Aladdin RIPA Cracking (Mạnh mẽ) - Thường trực trong kho

bởi Aladdin R301899-100ml RIPAChất lỏng nứt (mạnh)

Aladdin RIPA Cracking (Mạnh mẽ) - Thường trực trong kho

Số hàng sản phẩm:R301899-100ml

Tên sản phẩm:RIPAChất lỏng nứt (mạnh)

Thông số kỹ thuật sản phẩm:100ml

Giới thiệu sản phẩm:

Đặc điểm kỹ thuật hoặc độ tinh khiết: Không có chất ức chế

Tên tiếng Anh:Giải pháp đệm RIPA Lysis (mạnh mẽ)

Nhiệt độ lưu trữ:2-8°Clưu trữ

Điều khoản vận chuyển: Vận chuyển túi đá

RIPAGiải pháp lysis là một mô truyền thống cũng như giải pháp lysis tế bào nhanh được sử dụng chủ yếu để trích xuất các protein hòa tan từ mô động vật và tế bào động vật có vú, có thể được sử dụng để lysis các tế bào dán tường và đình chỉ. Theo sức mạnh của chất lỏng nứt của nó có thể được chia thành ba loại mạnh, trung bình và yếu. Sản phẩm tương ứng có thể được lựa chọn theo nhu cầu thí nghiệm.RIPAChất lỏng nứt(mạnh)Có thể chiết xuất hiệu quả nhân tế bào, màng tế bào và protein bào tương, protein chiết xuất có thể áp dụng cho định lượng protein,Tây Blot、Thông tin IPChờ kiểm tra phân tích.

Các thông số của sản phẩm cụ thể tùy thuộc vào các thông số nhận được hướng dẫn sử dụng sản phẩm

Aladdin RIPA Cracking (Mạnh mẽ) - Thường trực trong kho

Cách sử dụng

(một)tế bào nuôi cấy dán tường

1.Lấy sản phẩm này đặt ở nhiệt độ phòng hòa tan trộn đều, theo yêu cầu thí nghiệm thêm chất ức chế enzyme.

2.Loại bỏ dịch nuôi cấy tế bào dán tường.PBS、NShoặc làm sạch mà không cần nuôi cấy huyết thanh1Thứ hai, tốc độ thấp ly tâm, vứt bỏ, lưu lại lắng đọng.

3.theo 6 Tấm lỗ Tham gia mỗi lỗ150～250μlTỷ lệ chất lỏng lysis có chứa chất ức chế enzyme, được thêm vào sản phẩm này. Pipette được thổi nhẹ nhàng để lysis và tế bào tiếp xúc đầy đủ. Đặt trên băng hoặc4℃lysis, thường là lysis hoạt động trên tế bào 1～Số 3Bên trong, tế bào sẽ bị phân giải. Thông thường 6 Mỗi lỗ tế bào tham gia150μlChất lỏng lysis là đủ, nhưng nếu mật độ tế bào rất cao có thể tăng liều lượng chất lỏng lysis một cách thích hợp. 200～250μl。

4.10000～12000g，4℃Ly tâm 5～10 phút(Nếu không có máy ly tâm nhiệt độ thấp, ly tâm ở nhiệt độ phòng cũng có thể)Lấy sạch.

5.Theo dõiSDS-Trang、phương TâyCác thao tác như lắng đọng miễn dịch và lắng đọng miễn dịch.

(hai)tế bào nuôi cấy lơ lửng

1.Sau khi lấy sản phẩm này hòa tan và trộn đều ở nhiệt độ phòng, cho thêm chất ức chế enzyme.

2.Các tế bào lơ lửng ly tâm tốc độ thấp, loại bỏ và thu thập lượng mưa.

3.Sử dụng ngón tay của bạn để làm cho các tế bào lỏng ra. theo 6 Mỗi lỗ tế bào tham gia150～250μlTỷ lệ chất lỏng lysis có chứa chất ức chế enzyme, được thêm vào sản phẩm này. Thông thường 6 Mỗi lỗ tế bào tham gia150μlChất lỏng lysis là đủ, nhưng nếu mật độ tế bào rất cao có thể tăng liều lượng chất lỏng lysis một cách thích hợp. 200～250μl. Dùng ngón tay búng nhẹ để phân giải đầy đủ tế bào, sau khi phân giải đầy đủ không nên có kết tủa tế bào mịn rõ rệt.

4.10000～12000g，4℃Ly tâm5～10 phút(Nếu không có máy ly tâm nhiệt độ thấp, ly tâm ở nhiệt độ phòng cũng có thể)Lấy sạch.

