Bộ dụng cụ ELISA màng protein Golgi 1 (GOLM1)

Bộ dụng cụ ELISA màng protein Golgi 1 (GOLM1)Lưu ý

1. Ôn dục theo đúng thời gian và nhiệt độ quy định để đảm bảo kết quả chính xác. Tất cả các tác nhân phải đạt được nhiệt độ phòng 20-25 ° C trước khi sử dụng. Giữ lạnh thuốc thử ngay sau khi sử dụng.

2. Rửa tấm không chính xác có thể dẫn đến kết quả không chính xác. Hãy chắc chắn rằng bạn cố gắng hút khô chất lỏng bên trong lỗ trước khi thêm chất nền. Trong quá trình ôn dục đừng để lỗ nhỏ khô ráo.

3. Loại bỏ chất lỏng và dấu ngón tay còn lại từ đáy tấm, nếu không sẽ ảnh hưởng đến giá trị ODD.

4. Chất lỏng kết xuất màu nền nên có màu không màu hoặc rất nhạt, chất lỏng cơ bản đã chuyển sang màu xanh không thể sử dụng.

5. Tránh ô nhiễm chéo của thuốc thử và mẫu vật để không gây ra kết quả sai.

6. Tránh tiếp xúc trực tiếp với ánh sáng mạnh khi lưu trữ và sưởi ấm.

7. Sau khi cân bằng đến nhiệt độ phòng trước khi mở túi niêm phong để ngăn chặn các giọt nước ngưng tụ trên thanh lạnh.

8. Bất kỳ tác nhân phản ứng nào không thể tiếp xúc với khí mạnh phát ra từ dung môi tẩy trắng hoặc dung môi tẩy trắng. Bất kỳ thành phần tẩy trắng nào cũng phá vỡ hoạt tính sinh học của tác nhân phản ứng trong bộ.

9. Sản phẩm hết hạn không thể được sử dụng.

10. Nếu bệnh có thể lây lan, tất cả các mẫu phải được quản lý tốt, xử lý mẫu và thiết bị phát hiện theo quy trình quy định.

Chuẩn bị thuốc thử

Bộ dụng cụ được lấy ra khỏi môi trường lạnh nên được sử dụng sau khi cân bằng nhiệt độ phòng.

20 × dung dịch đệm rửa pha loãng: nước cất pha loãng theo tỷ lệ 1: 20, tức là 1 phần 20 × dung dịch đệm rửa cộng với 19 phần nước cất.

Bộ dụng cụ ELISA màng protein Golgi 1 (GOLM1)Các bước hoạt động

1. Loại bỏ các thanh mong muốn từ túi nhôm sau khi cân bằng nhiệt độ phòng 20 phút, các thanh còn lại được niêm phong bằng túi tự niêm phong và đặt trở lại 4 ℃.

2. Thiết lập lỗ sản phẩm tiêu chuẩn và lỗ mẫu, mỗi lỗ sản phẩm tiêu chuẩn thêm nồng độ khác nhau của sản phẩm tiêu chuẩn 50μL;

3. 50 μL mẫu được thử nghiệm được thêm vào lỗ mẫu; Lỗ trắng không thêm vào.

4. Ngoại trừ lỗ trống, 100 μL kháng thể phát hiện được đánh dấu bởi horseradish peroxidase (HRP) được thêm vào mỗi lỗ trong lỗ sản phẩm tiêu chuẩn và lỗ mẫu, và lỗ phản ứng được niêm phong bằng màng niêm phong, nồi tắm nước 37 ℃ hoặc bình giữ nhiệt độ 60 phút.

5. Loại bỏ chất lỏng, giấy thấm nước vỗ khô, mỗi lỗ đổ đầy chất lỏng giặt (350μL), để 1 phút, ném chất lỏng giặt, giấy thấm nước vỗ khô, lặp lại tấm giặt 5 lần (cũng có thể sử dụng máy giặt tấm).

6. Mỗi lỗ thêm chất nền A, B mỗi lỗ 50 μL, 37 ℃ tránh ánh sáng ủ 15 phút.

7. Mỗi lỗ thêm chất kết thúc 50μL, trong vòng 15 phút, xác định giá trị OD của mỗi lỗ ở bước sóng 450nm.

Tính toán kết quả thí nghiệm

Theo tiêu chuẩn đoGiá trị ODs là tọa độ ngang, giá trị nồng độ của sản phẩm tiêu chuẩn là tọa độ dọc, vẽ đường cong tiêu chuẩn trên giấy tọa độ hoặc với phần mềm liên quan và nhận được phương trình hồi quy thẳng, thay thế giá trị ODs của mẫu vào phương trình, tính toán nồng độ của mẫu.