Yếu tố tăng trưởng giống insulin-1 (IGF-1) ELISA Kit

Yếu tố tăng trưởng giống insulin-1 (IGF-1) ELISA Kit

Điều kiện bảo quản và ngày hết hạn

1. Bảo quản bộ dụng cụ: 2-8 ℃.

2. Ngày hết hạn: 6 tháng

Nguyên tắc thử nghiệm

Bộ dụng cụ này áp dụng phương pháp kẹp kháng thể kép để xác định mức độ tăng trưởng giống insulin-1 (IGF-1) trong mẫu vật. Được bọc trong một tấm micropore bằng kháng thể yếu tố tăng trưởng giống insulin-1 (IGF-1) tinh khiết của gia súc, kháng thể pha rắn được thêm vào micropore bao gồm yếu tố tăng trưởng giống insulin-1 (IGF-1), sau đó liên kết với kháng thể yếu tố tăng trưởng giống insulin-1 (IGF-1) được gắn nhãn HRP, tạo thành phức hợp kháng thể kháng nguyên-enzyme, sau khi rửa triệt để và màu cơ bản TMB. TMB được chuyển đổi thành màu xanh dưới sự xúc tác của enzyme HRP và cuối cùng là màu vàng dưới tác động của axit. Độ sâu của màu sắc và yếu tố tăng trưởng giống insulin-1 (IGF-1) trong mẫu có mối tương quan tích cực. Độ hấp thụ (ODvalue) được xác định ở bước sóng 450nm bằng máy đo enzyme, nồng độ yếu tố tăng trưởng giống insulin-1 (IGF-1) trong mẫu được tính bằng đường cong tiêu chuẩn.

Thành phần Kit

1Chất tẩy rửa đậm đặc 30x20ml x 1 chai7Chấm dứt chất lỏng6ml x 1 chai

2Thuốc thử Enzyme6ml x 1 chai8Sản phẩm tiêu chuẩn (64μg/L)0,5ml x 1 chai

3Tấm bao gói Enzyme12 lỗ × 8 dải9Chất lỏng pha loãng tiêu chuẩn1.5ml × 1 chai

4Chất lỏng pha loãng mẫu6ml x 1 chai10Hướng dẫn sử dụng1 phần

5Chất kết màu A Liquid6ml x 1 chai11Niêm phong tấm phim2 tờ

6Chất kết màu B lỏng6ml × 1/lọ12Túi niêm phong1 chiếc

Các bước hoạt động

1.Pha loãng sản phẩm tiêu chuẩn: Bộ dụng cụ này cung cấp một sản phẩm tiêu chuẩn ban đầu, người dùng có thể pha loãng trong ống nhỏ theo biểu đồ sau.

32μg / LTiêu chuẩn số 5Tiêu chuẩn ban đầu của 150μl Thêm 150μl pha loãng tiêu chuẩn

16 μg / LTiêu chuẩn số 4Sản phẩm tiêu chuẩn số 5 cho 150 μl Thêm dung dịch pha loãng tiêu chuẩn 150 μl

8 μg / LTiêu chuẩn số 3Tiêu chuẩn số 4 cho 150μl Thêm 150μl Pha loãng tiêu chuẩn

4 μg / LTiêu chuẩn số 2Tiêu chuẩn số 3 cho 150μl Thêm 150μl Pha loãng tiêu chuẩn

2 μg / LTiêu chuẩn số 1Sản phẩm tiêu chuẩn số 2 cho 150 μl Thêm dung dịch pha loãng tiêu chuẩn 150 μl

2.Gia mẫu: lần lượt thiết lập các lỗ trống (các lỗ đối chiếu trống không thêm mẫu và thuốc thử tiêu chuẩn, các bước còn lại thao tác giống nhau), các lỗ tiêu chuẩn, lỗ mẫu đợi kiểm tra. Trong gói enzyme được lấy mẫu chính xác bởi các sản phẩm tiêu chuẩn trên tấm 50 μl, mẫu pha loãng 40 μl được thêm vào lỗ mẫu để thử nghiệm, sau đó mẫu được thử nghiệm 10 μl (độ pha loãng cuối cùng của mẫu là 5 lần). Thêm mẫu vào đáy lỗ tiêu chuẩn, cố gắng không chạm đến vách lỗ, nhẹ nhàng lắc lư trộn đều.

