ tin cậy của các thử nghiệm tiếp theo.

B5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)

Trong hệ trao đổi chất, LC-MS không chỉ được sử dụng để định lượng mà còn đảm nhận nhiệm vụ sàng lọc ban đầu trọng lượng phân tử của các chất chuyển hóa đặc trưng hoặc các chất khác biệt, cung cấp cơ sở cho các phân tích cấu trúc tiếp theo như MS/MS.

IV. So sánh với các công nghệ đo trọng lượng phân tử khác

Kết luận: Mỗi phương pháp đều có kịch bản ứng dụng riêng, và LC-MS, với độ chính xác, khả năng ứng dụng và khả năng phân tích cấu trúc, đang dần trở thành phương pháp đo trọng lượng phân tử chủ đạo trong phân tích sinh học hiện đại.

B5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)

Tại Patek Pyke Biotechnology, chúng tôi đã xây dựng hệ thống phân tích LC-MS dựa trên nền tảng gāoduān như Thermo Orbitrap và Bruker QTOF và hỗ trợ các quy trình tiền mẫu và phân tích dữ liệu độc quyền, với những lợi ích cốt lõi như:

• Khả năng phát hiện một cửa từ các phân tử nhỏ đến các phân tử.

• 3-5 ngày làm việc để giao hàng, phù hợp với nhiều loại mẫu.

• Hỗ trợ các dịch vụ mở rộng như phân tích sửa chữa sau phiên dịch, nhận dạng đồng phân, v. v.

• Cung cấp dữ liệu thô+báo cáo zhuānyè để dễ dàng lưu trữ và xuất bản dự án.

Khi nghiên cứu sinh học đi sâu hơn và nghiên cứu dược phẩm tăng tốc, độ chính xác và độ sâu của thông tin trong xác định trọng lượng phân tử ngày càng được chú ý. LC-MS đang sử dụng khả năng phân tích Qiángdà của mình để hỗ trợ các nhà khoa học từ "có" đến "chuẩn", từ "lượng" đến "chất". Nếu bạn đang tiến hành xác định danh tính, xác minh phân tử nhỏ hoặc kiểm soát chất lượng polypeptide, chào mừng bạn đến liên hệ với Công nghệ sinh học Patek và chúng tôi sẽ cung cấp hỗ trợ dữ liệu mạnh mẽ cho dự án nghiên cứu của bạn với nền tảng công nghệ LC-MS của zhuānyè.

~~

Công nghệ sinh học Patei Pike

I. Giải trình tự protein

Công nghệ sinh học Patek Pyke phân tích trình tự dàbáizì bằng cách sử dụng khối phổ kế Obitrap Fusion Lumos mới ra mắt của Thermo và hệ thống giải trình tự thoái hóa Edman của Shimazu để cung cấp các dịch vụ phân tích trình tự protein dựa trên khối phổ bao gồm phân tích thành phần axit amin của dàbáizì, Nduāncèxú, Cduāncèxú và phân tích trình tự đầy đủ, cũng như dịch vụ phân tích trình tự đầu dàbáizì dựa trên sự thoái hóa Edman. Đối với các chuỗi lý thuyết chưa biết, các chuỗi protein được phân tích bằng cách cung cấp dịch vụ giải trình tự từ đầu dựa trên phương pháp giải trình tự từ đầu.

※ Lợi thế dịch vụ:

Áp dụng công cụ phổ khối tiên tiến hiện nay trên thế giới Obitrap Fusion Lumos;

2. Có thể đạt được độ che phủ 100% của trình tự protein mục tiêu được xác định;

3. Có thể xác định trình tự axit amin lên đến 70 ở đầu N của protein;

4. Mẫu có thể xác định nhiều dạng: dung dịch protein, dải protein PVDF;

5. Số lượng mẫu thấp: mẫu protein chỉ cần 5-10ug, có thể hoàn thành thử nghiệm;

6. Trình tự không bị ảnh hưởng bởi N-end đóng cửa, PEC và sửa đổi N-end như glycosyl hóa.

II. Nhóm học

Patek Pike Biotechnology sử dụng nền tảng phổ khối Orbitrap Fusion Lumos của Thermo Fisher kết hợp với Nano-LC để cung cấp một loạt các dịch vụ phân tích hệ thống phân tích hệ thống định lượng, hệ thống phân tích mục tiêu, hệ thống polypeptide, hệ thống protein biến đổi sau dịch thuật, v.v. Ngoài ra, Patek Park Biotechnology còn giới thiệu dịch vụ 4Ddánbáizì dựa trên timsTOF Pro, hỗ trợ các nghiên cứu về microsample proteomics, big sample group medicine và high flux modification.

