1 Phạm vi: Tiêu chuẩn này quy định các điều kiện thử nghiệm và phương pháp thử nghiệm phù du trong phòng vô trùng và khu vực sạch của ngành dược phẩm.

Tiêu chuẩn này áp dụng cho việc kiểm tra và xác minh môi trường của các vi khuẩn phù du trong phòng vô trùng và khu vực sạch, phòng vô trùng hoặc khu vực lọc không khí cục bộ (bao gồm cả bàn làm việc sạch) của ngành dược phẩm.

2 Tiêu chuẩn trích dẫn: GB/T 16293? 2010

Thông số sản phẩm Thông tin sản phẩm Bình Luận(

3 Tiêu chuẩn

Độ sạch	Số lượng vi sinh vật sống/m3
100 cấp	5
Lớp 10000	100
Lớp 100000	500

4 Phương pháp kiểm tra

4.1 Thức ăn phương pháp

Phương pháp được sử dụng trong mẫu vật này là phương pháp đếm nồng độ. Ví dụ, bằng cách thu thập các hạt sinh học lơ lửng trong không khí vào một môi trường đặc biệt (lựa chọn môi trường có thể xác nhận rằng chúng có thể hỗ trợ sự phát triển của vi sinh vật), sau một số thời gian và điều kiện phát triển thích hợp cho phép chúng nhân lên đến số lượng khuẩn lạc có thể nhìn thấy để xác định nồng độ vi sinh vật trong phòng sạch này.

4.2 Nhiệm vụ và đào tạo nhân viên

Người kiểm tra phòng vô trùng phải được đào tạo và đạt được trình độ tương ứng trước khi thực hiện nhiệm vụ kiểm tra phòng vô trùng, bao gồm kiến thức vệ sinh liên quan và kiến thức cơ bản về vi sinh vật.

Người kiểm tra phòng vô trùng nên chọn cách ăn mặc phù hợp với yêu cầu về độ sạch không khí của hoạt động sản xuất, quần áo bên ngoài không được mang vào khu vực trên 100.000 cấp.

4.3 Dụng cụ, thiết bị phụ trợ và môi trường

Chọn mẫu phù hợp cho vi khuẩn phù du, bao gồm việc sử dụng máy bơm không dầu, tốc độ dòng chảy thấp hơn và lưu lượng mẫu lớn hơn để đảm bảo rằng sự phân bố nước trên bề mặt môi trường được thổi khô.

Kiểm tra này đòi hỏi phải có dụng cụ, thiết bị phụ trợ và môi trường như sau:

a) Bộ lấy mẫu vi khuẩn phù du;

b) Đĩa petri;

c) Nồi khử trùng áp suất cao;

d) Môi trường nuôi cấy;

e) Tủ nuôi cấy nhiệt độ không đổi;

4.4 Nguyên tắc lấy mẫu Plankton

Bộ lấy mẫu vi khuẩn phù du thường sử dụng cơ chế phương pháp tác động, có thể được chia thành bộ lấy mẫu kiểu kẹp, loại ly tâm hoặc loại lỗ kim. Bộ lấy mẫu kiểu kẹp hút luồng không khí bằng quạt bên trong và thông qua tấm kẹp của bộ lấy mẫu, không khí thu được sẽ phun ra và va chạm vào bề mặt của môi trường tấm chậm, nơi các hạt vi sinh vật sống gắn liền được nuôi cấy để hình thành các thuộc địa. Bộ lấy mẫu ly tâm do vòng quay tốc độ cao của quạt bên trong, luồng không khí chảy ra từ phía trước của bộ lấy mẫu vào phía sau. Dưới tác động của lực ly tâm, các hạt vi sinh vật sống trong không khí có đủ thời gian để tác động vào các dải nuôi cấy rắn để gắn các hạt vi sinh vật sống sau khi nuôi cấy tạo thành các thuộc địa. Máy lấy mẫu lỗ kim là luồng không khí được hút qua một nắp kim loại, trên nắp là lỗ nhỏ được chế tạo đặc biệt dày đặc, thông qua quạt sẽ tác động trực tiếp đến bề mặt môi trường phẳng, các hạt vi sinh vật sống gắn liền sau khi nuôi cấy và hình thành thuộc địa.

4.5 Điểm kiểm tra

4.5.1 Thiết bị kiểm tra phải được kiểm tra định kỳ theo chu kỳ kiểm tra của thiết bị. Kiểm tra đủ tiêu chuẩn nên được sử dụng và các công cụ trong thời hạn hiệu lực sẽ được sử dụng.