5.Tiếp theo.SDS-Trang、phương TâyCác thao tác như lắng đọng miễn dịch và lắng đọng miễn dịch.

(ba)Mẫu mô

1.Sau khi lấy sản phẩm này để hòa tan và trộn đều ở nhiệt độ phòng, thêm chất ức chế enzyme.

2.Đặt nhómZhiCắt thành những mảnh nhỏ, càng nhỏ càng tốt.

3.Lấy nitơ lỏng hoặc tủ lạnh đông lạnh30 phútCác tổ chức trên, nhanh chóng nghiền bằng nitơ lỏng, quá trình nghiền cố gắng kiểm soát ở mức tối đa.1～2 phútBên trong, để giảm sự suy thoái của protein.

4.Theo mỗi20 mgTổ chức tham gia 150～250μlTỷ lệ chất lỏng lysis, thêm chất lỏng lysis có chứa chất ức chế enzyme. trên băng hoặc4℃Phân tách 15～30 phút。

5.Bước 3、4 Bạn cũng có thể sử dụng quy trình sau: Theo từng20 mgTổ chức tham gia 150～250μlTỷ lệ chất lỏng lysis được thêm vào sản phẩm có chứa chất ức chế enzyme. san lấp mặt bằng thủy tinh hoặc máy nghiền mô cho đến khi nứt đầy đủ, quá trình này được kiểm soát càng nhiều càng tốt trong 1～2 phútBên trong, để giảm sự suy thoái của protein.

6.10000～12000g，4℃Ly tâm 5～10 phút(Nếu không có máy ly tâm nhiệt độ thấp, ly tâm ở nhiệt độ phòng cũng có thể)Lấy sạch.

7.Tiếp theo.Trang、phương TâyCác thao tác như lắng đọng miễn dịch và lắng đọng miễn dịch.

Lưu ý

1.Sau khi loại bỏ dịch nuôi cấy tế bào dán tường, nếu protein trong huyết thanh không bị can thiệp, có thể không cần rửa.

2.Nếu cracking không đầy đủ có thể làm tăng lượng chất lỏng cracking một cách thích hợp và nếu cần mẫu protein nồng độ cao, nó có thể làm giảm lượng chất lỏng cracking một cách thích hợp.

3.Nếu số lượng tế bào lớn hơn, cần phải được phân loại thành 50～100 triệu tế bào/Ống ly tâm, sau đó lại nứt ra. Các nhóm tế bào lớn khó phân giải đầy đủ hơn, và một lượng nhỏ tế bào dễ dàng tiếp xúc đầy đủ với tế bào, tương đối dễ phân giải đầy đủ hơn.

4.Nếu bản thân mẫu mô rất nhỏ, nó có thể được thêm trực tiếp vào cracking lỏng cracking sau khi cắt thích hợp, bằng cách mạnh mẽVorte×Làm cho mẫu nứt đầy đủ. Sau đó ly tâm tương tự được lấy ra, dùng cho thí nghiệm tiếp theo. Ưu điểm trực tiếp tách ra là tương đối thuận tiện, không cần sử dụng máy cân đối, khuyết điểm là không tách ra đầy đủ như sử dụng máy cân đối.

5.Trong điều kiện nhiệt độ thấp có thể xảy ra hiện tượng đục, nhưng37℃Tắm nước thúc đẩy sự hòa tan của nó và sẽ không ảnh hưởng đến hiệu quả sử dụng; Thời gian hòa tan không dễ dàng quá dài để tránh thất bại của các thành phần hiệu quả.

6.Trong các sản phẩm nứt thường xuất hiện một khối keo nhỏ trong suốt, là hiện tượng bình thường. Chất keo trong suốt này chứa bộ gen.DNAHợp chất. Không phát hiện và genDNATrong trường hợp liên kết với protein đặc biệt chặt chẽ, nó có thể được làm sạch trực tiếp bằng ly tâm để sử dụng trong các thí nghiệm tiếp theo; Nếu cần phát hiện và liên kết bộ gen với protein đặc biệt chặt chẽ, chất keo trong suốt này có thể bị phá vỡ bằng sonication và sau đó được làm sạch ly tâm để sử dụng trong các thí nghiệm tiếp theo.

7.Các bước hoạt động của lysis tế bào, nên được đặt trên băng hoặc4℃Tiếp tục đi.

Phạm vi sử dụng

Thích hợp cho nghiên cứu sinh học và y học nói chung

Thông tin đặt hàng sản phẩm:

R301899-100ml RIPAChất lỏng nứt (mạnh) 100ml