※ Lợi thế dịch vụ:

1 . Phân tích protein định lượng thông lượng cao: phân tích thực nghiệm quy mô lớn trong nhóm kiểm soát đa, phát hiện ra các dấu hiệu sinh học mới;

2. Nhiều phương pháp đánh dấu khác nhau trong cơ thể và ngoài cơ thể, thích hợp để phân tích nhiều mẫu như mô, tế bào, máu;

3. Độ nhạy cao trong phân tích phổ khối và độ lặp lại cao của kết quả thí nghiệm;

4. Có thể phát hiện protein phong phú thấp hơn, phạm vi tuyến tính rộng;

5. Phân tích tin sinh học zhuānyè, phân tích chính xác hơn một cách có hệ thống.

B5-03=giá trị thông số Ki, (cài 3)

Công nghệ sinh học Patek Pyke sử dụng hệ thống dòng chảy khối phổ Fluidigm để phân tích kỹ thuật dòng chảy khối phổ đơn bào, sử dụng các dấu hiệu nguyên tố kim loại (thường là kháng thể đặc hiệu được đánh dấu bởi các nguyên tố kim loại) để đánh dấu các phân tử trên bề mặt và bên trong tế bào, sau đó tách các tế bào riêng lẻ bằng nguyên tắc dòng chảy, sau đó phân tích phổ khối lượng nguyên tử của các tế bào riêng lẻ bằng phổ khối plasma kết hợp điện cảm (ICP-MS), sau đó chuyển đổi dữ liệu phổ khối lượng nguyên tử thành biểu hiện phân tử tín hiệu trên bề mặt và bên trong tế bào.

※ Lợi thế dịch vụ:

1. Công nghệ tiên tiến, lấp đầy khoảng trống công nghệ

Công nghệ kháng thể đánh dấu kim loại được sử dụng để tránh các vấn đề với ít kênh huỳnh quang dòng chảy truyền thống và dễ ảnh hưởng lẫn nhau. Có thể mô tả đồng thời nhiều chỉ số ở cấp độ đơn bào, công nghệ sinh học Patek có thể phát hiện đồng thời 51 protein mục tiêu.

2. Số lượng phân tích lớn và chi phí thấp hơn

RNAseq đơn bào bị giới hạn bởi các yếu tố như chi phí, tổng số phân tích của tất cả các tế bào mẫu thường là khoảng 2x10^4, trong khi kỹ thuật phổ khối dòng (một mẫu) có thể phân tích ít nhất 10^5 tế bào một lần, đạt được sự gia tăng theo thứ tự độ lớn và chi phí không cao hơn RNAseq đơn bào.

3. Triển vọng ứng dụng lớn

① Kết quả phổ khối dòng chảy có thể cho những thay đổi trong quần thể tế bào, có triển vọng nghiên cứu lớn trong chẩn đoán lâm sàng, nghiên cứu cơ chế bệnh, v.v.

b) Kết hợp công nghệ nhãn kim loại với các công nghệ khác sẽ có hướng ứng dụng mới. Ngoài protein thông thường, công nghệ tế bào dòng chảy khối phổ có thể được sử dụng để sửa đổi sau khi dịch protein;

③ Có thể phát hiện sự sống còn của tế bào, kích thước tế bào, biểu hiện phiên mã mRNA, tốc độ tổng hợp DNA và hoạt động protease, v.v.