4.5.2 Khi dụng cụ thử nghiệm không đi vào khu vực thử nghiệm, nếu cần thiết, hãy rửa sạch bề mặt hoặc chuẩn bị và cất giữ trong phòng vô trùng tương ứng (bảo vệ dụng cụ bằng vỏ bảo vệ hoặc vỏ ngoài thích hợp khác).

4.5.3 Khi sử dụng giấy vô trùng trong nhà cấp 100, nó phải được phủ một lớp phủ trong suốt không bụi, trong phòng vô trùng cấp 100 không thể sử dụng cao su bút chì.

4.5.4 Khi sử dụng dụng cụ kiểm tra phải tuân thủ nghiêm ngặt các hướng dẫn.

4.5.4.1 Thiết bị được bật, sau khi làm nóng trước đến ổn định, nó có thể được điều chỉnh cho thiết bị theo quy định của hướng dẫn, đồng thời kiểm tra lưu lượng mẫu và đặt thời gian theo khối lượng mẫu.

4.5.4.2 Cổng lấy mẫu phải được sản xuất bằng vật liệu dễ khử trùng và ổn định về mặt hóa học.

4.5.4.3 Ống lấy mẫu bị nghiêm cấm rò rỉ và tường bên trong phải nhẵn.

4.5.4.4 Chiều dài của ống lấy mẫu phải được xác định theo chiều cao của điểm đo, giảm thiểu độ cong.

4.6 Đĩa petri

4.6.1 Thông thường sử dụng đĩa petri φ90mm × 15mm. Đĩa petri thích hợp có thể được chọn dựa trên mẫu được chọn.

4.6.2 Thanh nuôi cấy rắn được sử dụng bởi mẫu ly tâm

4.7 Môi trường

Môi trường thạch casein đậu nành (TSA) hoặc môi trường cát (SDA) hoặc môi trường khác được người dùng công nhận và chứng minh.

4.8 Tủ nuôi cấy nhiệt độ không đổi

Tủ nuôi cấy nhiệt độ không đổi phải được kiểm tra định kỳ

4.9 Các bước kiểm tra;

4.9.1 Dụng cụ, bề mặt đĩa petri trước khi thử nghiệm phải được khử trùng nghiêm ngặt.

4.9.1.1 Máy lấy mẫu được khử trùng bằng chất khử trùng của phòng khử trùng trước khi vào phòng thử nghiệm, máy lấy mẫu cho phòng vô trùng 100 cấp

Nên đặt trước trong phòng được kiểm tra.

4.9.1.2 Lau sạch bề mặt bên ngoài của đĩa petri bằng chất khử trùng.

4.9.1.3 Trước khi lấy mẫu, hãy sử dụng nắp trên cùng của bộ lấy mẫu khử trùng bằng chất khử trùng, bàn xoay và bên trong và bên ngoài của bộ lấy mẫu, kết thúc lấy mẫu, sau đó nhẹ nhàng phun thuốc khử trùng vào tường bên trong và bàn xoay của bộ lấy mẫu.

4.9.1.4 Cổng lấy mẫu và ống lấy mẫu phải được khử trùng ở nhiệt độ cao trước khi sử dụng. Nếu dùng thuốc khử trùng để khử trùng tường ngoài và tường trong của ống lấy mẫu, nên đổ và hong khô chất lỏng còn sót lại trong ống.

4.9.1.5 Người lấy mẫu phải mặc quần áo lao động tương ứng với khu vực được kiểm tra sạch sẽ, khử trùng bằng thuốc khử trùng hoặc vận hành bằng găng tay vô trùng bằng cả hai tay trước khi đặt hoặc thay đĩa petri trên bàn xoay.

4.9.1.6 Dụng cụ lấy mẫu không được đặt vào đĩa petri sau khi khử trùng, bật máy lấy mẫu phù du để làm cho chất khử trùng còn lại trong dụng cụ bốc hơi, thời gian không ít hơn 5 phút, và kiểm tra dòng chảy và điều chỉnh thời gian thiết lập theo khối lượng lấy mẫu.