3.Ôn dục: Dùng màng niêm phong sau đó đặt 37 độ C ôn dục 30 phút.

4.Phân phối: Pha loãng 30 lần nước cất cho chất tẩy rửa đậm đặc 30 lần cho dự phòng

5.Tẩy rửa: Cẩn thận bóc màng niêm phong, bỏ chất lỏng, bỏ khô, mỗi lỗ đổ đầy chất tẩy rửa, để yên 30 giây rồi bỏ đi, lặp lại 5 lần, vỗ khô.

6.Enzyme: 50 μl thuốc thử nhãn enzyme được thêm vào mỗi lỗ, ngoại trừ lỗ trống.

7.Ôn Dục: Thao tác cùng 3.

8.Rửa: hoạt động cùng 5.

9.Kết xuất màu: mỗi lỗ đầu tiên thêm chất kết xuất màu A50μl, sau đó thêm chất kết xuất màu B50μl, trộn đều với chấn động nhẹ, 37 ℃ tránh ánh sáng kết xuất màu trong 10 phút.

10.Chấm dứt: 50 μl chất chấm dứt được thêm vào mỗi lỗ, phản ứng chấm dứt (lúc này màu xanh chuyển sang màu vàng).

11.Xác định: Zero trong lỗ trống, bước sóng 450nm đo độ hấp thụ (giá trị ODD) của mỗi lỗ theo thứ tự. Việc xác định phải được thực hiện trong vòng 15 phút sau khi thêm chất chấm dứt.

tính toán

Lấy nồng độ của vật tiêu chuẩn làm tọa độ ngang, giá trị ODD làm tọa độ dọc, vẽ đường cong tiêu chuẩn trên giấy tọa độ, theo giá trị ODD của mẫu từ đường cong tiêu chuẩn để tìm nồng độ tương ứng; Lại nhân với bội số pha loãng; Hoặc sử dụng nồng độ vật liệu tiêu chuẩn và giá trị ODD để tính toán phương trình hồi quy thẳng của đường cong tiêu chuẩn, thay thế giá trị ODD của mẫu vào phương trình, tính toán nồng độ mẫu, sau đó nhân với bội số pha loãng, tức là nồng độ thực tế của mẫu.

Lưu ý

1. Bộ dụng cụ được lấy ra khỏi môi trường lạnh nên được sử dụng sau 15-30 phút cân bằng nhiệt độ phòng. Nếu gói tiêu chuẩn enzyme chưa được sử dụng hết sau khi tấm được mở ra, các thanh nên được đóng gói vào túi niêm phong để bảo quản.

2. Chất lỏng rửa mạnh có thể có kết tủa tinh thể, có thể được làm ấm trong bồn tắm nước khi pha loãng và không ảnh hưởng đến kết quả khi giặt.

3. Mỗi bước bổ sung mẫu nên được sử dụng và thường xuyên kiểm tra độ chính xác của nó để tránh lỗi thử nghiệm. Thời gian thêm mẫu một lần tốt nhất là trong vòng 5 phút, nếu số lượng mẫu vật nhiều, đề nghị sử dụng thêm mẫu súng trung đội.

4. Vui lòng làm đường cong tiêu chuẩn cùng một lúc với mỗi lần xác định, tốt nhất là làm lỗ kép. Nếu nội dung của vật liệu được đo trong mẫu quá cao (giá trị OD mẫu lớn hơn giá trị OD của lỗ đầu tiên của lỗ tiêu chuẩn), trước tiên hãy pha loãng một số lượng nhất định (n lần) với dung dịch pha loãng mẫu sau khi xác định, khi tính toán, vui lòng nhân tổng số lần pha loãng (× n × 5).

5. Màng niêm phong chỉ được sử dụng một lần để tránh ô nhiễm chéo.

6. Vật nền xin tránh ánh sáng.

Thực hiện đúng theo hướng dẫn, kết quả kiểm tra phải được xác định bằng cách đọc máy đo enzyme.

8. Tất cả các mẫu, chất tẩy rửa và chất thải khác nhau nên được xử lý theo chất truyền nhiễm.

9．Yếu tố tăng trưởng giống insulin-1 (IGF-1) ELISA KitCác nhóm số lô khác nhau không được trộn lẫn.