Ký hợp đồng cung cấp Phần mềm tính toán định lượng rủi ro ngoài khơi – Safeti Offshore cho Trung tâm nghiên cứu và phát triển An toàn và Môi trường Dầu khí (CPSE) (

Giải pháp một cửa cho phân tích miễn dịch polypeptide dựa trên khối phổ chính xác cao và khám phá kháng nguyên mới của Patek Biotechnology bao gồm chương trình xác định và làm giàu peptide miễn dịch độc quyền và nhạy cảm cao của chúng tôi. Chúng tôi có thể giúp bạn xác định và xác định hơn 10.000 polypeptide loại I và hơn 10.000 polypeptide loại II. Phân tích hệ miễn dịch peptide được thực hiện thông qua nền tảng phân tích hệ miễn dịch polypeptide thông lượng cao được tối ưu hóa của chúng tôi cho phép xác định và định lượng lặp lại từ vật liệu mẫu nhỏ. Dịch vụ này có thể được áp dụng cho các nghiên cứu quy mô lớn nhằm giúp các nhà khoa học tìm ra giải pháp cho ung thư, bệnh miễn dịch và bệnh truyền nhiễm, đào sâu vào các mục tiêu chưa biết.

V. Mô tả thuốc sinh học

Patei Pike dựa trên công nghệ quang phổ khối độ phân giải cao, MALDI TOF， Công nghệ phân tách sắc ký hiệu quả cao, cung cấp một loạt các sơ đồ phân tích dược phẩm sinh học, từ thành phần axit amin và phân tích cấu trúc cấp I của các sản phẩm sinh học như hạt dẻ, polypeptide, kháng thể, vắc-xin, đến phân tích độ biến thiên và độ tinh khiết của sản phẩm. Nhằm cung cấp dịch vụ phân tích thuốc sinh học chất lượng cao, giúp các nhà sản xuất thuốc sinh học nâng cao chất lượng thuốc sinh học.

Bảy nền tảng phát hiện công nghệ sinh học Patek

B5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)

Bắc Kinh Baitai Pike Công nghệ sinh học Công ty TNHH cam kết cung cấp dịch vụ zhuānyè như kiểm tra kiểm soát chất lượng và xác minh dự án cho ngành công nghiệp sinh học/dược phẩm và thiết bị y tế. Phòng thí nghiệm của công ty tuân theo các quy định và nguyên tắc hướng dẫn của NMPA, ICH, FDA và EMA, v.v., đã thông qua chứng nhận hệ thống chất lượng kép CNAS/ISO9001, thiết lập hệ thống chất lượng hoàn chỉnh, sao lưu dữ liệu nóng/lạnh, xác minh định kỳ/thời gian thiết bị, theo dõi kiểm toán phần mềm, cung cấp cho khách hàng các giải pháp và dịch vụ kỹ thuật tích hợp, hỗ trợ nghiên cứu và phát triển thuốc mới, đăng ký kê khai thuốc và phát hành sản xuất.

1. Công ty áp dụng hệ thống kiểm soát chất lượng ISO9001, zhuānyè cung cấp dịch vụ phân tích phát hiện CRO dựa trên phổ khối;

2. Được công nhận bởi phòng thí nghiệm CNAS quốc gia, cung cấp cho khách hàng dịch vụ nghiên cứu chất lượng thuốc phù hợp với các quy định dược phẩm toàn cầu;

3. Phạm vi kinh doanh bao gồm hệ thống phân tích, polypeptide, hệ thống trao đổi chất, đặc tính dược phẩm sinh học, phân tích tế bào đơn, dòng chảy phổ khối đơn bào, phân tích đám mây tín hiệu sinh học cũng như phân tích tích hợp phổ chất sinh viên nhiều nhóm, v.v.

4. Bảy nền tảng kiểm tra kiểm soát chất lượng để đáp ứng nhu cầu dịch vụ một cửa của bạn;

5. Phục vụ 3000+doanh nghiệp, 10000+khách hàng lựa chọn;

6. Cam kết cung cấp cho bạn dịch vụ phân tích phổ sinh khối chất lượng cao!

Công nghệ xác định trọng lượng phân tử LC-MS Chi tiếtGiới thiệu chi tiết dịch vụ kỹ thuật phát hiện