I. Yêu cầu pháp lý

GMP đối với các phương pháp thử nghiệm trong ngành dược phẩm cần tham khảo các phương pháp thử nghiệm của ISO, trong khi ISO 14698-1 quy định kiểm soát ô nhiễm vi sinh vật đề cập đến giám sát vi sinh vật cần đánh giá hiệu quả thu thập (Collection efficiency), phương pháp lấy mẫu hiệu quả cao và thiết bị lấy mẫu có thể nhận được dữ liệu đại diện hơn. Đối với môi trường có tải sinh học thấp, chẳng hạn như môi trường loại A và B, nên sử dụng phương pháp lấy mẫu vi khuẩn phù du chủ động hơn là phương pháp lấy mẫu thụ động.

Hướng dẫn tiến hành đánh giá hiệu quả thu thập đối với hiệu quả thu thập của máy lấy mẫu vi sinh vật. Hiện hànhPhiên bản 2003 của ISO 14698 về hiệu quả thu thập được chia thành hiệu quả thu thập vật lý và hiệu quả thu thập sinh học, trong đó hiệu quả thu thập vật lý quan tâm nhiều hơn đến khả năng thu thập các hạt mang mầm trong không khí của phương pháp lấy mẫu, và hiệu quả thu thập sinh học quan tâm nhiều hơn đến việc liệu bộ lấy mẫu hoặc phương pháp lấy mẫu có thể đảm bảo tỷ lệ sống sót của hạt mang mầm trong khi thu thập được hay không.

II. Hiệu quả lấy mẫu của vi khuẩn bụi phóng xạ

Phương pháp lấy mẫu thụ động dựa trên trọng lực, có thể thu đượcHiệu suất thu của các hạt hoạt tính có kích thước hạt 12 micron lắng xuống đĩa phẳng lấy mẫu 9cm là 0,106 CFU/h và 0,256 CFU/h lắng xuống đĩa phẳng lấy mẫu 14cm. Và hiệu quả thu thập là 0,008 CFU/h đối với các hạt hoạt tính có kích thước hạt 1 micron lắng xuống đĩa phẳng lấy mẫu 9cm. Nếu nồng độ cao của Zozui là 1CFU/m3, một đĩa phẳng 9cm sẽ cần tiếp xúc với mẫu Zozui trong 1250 giờ (tương đương 52 ngày) để phát hiện dữ liệu có ý nghĩa (một CFU) trong môi trường tải trọng ô nhiễm sinh học thấp.

Lời bài hát: Fallout Bacteria"Đây là một phương pháp lấy mẫu quá kém nhạy cảm" và "vi khuẩn bụi phóng xạ phản ánh tốt hơn hiệu ứng lắng đọng của các hạt mang mầm, chỉ nhạy cảm hơn khi lấy mẫu đĩa phẳng lớn hơn (như 14cm) hoặc khi thu thập nhiều đĩa phẳng lấy mẫu". Việc thu thập các hạt 1 micron cho phương pháp lấy mẫu chủ động hiệu quả hơn 2250 lần so với phương pháp thu thập thụ động 9cm của vi khuẩn bụi phóng xạ. Đối với việc lấy mẫu vi sinh vật trong môi trường dòng chảy phân tầng, các phương pháp lấy mẫu nhạy cảm hơn được khuyến nghị.

Các phương pháp lấy mẫu như bụi phóng xạ cho các quá trình không vô trùng với tải trọng tương đối cao của vi sinh vậtMôi trường loại C, D, có thể được sử dụng như một bổ sung cho việc lấy mẫu vi sinh vật, kết hợp với các phương pháp lấy mẫu phù du có thể được sử dụng cùng nhau. Đối với môi trường A, B, phương pháp lấy mẫu phù du phù hợp hơn như một phương pháp lấy mẫu hiệu quả hơn.

Rủi ro trong giám sát hàng ngày

Như các bạn đã biết, EUDự thảo Phụ lục I về sản xuất vô trùng GMP được công bố ngày 24/12/2017 với những thay đổi rất lớn bao gồm:

a) Tăng gấp đôi vi sinh vật và các tham chiếu liên quan (23 lần được đề cập trong Phụ lục cũ và 68 lần được đề cập trong Dự thảo mới)

b) Đề cập đến rủi ro đã tăng gần gấp 4 lần (20 đề cập trong Phụ lục trước và 92 đề cập trong Dự thảo mới).

