High-speed Countercurrent Chromatography (HSCCC), một công nghệ sắc ký phân phối chất lỏng liên tục mới được phát triển bởi Tiến sĩ Ito của Viện Y tế Quốc gia Hoa Kỳ vào năm 1982, không giống như các công nghệ sắc ký khác, nó không cần bất kỳ tàu sân bay trạng thái rắn nào, vì vậy nó có thể tránh được các tác dụng phụ như ô nhiễm, bất hoạt, biến tính và hấp phụ không thể đảo ngược của mẫu do phản ứng của bề mặt chất mang pha rắn với mẫu. Đồng thời nó cũng có những ưu điểm như phạm vi áp dụng rộng, nhanh chóng, số lượng mẫu lớn, chi phí thấp và tỷ lệ thu hồi cao. Do đó, đã đạt được nhiều ứng dụng trong các lĩnh vực sinh học, y học, thực phẩm, vật liệu, mỹ phẩm và bảo vệ môi trường, đặc biệt là trong lĩnh vực tách và tinh chế các thành phần hoạt tính của các sản phẩm tự nhiên.

Sắc ký ngược dòng tốc độ cao, một phương pháp tách sắc ký ngược dòng được xây dựng trên một hệ thống cân bằng thủy động lực học một chiều, được phát hiện tình cờ trong khi nghiên cứu cân bằng thủy động lực học của ống quay. Khi ống xoắn ốc quay chậm, cả hai pha trong ống xoắn ốc được phân phối từ đầu này sang đầu kia. Khi một pha chuyển động được rửa sạch từ đầu này sang đầu kia, giá trị giữ lại của pha khác trong ống xoắn ốc là khoảng 50%, nhưng lượng giữ lại này sẽ giảm khi tốc độ dòng chảy của pha chuyển động tăng lên, làm cho hiệu quả tách giảm. Nhưng khi tốc độ quay của ống xoắn ốc được tăng tốc, sự phân bố của hai pha thay đổi. Khi tốc độ quay đạt đến phạm vi tới hạn, hai pha được tách ra dọc theo chiều dài ống xoắn ốc * trong đó một pha chiếm một phần của đầu, chúng tôi gọi giai đoạn này là đầu và một phần khác chiếm một phần của đầu đuôi, được gọi là giai đoạn cuối. Tốc độ cao ngược dòng sắc ký chính xác là sử dụng đặc điểm phân phối một chiều này của hai pha, ở tốc độ quay ống xoắn ốc cao, nếu nó được đưa vào giai đoạn đầu từ đuôi, nó sẽ đi qua giai đoạn đuôi và chuyển sang giai đoạn đầu, tương tự như vậy, nếu nó được đưa vào giai đoạn đuôi từ đầu, nó sẽ đi qua giai đoạn đầu và chuyển sang cuối ống xoắn ốc. Khi tách ra, một pha trong đó (pha cố định) được tiêm đầu tiên vào ống xoắn ốc, sau đó được bơm vào pha di chuyển từ đầu thích hợp, để nó mang mẫu phân phối vô hạn lần trong ống xoắn ốc. Tốc độ quay của thiết bị càng nhanh, giữ lại pha cố định càng nhiều, hiệu quả tách càng tốt và cải thiện đáng kể tốc độ tách, vì vậy nó được gọi là sắc ký ngược dòng tốc độ cao.

Tóm tắt lợi thế sản phẩm của sắc ký dòng chảy ngược tốc độ cao:

Vì thành phần và tỷ lệ của hệ thống dung môi có thể là vô hạn, về mặt lý thuyết, nó có thể phù hợp với việc tách mẫu trong bất kỳ phạm vi phân cực nào và độc đáo trong việc tách các hợp chất tự nhiên. Vì pha cố định trong ống Teflon là chất lỏng không cần chất mang pha rắn, mất hấp phụ do sử dụng chất mang pha rắn trong sắc ký rắn-lỏng có thể được loại bỏ, đặc biệt thích hợp để tách các chất phân cực.

2, hoạt động dễ dàng và dễ dàng để làm chủ: máy sắc ký dòng ngược tốc độ cao hoạt động đơn giản, yêu cầu tiền xử lý mẫu thấp, nâng thô chung có thể được thực hiện để chuẩn bị tách hoặc phân tích.

3, tỷ lệ phục hồi cao: không cần tàu sân bay pha rắn, loại bỏ tổn thất do sự hấp phụ và suy thoái không thể đảo ngược của mẫu trên tàu sân bay pha rắn, tỷ lệ phục hồi của mẫu lý thuyết có thể đạt được. Trong thí nghiệm chỉ cần điều chỉnh tốt điều kiện tách, thông thường đều có tỷ lệ thu hồi rất cao.

4, khả năng tái tạo tốt: nếu mẫu không có tác dụng hoạt động bề mặt mạnh, tính axit và kiềm không mạnh, ngay cả khi lấy mẫu nhiều lần, quá trình tách của nó vẫn ổn định, và khả năng tái tạo khá tốt.