4.9.1.7 Tắt bộ lấy mẫu nổi, đặt vào đĩa petri, đậy nắp lại.

4.9.1.8 Sau khi đặt cổng lấy mẫu tại điểm lấy mẫu, mở bộ lấy mẫu vi khuẩn phù du để lấy mẫu.

4.10 Đào tạo

4.10.1 Sau khi lấy mẫu đầy đủ, đĩa petri được đặt ngược vào một tủ nuôi cấy nhiệt độ không đổi.

4.10.2 Nuôi cấy được xây dựng với môi trường thạch casein đậu nành (TSA) sau khi lấy mẫu, được nuôi cấy trong 30 ℃~35 ℃ môi trường nuôi cấy, thời gian không được ít hơn 2d; đĩa petri được xây dựng với môi trường cát (SDA) sau khi lấy mẫu, được nuôi cấy trong 20 ℃~25 ℃ môi trường nuôi cấy, thời gian không ít hơn 5d.

4.10.3 Mỗi lô môi trường nuôi cấy phải được kiểm tra đối chiếu để kiểm tra xem cơ thể nuôi cấy có bị ô nhiễm hay không. Bạn có thể chọn 3 bánh đào tạo đối chiếu mỗi đợt.

4.11 Số lượng thuộc địa

4.11.1 Dùng mắt thường đếm trực tiếp tất cả các thuộc địa trên đĩa petri, đánh dấu hoặc đếm trên bộ đếm thuộc địa, sau đó dùng kính lúp 5-10 lần để kiểm tra xem có thiếu sót hay không.

4.11.2 Nếu có 2 hoặc nhiều hơn các thuộc địa chồng chéo lên nhau trên một tấm phẳng, có thể được tính bằng 2 hoặc nhiều hơn.

4.12 Thận trọng

4.12.1 Chất lượng của mỗi đĩa petri phải được kiểm tra cẩn thận trước khi sử dụng, vì môi trường và đĩa petri bị hư hỏng hoặc bị ô nhiễm không thể sử dụng được.

4.12.2 Ghi chép chi tiết về môi trường nuôi cấy, điều kiện nuôi cấy và các thông số khác.

4.12.3 Do sự đa dạng của các loại vi khuẩn, sự khác biệt là rất lớn, khi đếm thường được quan sát cẩn thận bằng cách truyền ánh sáng vào bề mặt đĩa petri hoặc bề mặt thật, không bỏ lỡ các khuẩn lạc phát triển ở rìa đĩa petri, và cần phải có sự khác biệt giữa các khuẩn lạc hoặc môi trường lắng đọng, khi cần thiết được phân biệt bằng kính hiển vi.

5 Quy tắc kiểm tra

5.1 Điều kiện kiểm tra

Trước khi thử nghiệm, để kiểm tra trước các thông số liên quan đến buồng vô trùng, loại thử nghiệm này sẽ kiểm tra các điều kiện môi trường của các hạt lơ lửng, ví dụ: loại thử nghiệm trước này hoặc có thể bao gồm:

a) Kiểm tra nhiệt độ và độ ẩm tương đối. Nhiệt độ và độ ẩm tương đối của buồng vô trùng phải phù hợp với yêu cầu sản xuất và quy trình của nó.

Phải (khi không có yêu cầu đặc biệt, nhiệt độ được kiểm soát từ 18 ℃~26 ℃, độ ẩm tương đối được kiểm soát từ 45%~65% là thích hợp). Full cùng lúc

Phạm vi sử dụng dụng cụ kiểm tra chân;

b) Kiểm tra khối lượng không khí hoặc tốc độ gió trong nhà hoặc kiểm tra chênh lệch áp suất;

c) Kiểm tra rò rỉ bộ lọc

5.1 Tình trạng kiểm tra

Cả hai trạng thái tĩnh và động đều có thể được kiểm tra.

Không có nhiều hơn 2 người kiểm tra trong nhà khi kiểm tra tĩnh

Trước khi thử nghiệm vi khuẩn phù du, phòng vô trùng được xác định (khu vực) tùy thuộc vào người dùng để quyết định có cần khử trùng trước hay không.

Kiểm tra vi khuẩn phù du nên đánh dấu trạng thái được sử dụng tại thời điểm kiểm tra và số lượng người kiểm tra trong phòng.

5.3 Thời gian kiểm tra

5.3.1 Khi thử nghiệm ở trạng thái trống hoặc tĩnh a, đối với buồng vô trùng dòng chảy một chiều, thử nghiệm nên bắt đầu sau thời gian hoạt động của hệ thống điều hòa không khí sạch không dưới 10 phút. Đối với buồng vô trùng dòng chảy không một chiều, thử nghiệm nên bắt đầu sau thời gian hoạt động bình thường của hệ thống làm sạch không ít hơn 30 phút. Trong thử nghiệm tĩnh b, làm sạch dòng chảy một chiều là (khu vực), thử nghiệm nên bắt đầu sau khi các nhà khai thác sản xuất rút khỏi trang web và sau 10 phút tự làm sạch; Đối với phòng vô trùng không một chiều, thử nghiệm nên bắt đầu sau khi nhân viên vận hành sản xuất sơ tán khỏi hiện trường và sau 20 phút tự làm sạch.

