-
Thông tin E-mail
2892006396@qq.com
-
Điện thoại
18936878554
-
Địa chỉ
Phía tây tầng 2, tòa nhà C1, Khu công nghệ Hongfeng, Khu phát triển kinh tế và kỹ thuật Nam Kinh
Nam Kinh Lamber Aix Công nghệ sinh học Công ty TNHH
2892006396@qq.com
18936878554
Phía tây tầng 2, tòa nhà C1, Khu công nghệ Hongfeng, Khu phát triển kinh tế và kỹ thuật Nam Kinh

Cách sử dụng
1, Thế hệ cũ
(1) Các mô sau khi lấy phải được đặt trong chai lấy mẫu của chất bảo quản mô E được làm lạnh trước (2-8 ° C), nhanh chóng chuyển đến phòng thí nghiệm sạch để xử lý mô và phân tách tế bào, chụp ảnh và đăng ký thông tin.
b) Chuẩn bị một số đĩa nuôi cấy, thêm dung dịch đệm nuôi cấy thế hệ đầu tiên dự phòng 4 độ C.
(3) lấy mẫu chai khử trùng, đặt mô vào đĩa petri, sử dụng bộ đệm nuôi cấy ban đầu B sau khi rửa ba lần, sử dụng nhãn khoa jian hoặc dao phẫu thuật để cắt mô thành khối lượng khoảng 1-3mm3Một khối tổ chức.
(4) Tổ chức dùng người ung thư vú nguyên đại tổ chức tiêu hóa ye C tiêu hóa, 37 ℃ chấn động tiêu hóa 10-20 phút, (trong quá trình tiêu hóa có thể quan sát tình hình tiêu hóa bất cứ lúc nào).
(5) Sau khi lấy một lượng nhỏ chất lỏng và quan sát dưới kính hiển vi, nhiều tế bào đơn lẻ hơn hoặc các cụm tế bào dưới 70 um được quan sát dưới gương, bộ đệm nuôi cấy B gấp ba lần thể tích được thêm vào để chấm dứt tiêu hóa.
(6) Sử dụng màn hình với khẩu độ 100um để lọc, sau khi bộ lọc được thu thập, sau khi làm giàu 300g ly tâm trong 5 phút, chuyển sang Shangqing, thêm bộ đệm nuôi cấy ban đầu B để treo lại ly tâm.
B5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)bụng9495) Tấm ván treo.
(8) 24 lỗ tế bào nuôi cấy tấm làm ví dụ, mỗi lỗ pha chế 25ul mô keo hỗn hợp cho decking (hoạt động ở 4 ℃).
(9) Đặt một tấm nền văn hóa trải nhựa vào hộp văn hóa 37 ℃ trong 10-15 phút để tạo keo, thêm môi trường cơ quan ung thư vú của con người A (khôi phục nhiệt độ phòng) để nuôi cấy.
2. Nuôi cấy nội tạng
(1) Pipette Gun hút môi trường, thêm 1-2ml 4 ℃ Bộ đệm nuôi cấy nội tạng G vào mỗi lỗ 2 phút.
(2) Pipette Gun nhẹ nhàng thổi keo ma trận, thu thập trong ống ly tâm 15ml, để 10 phút ở 4 ℃. (Mỗi 6-8 lỗ là một nhóm)
(3) a: Số lượng cơ quan không đủ hoặc khối lượng nhỏ hơn: 5 phút ly tâm bỏ đi làm sạch, thêm một lượng vừa phải chất đệm nuôi cấy cấy ghép cơ quan G treo lại vào ống ly tâm 1,5 ml, 300 g 5 phút ly tâm bỏ đi chất lỏng để thực hiện bước 4.
b: Khi số lượng cơ quan lớn hơn hoặc khối lượng lớn hơn: ly tâm 5 phút để loại bỏ Thượng Thanh, thêm một lượng vừa phải dịch tiêu hóa truyền qua cơ quan D tiêu hóa 2-3 phút, thêm bộ đệm nuôi cấy nội tạng G để chấm dứt tiêu hóa, ly tâm 5 phút để loại bỏ hỗn hợp, thêm một lượng vừa phải dịch đệm nuôi cấy nội tạng G Đình chỉ lại vào ống ly tâm 1,5 ml, 300g ly tâm 5 phút để loại bỏ chất lỏng cho bước 4.
(4) Sau khi thu thập organoids, thêm keo ma trận treo lại, keo ma trận 25ul mỗi lỗ được đặt trong một tấm nuôi cấy tế bào 24 lỗ, đặt 10-15 phút trong hộp nuôi cấy để thêm 500ul môi trường organoids ung thư vú người A.
3, Cơ quan đông lạnh
(1) Pipette Gun hút môi trường, thêm 1-2ml 4 ℃ Bộ đệm nuôi cấy nội tạng G vào mỗi lỗ 2 phút.
(2) Pipette Gun nhẹ nhàng thổi keo ma trận, thu thập trong ống ly tâm 15ml, để 10 phút ở 4 ℃. (Mỗi 6-8 lỗ là một nhóm)
(3) Ly tâm 5 phút bỏ đi thanh lọc, thêm một lượng vừa phải chất đệm nuôi cấy nội tạng G một lần nữa treo lại, 300g ly tâm 5 phút bỏ đi chất lỏng.
(4) Thêm một lượng thích hợp chất lỏng đông lạnh cơ quan F, thổi nhẹ nhàng treo nặng, lấy 24 lỗ nuôi cấy tế bào làm ví dụ: mật độ là 2 lỗ đông lạnh 1 ống, mỗi ống thể tích 1,4 ml.
(5) Làm tốt thông tin đánh dấu, sau khi tiến hành chương trình hạ nhiệt, di chuyển vào nitơ lỏng để bảo quản lâu dài.
4, Phục hồi cơ quan
(1) Lấy 10ml dung dịch đệm nuôi cấy nội tạng G trong ống ly tâm 15ml.
(2) Các tế bào organoid đông lạnh được lấy ra khỏi bể nitơ lỏng và nhanh chóng được đặt trong nồi nước 37 ℃ để tan chảy.
(3) Trong quá trình tan chảy của bồn tắm nước, cần lắc nhẹ ống đông lạnh để đảm bảo dung dịch đông lạnh tan chảy trong vòng 1-2 phút.
(4) Nhanh chóng chuyển các tế bào organoid hòa tan sang ống ly tâm 15ml, sử dụng pipet nhẹ nhàng thổi 6-8 lần, 300g ly tâm 5 phút, sau đó loại bỏ chất lỏng thượng bì và thu thập kết tủa tế bào organoid. Thêm một lượng vừa phải bộ đệm nuôi cấy nội tạng G treo lại vào ống ly tâm 1,5ml 300g 5 phút ly tâm.
(5) Keo ma trận treo lại, keo ma trận 25ul mỗi lỗ được đặt trong một tấm nuôi cấy tế bào 24 lỗ, đặt 10-15 phút trong hộp nuôi cấy để tạo keo, thêm 500ul môi trường cơ quan ung thư vú của con người A.