- Thông tin E-mail
- Điện thoại
-
Địa chỉ
Đường Tử Bình, khu mới Phố Đông, thành phố Thượng Hải
Công ty TNHH Công nghệ sinh học Heyuan Li Kee (Thượng Hải)
Đường Tử Bình, khu mới Phố Đông, thành phố Thượng Hải
Mô tả sản phẩm
2 x Taq PCR Plus Trộn làPCRPhản ứng hỗn hợp trước, trong đó bao gồmTaq DNA Polymerase、dNTP, dịch giảm xóc phản ứng,tải nhuộmCác thành phần khác, khi sử dụng chỉ cần lấy đủ lượng sản phẩm này, thêm vào khuôn mẫu và dẫn, và thêm vàodH2OBổ sung khối lượng sao cho nồng độ hệ thống phản ứng là 1× Có thể tiến hànhPCRPhản ứng.PCRSản phẩm3'Kết thúc dải nhô raACơ sở, có thể được sử dụng trực tiếp sau khi tinh chếTừ: T/ANhân bản.
Sản phẩm sử dụng hệ thống enzyme phức tạpDNA của Taqpolymerase và3'5'Protein hoạt tính extracase hoạt động hiệp đồng, có thể đạt được sự mở rộng sản lượng cao dưới hệ thống đệm phản ứng tối ưu hóa, có thể mở rộng ≤Khoảng 7 kbcủaDNAmảnh và tương thích.30%-70% GCKhuôn mẫu hàm lượng. So với truyền thốngTaqHàm lượng (WT-Taq) Tăng tốc độ kéo dài2-4Gấp đôi, rút ngắn rõ rệt chu kỳ phản ứng.
Có hai loại thuốc nhuộm trong sản phẩm này,PCRKhông cần bổ sung thêm sau khi phản ứng hoàn tấttải bộ đệmBạn có thể trực tiếp tiến hành điện di, và trong quá trình điện di sẽ xuất hiện hai băng chỉ thị màu xanh và màu đỏ. Thuốc nhuộm không ảnh hưởngPCRTăng hiệu quả, nhưng cầnPCRSản phẩm thực hiện các thí nghiệm về hấp thụ ánh sáng, huỳnh quang và các phân tích quang học khác, được khuyến nghị trước khi phân tíchPCRSản phẩm được tinh chế hoặc sử dụng không nhuộmPCRDịch trộn sẵn.
Thông tin đặt hàng
Tên sản phẩm |
Mã hàng |
quy cách |
2 x Taq PCR Plus Trộn |
AN11L828 Sản phẩm: |
2 * 1ml |
2 x Taq PCR Plus Trộn |
Lên số: AN11L829 |
5 * 1ml |
Vận chuyển&Bảo quản
Vận chuyển băng xanh.-20℃ Bảo quản, ngày hết hạn24Một tháng.
Cách sử dụng
1. thông thườngPCRHệ thống phản ứng (hoạt động trên băng)
Thành phần |
20 μLHệ thống |
50 μLHệ thống |
Nồng độ cuối |
2 x Taq PCR Plus Trộn |
10 μL |
25 μL |
1 x |
正向引物(10 μM)(1) |
0.4-0.8μL |
1-2μL |
0.2-0.4μM |
phẳng trung trực (10 μM)(1) |
0.4-0.8μL |
1-2μL |
0.2-0.4μM |
DNAkhuôn mẫu(2) |
XμL |
XμL |
- |
ddH2O |
Đến 20μL |
Đến 50μL |
- |
(1) Nồng độ đề nghị cuối cùng của mồi là0.2~0.4μMKhi hiệu quả không tốt có thể ở0.1~1μMĐiều chỉnh trong phạm vi nồng độ;
(2) Động tác Balanced force technique ( 50 μLVí dụ về hệ thống: Bản mẫu là bộ genDNAKhi đó, lượng sử dụng được giới thiệu chung là10~200 ngKhi khuôn mẫu là plasmid hoặc virusDNAKhi đó, lượng sử dụng được giới thiệu chung là10 pg ~ 5 ngLượng khuôn mẫu quá nhiều dễ gây ra sự gia tăng không đặc hiệu.