5.3.2 Khi thử nghiệm động, thời gian bắt đầu sản xuất và thời gian thử nghiệm phải được ghi lại.

5.4. Tính toán nồng độ phù du

5.4.1 Số lượng điểm lấy mẫu và cách sắp xếp

5.4.1.1 Số lượng mẫu ít hơn

Vị trí điểm lấy mẫu của vi khuẩn phù du có thể tham khảo GB/T16292-2010

a) Vị trí đo của khu vực làm việc cách mặt đất khoảng 0,8~1,5m (cao hơn một chút so với bề mặt làm việc).

b) Vị trí đo điểm gió cách mặt gió khoảng 30 cm.

c) Các điểm đo có thể được tăng cường trên các thiết bị quan trọng hoặc trong phạm vi hoạt động công việc quan trọng.

5.4.2 Khối lượng mẫu nhỏ

Số lượng mẫu nhỏ cho mỗi vi khuẩn phù du được trình bày trong Bảng 1.

Bảng 1 Số lượng mẫu nhỏ

Sạch sẽ	Số lượng mẫu L/lần
100 cấp	1000
Lớp 10000	500
Lớp 100000	100
Lớp 300000	100

5.4.3 Số mẫu

Mỗi điểm lấy mẫu thường được lấy mẫu một lần.

5.4.4 Lưu ý lấy mẫu

5.4.4.1 Đối với buồng vô trùng dòng chảy một chiều hoặc không khí nạp, cổng lấy mẫu của bộ lấy mẫu hướng về luồng không khí đối diện trực tiếp; Đối với buồng vô trùng dòng chảy không một chiều, cổng lấy mẫu hướng lên trên.

5.4.4.2 Khi bố trí các điểm lấy mẫu, ít nhất nên cố gắng tránh các lỗ hồi khí nơi các hạt bụi tập trung hơn.

5.4.4.3 Khi lấy mẫu, người kiểm tra nên đứng ở phía gió xuôi của miệng lấy mẫu và di chuyển ít nhất có thể.

5.4.4 Thực hiện tất cả các biện pháp để ngăn ngừa ô nhiễm của quá trình lấy mẫu và các ô nhiễm khác có thể xảy ra đối với mẫu.

5.4.4.5 Khi sử dụng để kiểm tra đĩa petri, để tránh ảnh hưởng của quá trình vận chuyển hoặc di chuyển đĩa petri, cần tiến hành kiểm tra đối chứng âm tính cùng một lúc, mỗi lần hoặc mỗi khu vực lấy 1 đĩa đối chứng, vận hành giống như đĩa mẫu nhưng không để lộ đĩa mẫu, sau đó đưa vào trong hộp nuôi cấy cùng với đĩa petri sau khi lấy mẫu (TSA hoặc SDA), kết quả là không có khuẩn lạc để phát triển.

5.5 Kỷ lục

Những điều sau đây nên được đưa vào báo cáo kiểm tra

a) Tên và địa chỉ của người kiểm tra, ngày kiểm tra;

b) Dựa trên thử nghiệm

c) Vị trí mặt phẳng của phòng thí nghiệm vô trùng (đánh dấu vị trí mặt phẳng của khu vực liền kề nếu cần);

d) Mô tả về dụng cụ thử nghiệm và phương pháp thử nghiệm của nó: bao gồm điều kiện môi trường thử nghiệm, số điểm lấy mẫu và bản vẽ bố trí, số lần thử nghiệm, lưu lượng mẫu hoặc thay đổi có thể có đối với phương pháp thử nghiệm, giấy chứng nhận kiểm tra của dụng cụ thử nghiệm, v.v. Trong trường hợp kiểm tra động, số lượng và vị trí của người vận hành trang web cũng phải được ghi lại, số lượng và vị trí của thiết bị vận hành trang web;

e) Kết quả: Bao gồm tất cả các tính toán thống kê.

