Chìa khóa để thanh lọc nguyên bào sợi chuột là loại bỏ các tế bào biểu mô, tế bào miễn dịch và các tế bào khác, các phương pháp phổ biến bao gồm phương pháp dán tường vi sai, tối ưu hóa gradient enzyme, sàng lọc môi trường đặc biệt và phân loại hạt miễn dịch.
Phương pháp dán tường vi sai được phân lập dựa trên sự khác biệt về tốc độ của nguyên bào sợi so với các tế bào dị ứng. Nguyên bào sợi dán tường nhanh hơn và có thể gắn vào thành chai nuôi cấy trong một thời gian ngắn sau khi chủng ngừa, trong khi các tế bào phức tạp như tế bào biểu mô dán tường chậm hơn. Do đó, sau khi truyền dịch đình chỉ tế bào vào một chai nuôi cấy trong một khoảng thời gian (chẳng hạn như 20-30 phút), các nguyên bào sợi đã dán vào tường trong khi các tế bào dị thường vẫn lơ lửng trong môi trường nuôi cấy. Lúc này, hút đi dịch thượng thanh, thay thế môi trường tươi mới, có thể thu được nguyên bào sợi tương đối tinh khiết.
Tối ưu hóa gradient enzyme thì bằng cách điều chỉnh loại và nồng độ enzyme tiêu hóa, chọn lọc tiêu hóa các tế bào tạp. Ví dụ, khi tiêu hóa kết hợp với collagen và pancrease, tỷ lệ collagen thích hợp có thể được tăng lên hoặc kéo dài thời gian tiêu hóa để loại bỏ các tế bào nhạy cảm với collagen như tế bào biểu mô. Đồng thời, sự mất mát của nguyên bào sợi có thể được giảm thêm bằng cách tiêu hóa gradient, tức là thu thập dịch tiêu hóa theo từng giai đoạn.
Sàng lọc môi trường chuyên dụng là việc sử dụng nguyên bào sợi để tách các nhu cầu khác nhau của các thành phần môi trường từ các tế bào dị ứng. Các yếu tố tăng trưởng và chất ức chế cụ thể đã được thêm vào một số môi trường nguyên bào sợi chuyên dụng để thúc đẩy sự phát triển của nguyên bào sợi trong khi ức chế sự tăng sinh của các tế bào dị bào.
Phân loại hạt miễn dịch là một phương pháp tinh khiết chính xác hơn. Bằng cách sử dụng kháng thể của các dấu hiệu đặc hiệu bề mặt của nguyên bào sợi (ví dụ: protein sóng, fibroconnectin, v.v.), sau khi kết hợp hạt nam châm với kháng thể, sau đó ủ với dịch đình chỉ tế bào, nguyên bào sợi có thể được tách ra khỏi các tế bào lộn xộn thông qua tác dụng từ tính.
Bài viết cuối cùng:
Bài viết tiếp theo:Thí nghiệm đông lạnh tế bào