Thuốc thử chuyển đổi 78PEI MAX 40K

🔍 Tổng quan sản phẩm

Tên hóa học:tuyến tính polyethylamine, tuyến tính PEI, polyethylamine, tuyến tính, MW 40000， Lớp chuyển đổi, polyethylene amin tuyến tính (trọng lượng phân tử 40.000)

Số đặt hàng:78pei40000

quy cách100mg / 500mg / 5g

Nhãn hiệu:Sản phẩm BIOHUB

Trường hợp:49553-93-7

Trọng lượng phân tử:40.000 (~22.000 gốc tự do)

Hòa tan trong:Nước

Không hòa tan trong:Dung môi hữu cơ thường được sử dụng (ethanol, acetone, tetrahydrofur phía nam)

Xuất hiện:Chất rắn chảy tự do từ trắng đến trắng

Điều trị:Găng tay và tủ hút

Lưu trữ:Bảo quản khô tránh ánh sáng ở nhiệt độ phòng

Giới thiệu:

1.Thuốc thử chuyển đổi 78PEI MAX 40K（Còn được gọi là PEI 22K trong các cơ sở tự do) là một thuốc thử chuyển đổi tức thời chức năng *, đáng tin cậy và giá cả phải chăng. Trong hầu hết các hệ thống biểu hiện HEK293 và CHO, PEI MAX cung cấp sự biểu hiện ổn định cao (96-tấm đến 100L bioreactor). Ngày càng có nhiều nhà nghiên cứu và công ty sử dụng PEI MAX để chuyển đổi tế bào mỗi năm, vì PEI MAX có thể đợi cho đến khi biểu hiện ổn định và cao hơn so với hầu hết các thuốc thử chuyển đổi và giảm 40% chi phí chuyển đổi.

2. 78PEI MAX 40K dễ sử dụng hơn PEI 25K và có hiệu quả chuyển đổi cao hơn PEI 25K, thông thường quá trình chuyển đổi PEI 25K thường mất vài giờ để hoàn thành việc chuẩn bị, trong khi PEI MAX 40K có thể hoàn thành toàn bộ quá trình chuyển đổi trong vòng hai giờ. Ngoài ra, PEI 25K chứa 4-11% propionyl dư, có thể cản trở sự liên kết hiệu quả của chuỗi chính polymer với DNA, trong khi nhóm propionyl của PEI MAX 40K dễ rơi ra, có nghĩa là hiệu suất của PEI MAX ổn định hơn trên mỗi lô sản phẩm.

💎 Phương pháp cấu hình sản phẩm

1. Công thức lưu trữ (1 mg/mL)

- Chất liệu: 78PEI40000 bột, nước siêu tinh khiết, 1N NaOH, màng lọc 0,1μm

- Các bước:

① Lấy 1g bột và hòa tan trong 900 mL nước siêu tinh khiết, khuấy từ tính cho đến khi hòa tan;

② Thêm 1N NaOH để điều chỉnh pH đến 6,9-7,1 (nếu vượt quá giới hạn thì gọi lại 1N HCl);

③ Dung tích cố định đến 1L, lọc màng lọc 0,1μm để khử trùng;

④ Bảo quản 4 ℃ sau khi phân phối, chất lỏng có hiệu lực trong 6 tháng, bột đông khô có hiệu lực trong 1 năm.

2. Công thức chất lỏng làm việc

- Pha loãng theo tỷ lệ 1 μg DNA: 1-5 μL 78PEI40.000 dung dịch lưu trữ (tỷ lệ ban đầu được đề nghị 1: 3);

- Pha loãng DNA và PEI với môi trường không có huyết thanh như Opti-MEM và để ở nhiệt độ phòng trong 10-25 phút để tạo thành phức hợp.

📌 Quy trình vận hành truyền nhiễm

a) Chuyển hóa tế bào

1. Tiêm chủng tế bào: 24 giờ trước khi truyền nhiễm, mật độ lên đến 70% -80% hội tụ, thay thế bằng môi trường có chứa 5% huyết thanh;

2. ủ phức tạp: thêm phức hợp DNA-PEI vào đĩa petri từng giọt, ủ 4-6 giờ sau khi cuộn nhẹ;

3. Thay đổi chất lỏng và thử nghiệm: Thay đổi môi trường tươi, biểu hiện gen có thể được phát hiện sau 7 giờ, truyền lại và thêm thuốc sàng lọc sau 24 giờ.

(2) Chuyển đổi tế bào

1. Chuẩn bị tế bào: điều chỉnh mật độ tế bào đến 1 × 10 cells/mL, nuôi cấy rocker trong 2-4 giờ;

2. Thêm phức tạp: thả DNA-PEI phức tạp trực tiếp vào chai lắc, nuôi cấy dao động liên tục trong 24-72 giờ;

Tối ưu hóa khuếch đại: Các tế bào (1: 2-1: 5) có thể được pha loãng sau 24 giờ truyền để tăng sản lượng protein.

⚡Thuốc thử chuyển đổi 78PEI MAX 40KLưu ý chính

1. Yêu cầu hòa tan:

- Phải được hòa tan đầy đủ, các hạt không hòa tan có thể dẫn đến giảm hiệu quả truyền nhiễm;

- Nên sử dụng ống ly tâm NEST 5 mL/14 mL để xử lý dung dịch khối lượng lớn.

2. Kiểm soát pH:

Độ pH ban đầu cần được điều chỉnh chính xác đến 6,9-7,1, quá cao hoặc quá thấp đều ảnh hưởng đến sự hình thành phức hợp.

3. Trạng thái tế bào:

- Nên sử dụng các tế bào giai đoạn tăng trưởng logarit để tránh tiêu hóa quá mức tổn thương màng tế bào.

4. Kiểm soát độc tính:

- Tế bào mật độ cao (>90%) cần giảm liều PEI (tỷ lệ khuyến nghị 1: 1).

Để biết thêm thông tin sản phẩm, xin vui lòng liên hệ với Trung Quốc Đại lý khu vực: Shanghai Xingfa Experimental Agent Co., Ltd

Nếu bạn quan tâm đến bất kỳ sản phẩm hoặc thương hiệu nào khác, bạn có thể thông qua"Để lại lời nhắn trên mạng"Chức năng để lại nhu cầu của bạn

(Ghi chú: Nội dung bài viết này dựa trên tài liệu công khai thương hiệu và chỉnh lý thông tin thông thường trong ngành, cụ thể lấy tài liệu thông tin thương hiệu làm chuẩn).

⚡ BIOHUB Sản phẩm bán chạy

(Ghi chú: Nội dung của bài viết này