1. Chọn bộ phận đâm thủng:
a) Điểm đâm trước gai: nằm trên đỉnh gai trước gai sau gai 1 - 2 cm;
(2) điểm đâm sau chậu: vị trí nhô ra ở hai bên của đốt sống cùng, phía trên hông;
(3) Điểm thủng xương ức: vị trí của cán xương ức hoặc thân xương ức tương đương với, khe hở hai sườn;
(4) Điểm đâm thủng cột sống thắt lưng: nằm ở chỗ đâm thủng cột sống thắt lưng.
2. Tư thế đâm thủng: Lấy vị trí nằm ngửa khi xương ngực và gai trước ngực là điểm đâm thủng; Lấy vị trí ngồi hoặc nằm nghiêng khi gai đột nhiên đâm thủng; Khi gai phía sau là điểm đâm thủng, bệnh nhân lấy vị trí nằm nghiêng.
3. Trước khi phẫu thuật mang găng tay vô trùng, khử trùng da cục bộ thường xuyên, đắp khăn lỗ vô trùng, dùng 2% lidocaine làm gây mê da cục bộ, dưới da và màng xương.
4. Cố định kim đâm tủy xương ở vị trí chiều dài thích hợp (đâm vào xương ức khoảng 1,5 cm, đâm vào xương chậu khoảng 1,5 cm). Sau phẫu thuật, ngón cái và ngón trỏ tay trái cố định vị trí đâm thủng, tay phải cầm kim đâm thẳng vào mặt xương (khi đâm vào xương ức, nên giữ cho thân kim và xương ức tạo thành góc 30 °~40 °). Sau khi kim tiếp xúc với xương, xoay thân kim sang trái và phải, khoan từ từ, khi cảm thấy lực cản biến mất, kim đâm cố định trong xương, có nghĩa là đầu kim đã đi vào khoang tủy.
5, Rút lõi kim ra, đặt trong đĩa vô trùng, nối ống tiêm khô vô trùng 1Oml hoặc 20ml, hút một lượng vừa phải chất lỏng tủy xương để gửi xét nghiệm với lực thích hợp (trước tiên nên hút 0,1-0,2ml để chuẩn bị một vết bẩn tủy xương; Nếu cần nuôi cấy vi khuẩn tủy xương hoặc nuôi cấy tế bào gốc tạo máu, cần lấy thêm 1-2ml dịch tủy xương sau khi chuẩn bị xét nghiệm tủy xương).
6. Dịch tủy xương rút ra nhỏ lên tấm trượt, nhanh chóng làm số lượng tế bào hạt nhân và chuẩn bị bôi nhọ.
7. Nếu không thể rút ra tủy dịch, nên cắm vào lõi kim, xoay tròn thân kim một chút, hoặc khoan vào một chút hoặc rút ra một chút, rút lõi kim ra, rồi hút. Nếu vẫn không rút được dịch tủy xương thì nên xem xét thay thế vị trí đâm thủng hoặc làm sinh thiết tủy xương.
8. Hút xong, cắm kim vào. Tay trái lấy sợi vô trùng bố trí ở lỗ kim, tay phải rút kim đâm ra, lập tức đem băng gạc che lại lỗ kim, cũng ấn mấy phút, lại dùng băng dính đem băng gạc gia áp cố định.