Vì vậy có thể hiểu được mức độ coi trọng của cơ quan quản lý đối với vi sinh vật và rủi ro đạt tới mức độ chưa từng có. Trong đó, đối với giám sát hàng ngày, phụ lục mớiVị trí giám sát các hạt hoạt tính (vi sinh vật) được đề cập trong Điều 9.7 phải là vị trí có nguy cơ ô nhiễm sản xuất vô trùng, chẳng hạn như bề mặt vô trùng, phích cắm keo container mở, v.v. Điều 9.29 quy định rằng phương pháp lấy mẫu các hạt hoạt tính (vi sinh vật) không nên gây ra bất kỳ rủi ro ô nhiễm nào đối với sản xuất dược phẩm (Reference 2). Vì vậy, chúng ta có thể thấy suy nghĩ của các nhà quản lý, người tin rằng cả giám sát vi sinh vật là rất quan trọng và việc áp dụng các phương pháp lấy mẫu không phù hợp sẽ có tác động tiêu cực đến môi trường sản xuất.

Đây là một vấn đề nan giải trong ngành công nghiệp của chúng tôi. Trước đây, nhiều doanh nghiệp đã quyết định không theo dõi vi sinh vật chủ động (vi khuẩn phù du) do không thể tìm ra một phương pháp vi sinh vật phù hợp và lo ngại rằng việc thay thế đĩa phẳng của phương pháp lấy mẫu vi khuẩn phù du thường xuyên sẽ gây ô nhiễm môi trường dược phẩm. Với sự phát triển của ngành công nghiệp dược phẩm hiện đại, chúng tôi đã nhận ra sự cần thiết phải nâng cao đánh giá rủi ro và xác định rủi ro của chúng tôi đối với các phương pháp lấy mẫu vi sinh vật.

Phương pháp bụi phóng xạ có thể gây ô nhiễm môi trường, chúng ta biết rằng có rất nhiều nước dinh dưỡng trên bề mặt của bụi phóng xạ.Từ 10 micron đến 20 micron, khi bụi phóng xạ tiếp xúc với môi trường sản xuất quan trọng, những độ ẩm dinh dưỡng này có thể bị thổi lên bề mặt vô trùng, bên trong lọ thuốc, trong dung dịch thuốc, gây ô nhiễm và ô nhiễm chéo.

Lấy mẫu vi khuẩn phù du bởi vì môi trường nuôi cấy tương đối dễ khô, tốc độ dòng chảy lấy mẫu hiện đại được thiết kế để lấy mẫu tốc độ dòng chảy thấp, có thể cố gắng kéo dài thời gian sản xuất nắp đậy lấy mẫu vi khuẩn phù du, không nên thường xuyên tiến hành giới thiệu thay thế đĩa phẳng. Thường được xem xétMục đích của việc bảo vệ luồng không khí của môi trường dòng chảy tầng, chúng tôi cũng muốn lấy mẫu vi khuẩn phù du để thực hiện thiết kế lấy mẫu đẳng cấp, để đảm bảo rằng không khí phía trên bộ lấy mẫu trình bày mẫu đẳng cấp, không gây ô nhiễm cho trang web.

Phương pháp lấy mẫu vi sinh vật truyền thống là đưa toàn bộ bộ lấy mẫu vàoMôi trường, trong khi các phương pháp kiểm soát quá trình vô trùng hiện đại đòi hỏi bất kỳ thiết bị vật liệu nào đi vào phải được khử trùng đầy đủ. Phương pháp truyền thống đặt mẫu vào, do các bộ phận điện của bảng mạch bên trong mẫu không thể khử trùng, thường là các công ty lấy mẫu VHP hoặc rượu khử trùng bề mặt mẫu, không thể đạt được hiệu quả khử trùng. Các yêu cầu kiểm soát quá trình vô trùng của WHO khuyến cáo rằng các công ty dược phẩm nên lấy mẫu phương pháp lấy mẫu vi sinh vật, tức là tách đầu lấy mẫu và bộ lấy mẫu, đặt đầu lấy mẫu và có thể được khử trùng nhiệt độ cao hoặc hóa học trước, và bộ lấy mẫu được đặt trong môi trường nền B để hoạt động. Như vậy, có thể tránh được ảnh hưởng của việc máy lấy mẫu không thể khử trùng.

kết luận

Tóm lại, các phương pháp lấy mẫu phù du đã được chứng minh hiệu quả cao hơn so với các phương pháp lấy mẫu bụi phóng xạ và phù hợp để sử dụng trong các môi trường sản xuất vô trùng quan trọng, có tải sinh học thấp. Và phương pháp lấy mẫu bụi phóng xạ có thể được sử dụng như một phương pháp bổ sung cho việc lấy mẫu vi khuẩn phù du trong quá trình sản xuất, có thể được sử dụng trong môi trường không vô trùng tương đối quan trọng, tải trọng sinh học cao, khi sử dụng cần tránh rủi ro ô nhiễm do vị trí đặt không đúng hoặc vận hành sai. Bất kể phương pháp nào được sử dụng, vị trí, tần suất lấy mẫu, thời gian phủ mẫu và tốc độ dòng chảy mẫu nên được xác định dựa trên đánh giá rủi ro của quy trình sản xuất.