2. Ba bướcPCRQuy trình phản ứng
Bước |
nhiệt độ |
thời gian |
Tiền biến tính(3) |
95℃ |
3 ~ 5 phút |
Việt |
95℃ |
30 giây |
ủ(4) |
55~65℃ |
30 giây |
Mở rộng(5) |
72℃ |
15 ~ 30 giây / kb |
30 ~ 35 chu kỳ |
||
Mở rộng cuối cùng |
72℃ |
5 phút |
3. Hai bướcPCRQuy trình phản ứng
Bước |
nhiệt độ |
thời gian |
Tiền biến tính(3) |
95℃ |
3 ~ 5 phút |
Việt |
95℃ |
30 giây |
Ủ và mở rộng(4) |
60~65℃ |
30 giây/kb |
30 ~ 35 chu kỳ |
||
Mở rộng cuối cùng |
72℃ |
5 phút |
(3) Điều kiện tiền biến tính này phù hợp với phần lớn các phản ứng khuếch đại, đối với một số mẫu phức tạp, ví dụ: dịch nấm, thuộc địa (đặc biệt là nấm men).PCRMở rộng, thời gian tiền biến tính có thể được kéo dài một cách thích hợp đến10 phútĐể nâng cao hiệu quả biến tính;
(4) Nhiệt độ ủ Vui lòng theo mồiTmCài đặt giá trị. Nếu cần thiết, bạn nên tìm nhiệt độ thích hợp * mà mồi kết hợp với mẫu bằng cách thiết lập gradient nhiệt độ. Ngoài ra, nhiệt độ ủ trực tiếp xác định độ đặc hiệu khuếch đại, chẳng hạn như phát hiện độ đặc hiệu khuếch đại kém, có thể tăng nhiệt độ ủ một cách thích hợp.
(5) Về tốc độ mở rộng, khi độ dài đoạn mục tiêu không vượt quáKhoảng 3 kbĐề nghị sử dụng15 giây / kbKhi mục đích dài hơnKhoảng 3 kbĐề nghị sử dụng30 giây/kb. Tốc độ kéo dài có liên quan đến mức độ phức tạp của mẫu, chẳng hạn như tỷ lệ gặp gỡ thấp có thể cải thiện thời gian kéo dài một cách thích hợp.
Lưu ý
1. Sản phẩm này được sử dụng trong nghiên cứu thực nghiệm khoa học, không được sử dụng trong chẩn đoán lâm sàng, điều trị và các lĩnh vực khác.
2. Trong sản phẩm này2 x Taq PCR Plus TrộnCần tan chảy * sử dụng sau khi đầy đủ, để ngăn chặn nồng độ ion không đồng đều.
3. Đề nghị xây dựng tất cả các thành phần phản ứng trên băng và cuối cùng thêm vào2 x Taq PCR Plus Trộn。
4. Mở rộng phân đoạn dài hơn với các mẫu gen đòi hỏi phải sử dụng chất lượng tinh khiết caoDNATemplate có thể cải thiệnPCRTỷ lệ thành công.
5. Sản phẩm này có thể được sử dụngTừ: T/ANhân bản. Vì sản phẩm này chứaTải nhuộm,PCRSản phẩm phải được tái chế sau khi cắt keo để loại bỏ hoàn toàn.Tải nhuộm。
6. Đề nghị sử dụng phương pháp nhuộm bong bóng để nhuộm điện di, phương pháp nhuộm keo sẽ dẫn đến sự phân tán của dải chỉ thị màu đỏ, không có lợi cho dải chỉ thị màu xanh, không ảnh hưởng đến dải chỉ thị màu xanh. Dải màu xanh trong1% TAETốc độ di chuyển trong bộ đệm xấp xỉ bằng1500 bpDải đỏ ở1% TAETốc độ di chuyển trong bộ đệm xấp xỉ bằng100 bp。
Đề xuất sản phẩm liên quan
EZ-PCRmạc đường ruột muqueuses digestives (AN11L227)
Hỗn hợp 2 x qPCR(SYBR Xanh(Số hàng:Hình ảnh AN19L918)