5.6 Tính toán kết quả

5.6.1 Sử dụng phương pháp đếm để tính số lượng khuẩn lạc của từng đĩa petri.

5.6.2 Tính toán nồng độ trung bình của vi khuẩn phù du tại mỗi điểm đo, xem công thức (1).

Nồng độ trung bình (đơn vị/m3)=số lượng khuẩn lạc/mẫu vật?????????? (1)

Ví dụ 1: Số lượng mẫu tại một điểm đo là 400L và số lượng khuẩn lạc là 1 thì:

Nồng độ trung bình=1/0,4=2,5/m3

Ví dụ 2: Số lượng mẫu tại một điểm đo là 2m3 và số lượng khuẩn lạc là 3 thì:

Nồng độ trung bình=3/2=1,5/m3

5.7 Đánh giá kết quả

5.7.1 Nồng độ trung bình của vi khuẩn phù du tại mỗi điểm đo phải thấp hơn giới hạn về nồng độ vi khuẩn trong tiêu chí đánh giá đã chọn.

5.7.2 Trong thử nghiệm tĩnh, nếu nồng độ trung bình của vi khuẩn phù du tại một điểm đo vượt quá tiêu chuẩn đánh giá, nó phải được lấy mẫu lại hai lần và cả hai kết quả thử nghiệm đều phù hợp để được coi là phù hợp.

5.8 Giám sát hàng ngày

Đối với việc giám sát vi khuẩn phù du, cần thiết lập giới hạn sửa chữa và giới hạn cảnh báo theo một hướng dòng chảy song song và vuông góc với luồng không khí trên mặt cắt của tốc độ gió, để đảm bảo rằng nồng độ vi sinh vật trong buồng vô trùng được kiểm soát. Cần thường xuyên kiểm tra tải vi sinh vật và hiệu quả của chất khử trùng, không phân tích xu hướng. Cả giám sát tĩnh và động đều có thể áp dụng phương pháp này.

Đối với tần suất lấy mẫu của vi khuẩn phù du, cần xem xét sửa đổi nếu phát sinh các trường hợp sau đây, cũng cần xác định tần suất phát hiện của các hạng mục khác khi đánh giá các trường hợp sau:

--------- liên tục vượt quá giới hạn sửa chữa và cảnh báo;

--------- Thời gian ngừng hoạt động kéo dài hơn dự kiến;

--------- Trong quá trình sản xuất, bất kỳ sửa chữa lớn nào được thực hiện bởi hệ thống lọc không khí;

---------------- Thường xuyên thực hiện ghi chép để chiếu ra dữ liệu có tính khuynh hướng;

------------- thay đổi các quy trình khử trùng;

--------- ô nhiễm sinh học, vv;

--------- Khi có sửa chữa lớn hoặc bổ sung thiết bị cho thiết bị sản xuất;

------------ Khi có những thay đổi đáng kể trong phân phối các khu vực cấu trúc buồng vô trùng.

Chiết Giang Su Tịnh Thiết bị làm sạch Công ty TNHHNằm ở thị trấn Dao Khư, quận Thượng Ngu, thành phố Thiệu Hưng, tỉnh Chiết Giang, là một trong những nhà sản xuất trong ngành công nghiệp thiết bị làm sạch khu vực Hoa Đông. Nó có thể theo tiêu chuẩn ISO14644-1, tiêu chuẩn quốc gia GB50073-2001 và yêu cầu đặc tả GMP quốc gia cho thiết kế kỹ thuật, xây dựng, thử nghiệm và dịch vụ kỹ thuật của hệ thống lọc không khí trong các ngành công nghiệp vi điện tử, y sinh học, phòng điều hành bệnh viện, cáp quang, thực phẩm và đồ uống, dụng cụ chính xác, chất bán dẫn và ứng dụng vật liệu mới.
Công ty chủ yếu làm sạch bàn làm việc loạt, phòng tắm gió loạt, tủ hút loạt, sinh học an toàn tủ loạtNó được sử dụng rộng rãi trong y tế và y tế, điện tử, dược phẩm, sinh học, thực phẩm, nông lâm nghiệp, chăn nuôi thú y, kiểm tra và kiểm dịch, hàng không vũ trụ, sản xuất ô tô, dụng cụ chính xác, các trường đại học và cao đẳng và các tổ chức nghiên cứu khoa học khác nhau, có uy tín cao trong thị trường và Đông Nam Á.
Công ty TNHH Thiết bị thanh lọc Tô Tịnh tỉnh Chiết Giang hết sức trung thành phục vụ người tiêu dùng và nhà phân phối, sẽ lấy sản phẩm; Dịch vụ nhân đạo; Rẻ tiền; Nhiệt tình hoan nghênh sự gia nhập của ngài!