Dịch vụ kỹ thuật tổng hợp và sửa đổi polypeptide

Tổng hợp polypeptide là một chuỗi tổng hợp pha rắn thường được tổng hợp từ đầu C (đầu carboxyl) đến đầu N (đầu amino). Quá trình tổng hợp polypeptide trước đây được thực hiện trong dung dịch được gọi là phương pháp tương hợp lỏng. Kể từ khi Merrifield phát triển thành công phương pháp tổng hợp polypeptide pha rắn vào năm 1963, với sự cải tiến liên tục và *, đến ngày nay phương pháp pha rắn đã trở thành một kỹ thuật phổ biến trong tổng hợp polypeptide và protein, cho thấy lợi thế của phương pháp tổng hợp pha lỏng cổ điển *, do đó giảm đáng kể khó khăn trong việc tinh chế từng bước sản phẩm. Tổng hợp polypeptide nói chung được chia thành hai loại: tổng hợp pha rắn và tổng hợp polypeptide pha lỏng.

Nguyên tắc công nghệ thí nghiệm:

Máy tổng hợp polypeptide với sự kết hợp rắn trở thành nguyên lý phản ứng, trong lò phản ứng thủy tinh chống cháy nổ kín làm cho axit amin theo thứ tự đã biết (trình tự, thường từ đầu C-carboxyl đến đầu N-amino) liên tục được thêm vào, phản ứng, tổng hợp, hoạt động cuối cùng có được chất mang polypeptide. Phương pháp tổng hợp cố định đã giảm bớt đáng kể độ khó tinh khiết của mỗi bước sản phẩm. Để ngăn chặn phản ứng phụ xảy ra, các chuỗi bên của các axit amin tham gia phản ứng được bảo vệ. Các đầu carboxyl là tự do và phải được kích hoạt trước khi phản ứng.

Quy trình vận hành thử nghiệm:

1, khử bảo vệ: Các cột và monomer được bảo vệ bởi Fmoc phải loại bỏ các nhóm bảo vệ amino bằng dung môi kiềm (piperidine).

Kích hoạt và liên kết chéo: Nhóm carboxyl của axit amin tiếp theo được kích hoạt bởi một chất kích hoạt. Các monome được kích hoạt được liên kết chéo với các phản ứng amino tự do để tạo thành các peptide

Chìa khóa. Bước này sử dụng một lượng lớn thuốc thử siêu tập trung để thúc đẩy phản ứng hoàn thành. Chu trình: Phản ứng hai bước này được lặp đi lặp lại cho đến khi quá trình tổng hợp hoàn tất.

3, rửa và deprotection: Polypeptide rửa khỏi cột, nhóm bảo vệ của nó được rửa sạch và deprotection bởi một deprotective (TFA).

Các loại sửa đổi polypeptide:

1. Công nghệ đánh dấu cuối C:

C-termainal (amidation hóa C)

Aldehyde (Aldehyde), Alcohols (Alcohols), pNA (P-Nitroanilide)

AMC、AFC、 Merchyl hóa (Cysteamide), estyl hóa (Ester), N-alkyl hóa (N-AlkyI Amides), v.v.

2, Công nghệ đánh dấu N-End:

Acetylated (Acetylated), Palmytolyl, HYNIC, Biotinylated, Br acetylated (Bromoacetylated)

Phản ứng chelating (DOTA, DTPA conjugated), formaldehyde (Formylated), tetradecyl, octadecyl hóa (Myristoylated) succinyl hóa, palmitic hóa, axit hóa táo, axit hóa chất béo, v.v. (Succinylated)

3. Sửa chữa đánh dấu huỳnh quang:

Sửa đổi kết thúc C: AFC, AMC, Dap (Dnp), Lys (Dye), pNA, Rh110

N端修饰: Bodipy-FL, Cy3, Cy5, Texas Red, 5-Tamra, 5-odoacetamido fluoresceinRhodamine 110 và Rhodamine B Luciferin, EDANS

FAM, FITC, MCA, Rox, Sulforhodamine 101, 5-TAMRA

4. Phản ứng vòng hóa:

Vòng đặc biệt (N->C or Head to Tail)

2 đến 2 Liên kết lưu huỳnh, 3 đến liên kết disulfide (S-S bond formation).Triulide formation Các sản phẩm tự nhiên hoạt động peptide cyclic-natural peptides

5. Sửa chữa giáp:

Methyl hóa chuỗi bên Lys(For),LysS(Me), Lys(Me)2, Lys(Me)3, Arg(Me)2 symmetrical, D-Tyr(Me),D-Tyr(Et)N Methyl hóa cuối (N-Me Arg, N-Me-Asp, N-Me-Glu, N-Me-Leu, N-Me-Nle, N-Me-Nva, N-Me-Phe, N-Me-S N-

Me-Ser, N-Me-Trp, N-Me-Thr, N-Me-Val)

6. Một số trang trí đặc biệt:

Các loại khớp nối (BSA, KL H conjugated peptides for antibody production), phosphoserine (Phosphoserine, Phosphotreonine, Phosphotyrosine), sulfated tyrosine or serine, MAPS (MultipleAntigenic Peptide), glycopeptides (Glycopeptides) PEG

Lưu ý thí nghiệm:

Khách hàng cung cấp:

1, chuỗi polypeptide, số lượng, độ tinh khiết và yêu cầu đặc biệt

2, Polypeptide đông khô có thể được bảo quản ở -20 độ hoặc ở nhiệt độ phòng

3, giải pháp peptide là không ổn định hơn nhiều so với hình thức đông khô, giải pháp nên được trung tính PH (5-7) -20 độ bảo quản.

4. Để tránh đông lạnh và tan chảy nhiều lần của mẫu,HạoChia thành các mẫu nhỏ.

Tiêu chuẩn giao hàng:

Đa dạng hoá, dữ liệu.

Khác:

Hầu hết các polypeptideXuanDung môi là nước bơm siêu tinh khiết, axit Z loãng hoặc nước amoniac cũng giúp hòa tan polypeptide kiềm hoặc axit tương ứng. Nếu các phương pháp này không hòa tan polypeptide, bạn nên sử dụng DMF, Urea, guanidiniam, chloride, acetonitnle để hòa tan.

ELISA Kit Thử nghiệm thế hệ miễn phí và báo giá thế hệ thử nghiệm