Bộ xét nghiệm virus Catpest

Bộ xét nghiệm axit nucleic cho enterovirus (loại phổ quát)

Thông số kỹ thuật đóng gói) 25T/hộp & 50T/hộp

[Nguyên tắc kiểm tra]

Bộ dụng cụ này được thiết kế đặc hiệu mồi và đầu dò đèn hiệu phân tử cho gen này, có chứa trong mẫu được kiểm traDNATrong trường hợp này,PCRPhản ứng được thực hiện và phát ra tín hiệu huỳnh quang. Sử dụng công cụ đúngPCRTín hiệu huỳnh quang tương ứng trong quá trình theo dõi và đầu ra trong thời gian thực, để đạt được phân tích định tính của kết quả phát hiện.

(Thành phần chính)

[Điều kiện lưu trữ và ngày hết hạn]Tránh ánh sáng-20℃Bảo quản sau đây để tránh đóng băng và tan chảy lặp đi lặp lại, ngày hết hạn12Một tháng.

[Dụng cụ áp dụng]ABIBộ sưu tập,Sản phẩm Bio-RadBộ sưu tập,Sản phẩm Agilent Stratagene MXBộ sưu tập,Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-GeneĐịnh lượng huỳnh quang thời gian thực đa kênh, chẳng hạn như loạt BORIE Hàng ChâuPCRNghi thức.

[Yêu cầu mẫu]

1. Ví dụ như sử dụng mẫu vật ban đầu để kiểm tra. Mẫu vật (dịch não tủy, máu tĩnh mạch, dịch khớp của bệnh nhân; máu tĩnh mạch của động vật bị bệnh, sữa; khuẩn lạc, rêu, v.v.) nên là mẫu vật ban đầu được thu thập tươi và treo bằng nước khử trùng hoặc nước muối khử trùng.

2. Nếu cần thiết sau khi bổ sungPCRKiểm tra thì nên sử dụng dịch tăng khuẩn chọn lọc để tăng khuẩn cho tiêu bản gốc.

3. Sau khi thu thập mẫu vật, nếu không thể kiểm tra ngay lập tức, có thể đặt2～8℃Bảo quản lạnh qua đêm; Nếu cần bảo quản lâu dài, mẫu vật phải được đông lạnh.-20℃～-80℃。

[Phương pháp kiểm tra]

1. Chuẩn bị thuốc thử (khu vực chuẩn bị thuốc thử)

（1Lấy bộ dụng cụ ra khỏi tủ lạnh,Các tác nhân cần thiết cho thí nghiệm được lấy ra khỏi bộ dụng cụ, tan chảy hoàn toàn và trộn đều và ly tâm ngay lập tức để loại bỏ chất lỏng gắn vào thành ống.

（2) Tính toán số lượng phản ứng cần thiết cho thí nghiệm.n), và tính toán lượng tác nhân khác nhau cần thiết cho thí nghiệm đó dựa trên hệ thống phản ứng được hiển thị trong bảng sau.

n =Số lượng (1T）+Số lượng (1T）+toán Thuế(1T）+Số mẫu

（3) Thêm thuốc thử vào ống ly tâm vô trùng, trộn đều và ly tâm ngay lập tức. theo20 μL/Số lượng ống phân phối thuốc thửPCRỐng phản ứng.

（4) Đóng nắpPCRSau khi nắp ống phản ứng sẽPCRỐng phản ứng được chuyển đến khu vực xử lý mẫu. Các thuốc còn lại được đưa trở lại-20℃Tủ lạnh sau đây được bảo quản đông lạnh.

2.Chuẩn bị mẫu (khu vực xử lý mẫu)

VớiDNA / RNAChiết xuất bộ dụng cụ chiết xuất axit nucleic là được, hoạt động cụ thể theo hướng dẫn sử dụng bộ dụng cụ của nó

3.Thêm mẫu

Chuẩn bị ở trênPCRCác mẫu được xử lý riêng biệt được thêm vào ống mẫu phản ứng.DNAmỗi5 μlKhối lượng cuối25 μl/ống, che đậyPCRSau khi trộn đều nắp phản ứng, ly tâm tốc độ thấp ngay lập tức, chuyển sangPCRTrên dụng cụ. Kiểm soát âm tính và chăm sóc dương tính.5 μLBộ dụng cụ có đối chứng âm tính hoặc đối chứng dương tính, khối lượng cuối cùng là25 μl/ống, che đậyPCRSau khi trộn đều nắp phản ứng, ly tâm tốc độ thấp ngay lập tức, chuyển sangPCRTrên dụng cụ.

4. PCR（PCRVùng giãn nở (

（1- Khu vực xử lý mẫu đã sẵn sàngPCRỐng phản ứng, đặt trong định lượng huỳnh quang thời gian thựcPCRCác khe mẫu thiết bị tương ứng với vị trí và ghi lại thứ tự đặt.

（2REFERENCES [Tên bảng tham chiếu] (PCRMở rộng.

