- Thông tin E-mail
- Điện thoại
-
Địa chỉ
Thượng Hải Xingfa Thí nghiệm Thuốc thử Công ty TNHH, 6619 Chuansha Road, Chuansha Town, Pudong, Thượng Hải
Thượng Hải Starfa thử nghiệm thuốc thử Công ty TNHH
Thượng Hải Xingfa Thí nghiệm Thuốc thử Công ty TNHH, 6619 Chuansha Road, Chuansha Town, Pudong, Thượng Hải
Công ty KlenTaq-SEnzyme giải trình tự là các protein tái tổ hợp được biểu hiện và chuẩn bị bằng cách tinh chế nhiều bước.
Định nghĩa của activityĐơn vị hoạt động có nghĩa là trong 72℃xuống, Bộ đệm PCR 1 × AM1,30 phútBên trong sẽ 10 nmole dNTPSố lượng enzyme cần thiết để pha trộn một chất không hòa tan axit.đặc điểm
1. Đặc biệt phù hợp ddNTP Phản ứng pha trộn iso-modified nucleotide
2. So sánh chiều dài tổng thể Taq DNA polymerase, hoạt động của enzyme này giảm
Phạm vi áp dụng
ddNTP Luật chấm dứtDNA phương trình (Giải trình tự thế hệ)
Phương pháp mở rộng phản ứng pyrophosphate SNP Phân tích
Kiểm soát chất lượng
Kiểm tra QC nghiêm ngặt đảm bảo sản phẩm có hoạt tính và độ tinh khiết cao nhất.
Bộ đệm lưu trữ enzyme
20 mM Tris-HCl (pH 8,0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 0,5% Nonidet P40, 0,5% Tween20 và 50% glycerol.
Áp dụng ví dụ
Ví dụ như phản ứng sau: 50 mLtiêu chuẩn PCRHệ thống, chỉ để tham khảo. thực tế PCRCác điều kiện phải được tối ưu hóa dựa trên mẫu, mồi, kích thước mảnh mục đích để xác định các điều kiện phản ứng tốt nhất.
1)Xây dựng hệ thống phản ứng theo bảng
Thành phần nhóm |
thể tích/ mL |
Nồng độ cuối |
Bộ đệm PCR 10 × AM 1 |
5 |
1× |
dNTP(2,0 mM) |
5 |
0,2 mM |
Giới thiệu F(10 μM) |
1.5 |
0,3 μM |
Giới thiệuR(10 μM) |
1.5 |
0,3 μM |
Mẫu |
Có thể thay đổi* |
/ |
KlenTaq-SHạt chia organic (5U / μl) |
0.5 |
2.5U |
dH2O |
Có thể thay đổi |
/ |
tổng thể tích |
50 |
/ |
* Thông số sử dụng mẫu DNA (hệ thống phản ứng 50μl):
Bộ gen ngườiDNA100-1000 ng ; DNA bộ gen vi sinh vật 10-100ng;Sản phẩm PCR đặc trưng làm phiền Kanyon; 1ng-10%; DNA plasma 5-30 ng; cDNA từ phản ứng RT 1-5 μl.
2)phản ứng theo các điều kiện sau:
95℃ |
2-5 phút |
|
95℃ |
15 giây |
25-35 chu kỳ |
55~72℃ |
20 giây |
|
72℃ |
1 kb / phút |
|
72℃ |
5 phút |
3)Xét nghiệm điện di Agarose GelPCR sản phẩm, hoặc các hoạt động tiếp theo cho mục đích thí nghiệm.
Lưu ý1. PCR Điều kiện và hoang dã Taq DNA polymerase tương tự, đối với một số DNA Phản ứng giải trình tự có thể cần được tối ưu hóa.2. Khả năng mở rộng enzyme này hoang dã hơn TAQ DNA giảm polymerase,PCR Sản lượng giảm và không được khuyến khích cho các mục đích thông thường PCR。3. Không có sẵn cho người hâm mộ lựa chọn: Taqman Phương pháp thăm dò Q-PCR。