QPix^?Hệ thống sàng lọc nhân bản vi sinh thông quaHạng nhấtCông nghệ để giảm các nhiệm vụ lặp đi lặp lại thủ công trong phòng thí nghiệm hoặc nhân tạo. Nó được sử dụng rộng rãi để sàng lọc các thư viện gen nhanh chóng, chính xác và hiệu quả. Theo tiêu chuẩn Quy tắc quản lý chất lượng sản xuất dược phẩm (GMP), một yêu cầu quan trọng trong sản xuất tác nhân sinh học là đảm bảo vô trùng để ngăn ngừa ô nhiễm chéo. Nghiên cứu này nhằm mục đích chứng minh tính vô trùng trong quá trình lựa chọn thuộc địa tự động và lát sàn bằng cách sử dụng hệ thống QPix 420. Hệ thống này có nhiều chức năng khử trùng, bao gồm tia cực tím để khử trùng nội bộ, trạm làm sạch chọn kim và sấy đèn halogen. Những đặc điểm này không chỉ đảm bảo tuân thủ các tiêu chuẩn GMP mà còn mang lại lợi ích kinh tế thông qua khả năng tái sử dụng của việc chọn kim. Trong mỗi lần chọn, chọn kim đi qua một số bước làm sạch, trong ba bồn rửaHoàn toànRửa sạch để loại bỏ dư lượng vi sinh vật, sau đó khử trùng bằng cách sấy khô halogen.

Ưu điểm:

Phương pháp:

Chọn thuộc địa bằng cách sử dụng các mẫu mô tả trong Bảng 1, loại kim nấm và quy trình khử trùng. Mỗi thí nghiệm bao gồmĐộc kimLỗ kiểm soát tiêm chủng, sau đó dùng tiêu diệt.Độc kimTiêm vào một lỗ khác (Hình 1, lỗ màu đỏ). Phân tích sự phát triển của vi khuẩn được thực hiện sau khi khuấy và nuôi cấy qua đêm ở 37 ° C trên tất cả các tấm đích (96 lỗ micropore). Dữ liệu này được lấy từ các nghiên cứu xác minh của một số hệ thống QPix 420 để đánh giá hiệu quả của chu trình khử trùng QPix dựa trên sự hiện diện của các mẫu sinh học sống động trong các lỗ kiểm soát (Hình 1, các lỗ màu xanh lá cây và đỏ tương ứng).

Kết quả:

Trong các thiết bị QPix khác nhau, có tổng cộng 497 lỗ kiểm soát được tiêm mà không bị nhiễm chéo (Bảng 2).

Phương pháp:

Dòng QPix 400 cũng tự động phủ mẫu lên khay chứa thạch. Các mẫu chất lỏng trong tấm micropore 96 lỗ có thể được chuyển đến bề mặt agar, do đó tự động phủ lên đến 96 mẫu trong 30 phút. Lớp phủ được thực hiện bằng cách sử dụng các thông số được liệt kê trong Bảng 3. Mỗi lần chạy sử dụng lỗ nguồn tiêm chủng (Hình 2, lỗ màu xanh lá cây) và lỗ nguồn môi trường LB tinh khiết (Hình 2, lỗ màu vàng). Mỗi thí nghiệm bao gồm một khu vực kiểm soát được khử trùng bằng một cây kim đã được phủ một mẫu sinh học trước đó và sau đó phủ lại khu vực này bằng môi trường LB (Hình 2, màu đỏ là khu vực kiểm soát). Sau khi nuôi cấy qua đêm ở 37 ° C, phân tích sự tăng trưởng của tấm cho tất cả các mục đích được thực hiện. Các mẫu sinh học có thể sống sót trong khu vực kiểm soát để đánh giá hiệu quả của chu trình khử trùng QPix.

kết quả

Đối với mỗi thiết bị QPix, tám khu vực kiểm soát đã được tiêm tổng cộng 80 khu vực và không có ô nhiễm chéo nào được phát hiện (Bảng 4).

Các thuật toán tiên tiến giúp xác định nhanh chóng và lựa chọn thông lượng cao các thuộc địa vi sinh vật với kiểu hình mong muốn. Lựa chọn đặc hiệu nấm được tối ưu hóa đảm bảo thu thập thuộc địa hiệu quả và chính xác với hiệu quả hơn 98%. Tính linh hoạt của hệ thống mô-đun QPix hỗ trợ mở rộng luồng nghiên cứu vi sinh học, loại bỏ hiệu quả nguy cơ ô nhiễm chéo.