Ghi chú:ABIDòng huỳnh quangPCRKhông chọn khi cài đặtROXHiệu chỉnh, thiết lập lựa chọn nhóm dập tắtKhông có。

REFERENCES [Tên bảng tham chiếu] (

1.Đánh giá hiệu quả của bộ dụng cụ:

（1Disable (adj): khuyết tật (Scác đường cong mở rộng loại hoặcCtgiá trị≤35。

（2) Đối chiếu âm tính:CtGiá trị>38hoặc khôngCtCác giá trị, các đường là đường thẳng hoặc đường xiên nhẹ, không có thời gian tăng trưởng theo cấp số mũ.

2.Kết quả tiêu bản phán định:

（1• Kết quả xét nghiệm: sample test resultsCtgiá trị≤35Hoặc có thời gian tăng trưởng chỉ số rõ ràng.

（2Disable (adj): khuyết tật (CtGiá trị trong35～38Trong phạm vi. Kiểm tra lặp lại mẫu vật nên được thực hiện tại thời điểm này, chẳng hạn như kết quả thí nghiệm lặp lạiCtGiá trị vẫn còn35～38Trong phạm vi, có thời kỳ tăng trưởng chỉ số rõ ràng, thì phán định là dương tính, nếu không là âm tính.

（3Tiêu cực: Kết quả xét nghiệm mẫu vậtCtGiá trị>38hoặc khôngCtGiá trị.

(Giải thích kết quả kiểm tra)

(Những hạn chế của phương pháp kiểm tra)

Kết quả âm tính giả có thể xảy ra khi nồng độ axit nucleic được kiểm tra trong mẫu thử thấp hơn bộ dụng cụ này.

2. mẫu được kiểm tra trong quá trình thu thập, vận chuyển, lưu trữ và xử lý không đúng cách dễ dàng gây raDNASuy thoái mà sinh ra kết quả âm tính giả.

3. mẫu trong quá trình thu thập, vận chuyển, lưu trữ và xử lý xảy ra ô nhiễm chéo, sau đó dễ dàng có được kết quả dương tính giả.

REFERENCES [Tên bảng tham chiếu] ( Giới hạn kiểm tra sản phẩm là10³Bản sao / mlSản phẩmCV của bạngiá trị≤3%。

[Lưu ý]

1. Các phòng thí nghiệm sử dụng bộ dụng cụ này phải được quản lý chặt chẽ theo các quy tắc quản lý phòng thí nghiệm kiểm tra mở rộng gen có liên quan được ban hành bởi các bộ phận liên quan của quốc gia;

2. Để tránhSản phẩm RNAphân hủy, quá trình xử lý mẫu phải được thực hiện trong0-4℃Hoạt động trong điều kiện và kiểm tra trên máy bay ngay sau khi hoàn thành thí nghiệm; Thiết bị tiêu hao được sử dụng trong quá trình xử lý mẫu phải được xử lý không có ribozyme;

3. Tất cả các mặt hàng trong khu vực là đặc biệt và không được sử dụng chéo để tránh ô nhiễm; Sau khi phát hiện, bàn làm việc nên được làm sạch ngay lập tức;

4. Khi hấp thụ chất lỏng phản ứng, nên cố gắng tránh tạo bọt khí; trênPCR Trước máy, cần chú ý kiểm tra xem mỗi ống phản ứng có được che kín hay không, để tránh sự bốc hơi của chất lỏng gây ra kết quả không chính xác;

5. Bộ dụng cụ Tất cả các tác nhân nên được trộn đều và tan chảy đầy đủ ở nhiệt độ bình thường trước khi sử dụng và nên được ly tâm ngay lập tức;

6. Kiểm soát âm tính và dương tính được kết hợp trong bộ dụng cụ nên được chuyển hoàn toàn đến khu vực chuẩn bị mẫu trước khi sử dụng đầu tiên và được lưu trữ riêng;

7. Để ngăn chặn sự can thiệp huỳnh quang, nên tránh tiếp xúc trực tiếp với bàn tay trầnPCRphản ứng và nên tránh trongPCRBất kỳ dấu hiệu nào được thực hiện trên ống phản ứng;

8. Đầu hút đã được sử dụng trong quá trình phát hiện, nên được đánh trực tiếp vào Shengyu10%Trong bể chứa chất thải axit hypoclorơ, kết thúc kiểm tra.PCR Ống phản ứng, phải tránh mở nắp, và sau khi khử trùng với các vật phẩm bỏ đi khác thì vứt bỏ; Bàn làm việc và các vật dụng thí nghiệm nên được sử dụng thường xuyên 10%Axit hypoclorơ,75%Khử trùng rượu hoặc đèn UV;

Các thông số liên quan đến việc mở rộng thiết bị phải được thiết lập theo các yêu cầu liên quan của hướng dẫn này; Thuốc thử số lô khác nhau không thể trộn lẫn; và được sử dụng trong thời gian có hiệu lực.Sản phẩm chỉ dùng cho nghiên cứu khoa học。