Nền

Vi khuẩn Gram âm (GNB) gây ra một trong những vấn đề nghiêm trọng nhất cho sức khỏe cộng đồng toàn cầu vì vi khuẩn này có khả năng kháng kháng sinh cao và có thể gây ra các bệnh truyền nhiễm như viêm phổi, nhiễm trùng máu, nhiễm trùng vết thương và phẫu thuật, viêm màng não. Nội độc tố vi khuẩn là thành phần quan trọng của màng tế bào GNB và khi nồng độ đủ cao sẽ gây ra phản ứng gây nhiệt (tức là sốt cao). Cục Quản lý Thực phẩm và Dược phẩm Hoa Kỳ (FDA) yêu cầu các nhà máy dược phẩm kiểm tra nội độc tố vi khuẩn (BET, Bacterial Endotoxins Testing), tập trung vào việc đo lường mức độ ô nhiễm GNB liên quan đến thuốc tiêm (WFI, Water For Injection), nguyên liệu dược phẩm, thuốc thành phẩm, thiết bị y tế, v.v. Phương pháp phát hiện nội độc tố của vi khuẩn chủ yếu có 3 loại sau: Phương pháp Gel-Clot, Phương pháp độ đục động (KTA, Kinetic Turbidimetric Assay), Phương pháp kết màu động (KCA, Kinetic Chromogenic Assay).

Thuốc thử (LAL, Limulus Amebocyte Lysate) được chiết xuất từ máu của chúng để phát hiện nội độc tố vi khuẩn. Khi endotoxin được phát hiện, dòng thác thuốc thử sẽ có một loạt các phản ứng enzyme khuếch đại sự xuất hiện của endotoxin. Khi endotoxin phản ứng với tác nhân gốc, endotoxin kích hoạt yếu tố đầu tiên trong liên kết cấp enzyme - yếu tố C, sau đó yếu tố C kích hoạt yếu tố B. Yếu tố B sẽ tác động lên protogen, làm cho nó trở thành enzyme đông máu. Bước phát hiện cuối cùng là đông đặc (dùng phương pháp gel), độ đục (dùng phương pháp độ đục động) hoặc kết màu (dùng phương pháp kết màu động).

Máy phát hiện nội độc tố vi khuẩn Sievers Eclipse

Máy phát hiện Eclipse bao gồm 3 phần sau: dụng cụ, tấm micropore điều khiển dòng chảy vi mô, phần mềm. Thiết bị là một máy phân tích hấp thụ với kiểm soát nuôi cấy nhiệt độ không đổi 37 ° C và công nghệ ly tâm. Tiêu chuẩn tham chiếu nội độc tố vi khuẩn (RSE, Reference Standard Endotoxin) và kiểm soát sản phẩm tích cực (PPC, Positive Product Controls) được đặt trước trong micropore, cho phép người dùng chạy tối đa 5 điểm đường cong tiêu chuẩn (ở nồng độ 50-0,005 EU/mL) với tối đa 21 mẫu và kiểm soát âm tính và dương tính. Phần mềm Eclipse hoạt động dễ dàng và tuân thủ các quy định của Chương 21 Bộ luật Liên bang, Phần 11 (21 CFR Phần 11).

Mục đích và phạm vi

Xét nghiệm LAL dễ bị xáo trộn. Mẫu có thể chứa các chất ức chế hoặc tăng cường phát hiện nội độc tố, do đó tạo ra kết quả giả. Kiểm tra tính phù hợp của phương pháp và kiểm tra ức chế/tăng cường đối với các mẫu thử là cần thiết để xác định bội số pha loãng (hoặc các phương pháp hiệu quả khác) cần thiết để khắc phục các nhiễu được mô tả ở trên.

Tài liệu ứng dụng này phác thảo cách thực hiện các xét nghiệm ức chế/tăng cường, cách chạy thử nghiệm này để chứng minh tính phù hợp của máy phát hiện nội độc tố vi khuẩn Sievers Eclipse và tính phù hợp của phương pháp cung cấp mẫu chạy. Thông tin phương pháp bao gồm: phương pháp thử nghiệm thuốc gốc được sử dụng, độ nhạy xét nghiệm (λ), bội số pha loãng đã được xác minh, nồng độ PPC (kiểm soát sản phẩm dương tính), chất pha loãng, tiêu chuẩn CV% (hệ số biến thể), và tỷ lệ phục hồi PPC trung bình.

Thông tin mẫu bao gồm: nồng độ mẫu (tính bằng mg/mL), giới hạn nội độc tố (EL, Endotoxin Limit; tính bằng EU/mL), bội số pha loãng hiệu quả tối đa (MVD, Maximum Valid Dilution), nồng độ hiệu quả tối thiểu (MVC, Minimum Valid Concentration), kết quả mẫu trung bình (tính bằng EU/mL), và điều kiện lưu trữ/xử lý mẫu.

Sievers Eclipse Vi khuẩn Endotoxin Detector: Giải pháp hiệu quả và tiện lợi

Máy phát hiện nội độc tố vi khuẩn Sievers Eclipse có thể chạy các xét nghiệm ức chế/tăng cường hiệu quả, cũng như quy trình xác minh 3 lô sản phẩm được đề cập ở trên. Máy phát hiện này áp dụng công nghệ ly tâm tiên tiến và phương pháp động, đơn giản hóa quy trình phát hiện nội độc tố. Những ưu điểm trên cho phép máy phát hiện này báo cáo kết quả nhanh hơn và chính xác hơn, đồng thời cung cấp phân tích định lượng và phân tích nhiễu chính xác.

Các ưu điểm của Sievers Eclipse Detector bao gồm:

• Hiệu quả cao: Chức năng tự động hóa làm giảm cài đặt thử nghiệm và các bước hoạt động của pipet, cải thiện thông lượng.

• Trực quan: Giao diện người dùng trực quan đơn giản hóa các bước hoạt động, giảm lỗi và cải thiện chất lượng dữ liệu.

• Tuân thủ: Máy kiểm tra này đáp ứng các yêu cầu nghiêm ngặt về kiểm tra dược điển và độ tin cậy của dữ liệu.

Sievers Eclipse Bacteria Endotoxin Detector là một tiến bộ công nghệ quan trọng trong lĩnh vực phát hiện nội độc tố vi khuẩn, cung cấp một giải pháp toàn diện, hiệu quả và tuân thủ cho nhu cầu xác minh sản phẩm liên tục, cải thiện an toàn và chất lượng sản phẩm.

Thêm nhiều nội dung đặc sắc nữa!